白羽肉鸡葡萄球菌分离鉴定

刘苗苗

DOI：10.3969/j.issn.2096-3637.2017.10.010

摘要：某肉鸡养殖场，养殖42日龄白羽肉鸡7万只，40多只白羽肉鸡出现了采食减少，关节肿大，腹泻，个别的出现了急性死亡。为了确定引起白羽肉鸡发死亡的病原菌，无菌病死肉鸡的肝脏、心血、关节渗出液等病料组织进行病原菌分离鉴定，得到1株病原菌，被鉴定为葡萄球菌。动物回归试验结果表明，分离到的葡萄球菌具有很强的致病性。药敏试验结果显示，药敏结果显示，白羽肉鸡源葡萄球菌对恩诺沙星、氧氟沙星、头孢曲松、氟苯尼考、头孢克肟、头孢拉啶、大观霉素、林可霉素8种药物高度敏感；对头孢他啶、丁胺卡娜、多西环素、氨苄西林、青霉素、阿莫西林、庆大霉素7种药物耐药。

关键词：白羽肉鸡； 葡萄球菌；药敏试验

中图分类号：S858.23 文献标识码：B 文章编号：2096-3637（2017）10-0014-01

葡萄球菌是人类和动物正常菌群，广泛的存在与空气、饮水、饲料各种物体内，还存在与、人的体表面皮肤、黏膜、呼吸道和肠道中等，是环境中一种条件性致病菌，其中，、葡萄球菌是鸡舍及鸡体内外的常在菌，当外界条件改变时，如饲养过大、通风不良、转群等不良的因素，均导致鸡抵抗力下降时，引发葡萄球菌的发生。鸡致病性葡萄球菌病临床表现为急性败血症、关节炎、渗出性皮炎、皮肤坏死和骨膜炎等症状，以雏鸡最易感，且具有发病率高、死亡性快的特点，一般的成年鸡感染后多呈慢性病程，是危害肉鸡养殖业的主要细菌性疾病之一。是由金黄色葡萄球菌引起鸡的急性败血性或慢性传染性疾病，该病发生无明显的季节性，一年四季均可发病。本实验通过采集无菌病死白羽肉鸡的肝脏、心血、关节渗出液等病料组织进行病原菌分离鉴定，得到1株病原菌，被鉴定为葡萄球菌。动物回归试验结果表明，分离到的葡萄球菌具有很强的致病性。因此，对分离的葡萄球菌进行了药敏试验，分析其耐药性，为白羽肉鸡的葡萄球菌的防治提供指导意义。

1发病情况

2017年5月，某肉鸡养殖场，养殖42日龄白羽肉鸡7万只，40多只白羽肉鸡出现了采食减少，关节肿大，腹泻，个别的出现了急性死亡。

2细菌的分离鉴定

无菌采集病死白羽肉鸡的肝脏、心血、关节渗出液等病料组织接种于7%脱纤兔血培养基上，置37℃恒温箱培养12h，选取7%脱纤兔血培养基单个优势菌落再接种于甘露醇氯化钠琼脂培养上培养后。挑取纯化的培养的分离菌株进行革兰氏染色镜检观察其形态学。结果显示，在7%脱纤兔血培养基长出了光滑边缘整齐的菌落，形成透明的溶血环；在甘露醇氯化钠琼脂培养基上长出了中等大小的桔黄色菌落；在普通培养基上生长出圆形、隆起金黄色菌落；革兰氏染色镜检可见，呈圆形，单个短链和成堆的葡萄串状排列阳性菌。

3细菌生化试验

取纯化培养的分离菌株接种于营养肉汤中，37℃震荡箱培养12h后，调整菌液浓度为2～3个麦氏浊度后，按照说明加入阳性菌鉴定试条中，置37℃培养48h后，观察生化特性结果。结果显示，分离菌分解葡萄糖、半乳糖、甘露糖，且产酸不产气；不分解阿拉伯糖、棉籽糖、菊糖和肌醇、纤维二糖、并水解淀粉；不产生H2S，靛基质试验阴性；VP试验和过氧化氢酶试验阳性；与报道的葡萄球菌生化特性一致。

4动物回归试验

取纯化培养的分离菌株接种于营养肉汤中，37℃震荡箱培养12h后，调整菌液浓度（1×106CFU/mL）。将42日龄健康的白羽肉鸡10只成2组，每组5只，第1组肌肉注射分菌株0.5mL（1×106CFU/mL）；第2组肌肉注射等量的生理盐水。每组实验鸡攻毒12h后，记录每组实验鸡的的发病及死亡情况，观察期为7d，并对于死亡的实验鸡进行病原学鉴定。结果显示，第1组试验鸡攻毒后的24～48h，均出现了发病，死亡率为100%，对死亡的试验鸡剖检后，从肝脏中分离到葡萄球菌。第2组试验雏鸡无明显的症状，证实了葡萄球菌白羽肉鸡具有很强的致病性。

5药敏试验

取纯化培养的分离菌株接种于营养肉汤中，37℃震荡箱培养12h后，调整菌液浓度（1×106CFU/mL）。无菌的条件下均匀涂布在普通培养基上，贴上药敏纸片，置37℃恒温箱培养12h后，测量抑菌圈直径，判断标准按照美国临床检验标准委員会（NCCLS）推荐的标准K-B纸片进行结果判断。药敏结果显示，白羽肉鸡源葡萄球菌对恩诺沙星、氧氟沙星、头孢曲松、氟苯尼考、头孢克肟、头孢拉啶、大观霉素、林可霉素8种药物高度敏感；对头孢他啶、丁胺卡娜、多西环素、氨苄西林、青霉素、阿莫西林、庆大霉素7种药物耐药。

小结

本文通过采集无菌病死白羽肉鸡的肝脏、心血、关节渗出液等病料组织进行病原菌分离鉴定，分离菌株被鉴定为致病性葡萄球菌。药敏结果显示，白羽肉鸡源葡萄球菌对恩诺沙星、氧氟沙星、头孢曲松、氟苯尼考、头孢克肟、头孢拉啶、大观霉素、林可霉素8种药物高度敏感。当白羽肉鸡发生葡萄球菌，应该根据药敏试验，选择敏感药物进行治疗。

参考文献

[1]乔献军. 皮炎型鸡葡萄球菌病的诊断[J]. 今日畜牧兽医，2008，（10）：9-10.

[2]史晓涛，陈立功，翟文栋，等.皮炎型鸡葡萄球菌病的诊断[J]. 养禽与禽病防治，2009，（02）：35-36.