清热润燥口服液抗炎、祛痰作用的实验研究

魏丹霞 谭艳云 徐静逍 程馨缘 杨仁华 陆家龙

摘要：目的研究清热润燥口服液的抗炎、祛痰作用。方法通过小鼠背部琼脂肉芽肿实验及小鼠气管段酚红实验，观察清热润燥口服液在抗炎、祛痰方面的作用。结果清热润燥口服液能明显抑制肉芽肿的形成（P<005）；能增加气管对酚红的排泌量（P<005）。结论清热润燥口服液具有抗炎作用、高剂量具有祛痰作用。

关键词：清热润燥口服液；抗炎作用；祛痰作用

中图分类号：R2855文献标志码：A文章编号：1007-2349（2017）05-0078-02

清热润燥口服液来源于云南省名老中医陆家龙的三十余年的临床经验方清热润燥方（桑叶、芦根、麦冬、沙参、茯苓、陈皮等13味天然药），经过现代制剂工艺加工而成。临床研究证明该方具有清热养阴，润燥止咳作用。主要用于慢性支气管炎急性发作、感冒后咳嗽、咽炎等燥咳患者，临床疗效佳、安全无毒。为确保该口服液的顺利研发，现将其抗炎、祛痰作用的药效学实验报告如下。

1材料

11实验动物健康KM小鼠，雌雄各半，体重（20±2）g，SPF级，动物合格号：0021916，实验动物及实验动物饲养观察均由昆明医科大学实验动物学部提供。

12受试药物清热润燥口服液（桑叶、芦根、麦冬、沙参、茯苓、陈皮等13味天然药组成）由昆明市中医医院制剂室提供（294 g原生药/mL）。药物保存于4～8℃冰箱中备用，使用前复温至20～25℃使用。

13主要试剂琼脂糖（赛百盛，纯度：99%）、地塞米松磷酸钠注射液（天津金耀药业有限公司，国药准字：H12020514）、生理盐水（昆明南疆制药有限公司，国药准字：H33020484）、氯化铵（天津市化学试剂三厂）、苯酚红（上海三爱思试剂有限公司）、氢氧化钠（西陇化工股份有限公司，许可证号：XK13-201-00153）。

14仪器分析天平（Sartorius，德国）、酶标仪（Thermo，美国）。

2实验方法

21抗炎药效学实验研究

211给药剂量的确定[1]根据标准动物的等效剂量折算系数法（Bios氏原法），来进行不同动物间的剂量换算，进而得出治疗剂量。低剂量为治疗剂量的2倍，中剂量为治疗剂量的5倍，高剂量为治疗剂量的10倍。实验中采用的剂量为清热润燥口服液低剂量组390 mL/kg/d、中剂量组975 mL/kg/d、高剂量组1950 mL/kg/d，地塞米松组100 mg/kg/d。

[KG（0.25mm]212对抗炎作用的影响——小鼠背部琼脂肉芽肿试验[2]取KM小鼠50只，每只背部一次性皮下注射2%的琼脂糖溶液01 mL后，建立小鼠异物性炎症模型，随机分为5组：阴性对照组、清热润燥口服液低、中、高3个剂量组和地塞米松组，每组10只。注射当天开始灌胃给药，阴性对照组按01 mL/10 g体重灌胃生理盐水，其他各实验组灌胃对应药物，连续10天，每天1次。以上各组均于末次给药1 h后，脱颈处死，自皮下将琼脂连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，用分析天平称质量，并记录肉芽的质量。将称得的质量减去琼脂质量即得肉芽肿的质量，比较各组的肉芽重，肉芽抑制率。具体计算公式：肉芽抑制率（%）=（（阴性对照组肉芽质量-用药组肉芽质量）/阴性对照组肉芽质量）×100。[KG）]

22祛痰药效学实验研究

[JP2]221给药剂量的确定[1]根据标准动物的等效剂量折算系数法（Bios氏原法），来进行不同动物间的剂量换算，进而得出治疗剂量。低剂量为治疗剂量的2倍，中剂量为治疗剂量的5倍，高剂量为治疗剂量的10倍。实验中采用的剂量为清热润燥口服液低剂量组390 mL/kg/d、中剂量组975 mL/kg/d、高剂量组1950 mL/kg/d，氯化铵100 g/kg/d。[JP]

222清热润燥口服液对小鼠的祛痰作用——气管段酚红法[3]取KM小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，即空白对照组、阳性对照组（药物浓度为：10 g/kg氯化铵）、清热润燥口服液高剂量组、中剂量组和低剂量组，[HJ2.4mm]每组10只。实验前各组昆明小鼠禁食不禁水12 h，然后空白对照组小鼠按01 mL/10 g体重灌胃生理盐水，其余各组按剂量给药，连续8 d，1次/d。末次给药30 min后，分别腹腔注射005%酚红溶液10 mL/kg，注射苯酚红溶液30 min后脱颈椎处死小鼠，剥离气管周围组织，剪下自甲状软骨下至气管分支处的一段气管，放入盛有2 mL生理盐水的试管中，再加4% NaOH01 mL，用酶标仪，波长546 nm测OD值，用酚红做一标准曲线，根据曲线计算各组酚红含量（ug/mL）。

23统计学方法各实验组数据采用“均值±标准差（x[TX-*3/8]±s）”表示，多组多重比较使用One-way ANOVA单因素方差分析，以P<005各组间差异具有统计学意义；两组间比较采用独立样本t检验，以P<005为差异有统计学意义。

24结果

241对琼脂肉芽肿小鼠的影响清热润燥口服液能明显抑制炎性肉芽肿的形成，与生理盐水组比较差异均具有统计学意义，P<005。但抑制率均不如地塞米松组高，以上3个剂量组的清热润燥口服液对肉芽肿形成的抑制与地塞米松组比较均具有统计差异，P<005，结果见表1。

242对小鼠气管酚红排泌的影响清热润燥口服液975和1950 mL/kg两个剂量组和100 g/kg的氨化铵能明显增强气管对酚红的分泌能力，与生理盐水组比较差异具有统计学意义，P<005，但两个剂量组的清热润燥口服液的气管分泌酚红量都不如氯化铵的多；390 mL/kg清热润燥口服液组能增加气管对酚红的分泌量，当与生理盐水组比较，差异不具有统计学意义，P>005，结果见表2。

3讨论

咳嗽是一种常见的呼吸道症状，为机体的保护性反应，有利于清除呼吸道分泌物和有害因子，但长期或过于频繁的咳嗽则会对机体造成一个的损伤。现代研究认为咳嗽反应与呼吸道的炎症和黏蛋白分泌增加直接相关。云南省名老中医陆家龙教授[4]认为由于昆明地区“干燥”的气候特点加之居民喜食辛辣香燥之品，呼吸道疾病发生时咳嗽常常表现“干咳”、“呛咳不爽”、“咳嗽数声而痰不出”、“涩痰”难咯，咳嗽缠绵难愈等，这是以内外燥热夹击，热灼津伤，肺阴亏虚所致。其三十余年的临床经验方（清热润燥方），方中桑叶疏散风热，止咳化痰；芦根清热生津；麥冬、沙参滋阴清热、润肺止咳；苡仁健脾，清热排脓；陈皮行气健脾、化痰止咳；冬瓜子清肺化痰，诸药配伍共奏清热养阴，润燥止咳之功。本研究证明了清热润燥口服液对KM小鼠琼脂肉芽肿有抑制作用及增加气管酚红排泌作用，表明其具有抗炎、祛痰作用。本研究为清热润燥口服液后期临床应用提供有效的实验依据。

参考文献：

[1]黄继汉，黄晓晖，陈志扬，等药理试验中动物间和动物与人体间的等效剂量换算[J].中国临床药理学与治疗学，2004，9（9）：1069-1072

[2]徐淑云药理实验方法学（第三版）[M].北京：人民卫生出版社，2002911-912

[3]陈奇中药药理研究方法学[M].2版，北京：人民卫生出版社2006，624-625

[4]魏丹霞，施兴黔，陆家龙陆家龙导师辨证治疗昆明地区感冒后咳嗽的特色[J].云南中医中药杂志，2010，31（4）：1-3