血细胞分析仪的检定方法分析
2017-05-30许裕红
许裕红
DOI:10.19392/j.cnki.16717341.201722210
摘要:作为原血常规主要仪器设备,血细胞分析仪可以提供众多实验指标,对诊断疾病具有重要意义,必须要保证其检定结果的可靠性。
关键词:血细胞分析仪;检定方法;影响因素
血细胞分析仪在各级医院中均得到了广泛应用,是临床疾病诊断与鉴别诊断重要支持,这样就决定了血细胞分析仪检定的重要性。就日常检定工作来看,很多情况下会因为外部因素的干扰,而出现细胞计数不准确的情况,想要解决此类问题,前提是要明确问题发生原因,然后有针对性的采取措施进行优化,提高检定过程的规范性,排除标准物质、人为操作以及仪器试剂等因素带来的影响。
一、血细胞分析仪检定影响因素
(一)仪器检测技术
血细胞分析仪主要分为机械系统、细胞检测系统、电学系统以及计算机控制系统等几部分组成,且以检测系统对最终检定结果准确性影响最大。目前我国所用血细胞分析仪,检测技术多为电阻抗检测与光散射检测,应将其作为主要影响因素进行分析。
1.电阻抗检测
应用电阻抗检测方法,即在待测稀释液内设置一微孔,并在微孔两端添加电压电极,按照一定比例进行稀释处理后,利用负压吸引使其通过仪器微孔小管。与稀释液相比血细胞电导性较低,这样液体细胞颗粒在通过微孔时,电极间电阻将会出现瞬间变化,形成电脉冲信号,只需要完成电脉冲计数便可确定血细胞颗粒数量。其中,颗粒体积大小可以由脉冲幅度表示,通过对不同细胞对应脉冲幅度便可判断细胞种类,最后通过放大、调节阈值、甄别、整形、计数后便可得到检验结果[1]。在整个过程中,虽然操作简单快速,并且成本较低,但是因为设计因素的限制,并不能有效对细胞内部结构进行有效甄别,如果液体内幼稚白细胞数量较多,会很大程度上降低白细胞计数结果准确性。同样核红细胞增多时,对于白细胞分群与计数准确性降低。
2.光散射检测
电阻抗检测技术在实际应用中存在较大缺陷,在血细胞分析仪不断更新背景下,光散射检测实现了对电阻抗检测技术的有效补充,可进一步提高检测结果准确性。检测过程中按照一定比例對待检测血液进行稀释处理,使其形成一个极细的液流穿过激光束,通过激光束照射,每个细胞均会产生光散射,由光电倍增管接收[2]。应用此种方法可以实现对白细胞进行详细分类,包括三分类、五分类以及九分类。并且在进行红细胞计数时,可以结合电阻抗方法对红细胞体积进行三维空间分析,保证计数结果的准确性。同时,结合比色法对血红蛋白计数,可以通过光散射法分析单个红细胞血红蛋白,可有效降低高白细胞等因素对血红蛋白学比色的影响。
(二)仪器试剂影响
所用仪器试剂不同,也会对最终检定结果产生影响,其中常见的仪器试剂包括稀释液、溶血素以及清洗剂等。
1.稀释液
血细胞分析仪计量鉴定,主要是利用稀释液对血液细胞进行稀释处理,避免出现聚集或粘连问题,同时还可以维持血液pH与ρ等理化指标的稳定。不同血细胞分析仪,对稀释液的理化指标要求差异明显,将电阻抗法应用到不同仪器上,设定的脉冲信号阈值存在差异。如果在实际检定中,稀释液理化指标不合格,必定会对检测结果准确性产生影响,包括白细胞分类不细、血小板本底高等。因此需要合理选择检定用稀释液,尤其是对于长时间放置的试剂,要避免因为重力沉降造成溶液不稳定性带来的计数误差较大问题的发生。
2.溶血素
通过应用溶血素来对血细胞进行溶解,便于白细胞的可靠计数,同时作用于白细胞膜,还可以使得白细胞膜穿孔,胞浆流失后进行内核检测。对于溶血素的质量,多通过吸光度、吸收峰波长、pH值以及空白值等指标来衡量试剂质量。如果吸收峰波长、吸光度等不符合要求,将会对比色法测量血红蛋白结果准确性产生影响。如果所用溶血素溶血不完全,无法对红细胞造成有效破坏,会直接将红细胞当做白细胞计数,使得最终白细胞计数增多。
3.清洗剂
主要利用清洗剂进行管道、计数池以及检测小孔周围沉积、污染蛋白的清除,可根据仪器要求在每次检测完成或者关机时使用。市场上清洗剂质量偏差较大,应选择活性酶含量多的清洗剂,可对管道、计数池所沉积蛋白进行可靠去除,但是此种试剂保质期较短,且成本高实用性较低。清洗剂效果往往需要经过一段时间后才能够体现,如果所用清洗剂质量较差,将会造成管道、计数池发硬、变性、变色以及堵塞等,还会改变液体压力,测量结果漂移,影响最终检定结果准确性。在实际应用中,务必要选择质量优良的清洗剂,争取将系统误差控制在最小。
二、血细胞分析仪示值误差检定分析
在对血细胞分析仪示值误差进行检定时,可以从仪器常用测量范围内选择3~5种不同浓度血细胞标准物质,且首次检测必须要选择5种,对其进行均匀混合后,连续测量5次,最后根据测定结果计算得到仪器示值相对误差,△T。选择绝对值最大△T作为仪器红细胞技术浓度、白细胞计数浓度、血红蛋白浓度以及血小板示值误差检定结果。其中,血细胞分析仪示值误差计算公式为:
三、结语
血细胞分析仪为医院血常规检测的重要仪器,为保证其检定结果的准确性,需要基于其技术特点,总结各影响因素,然后通过可靠措施进行调整优化,争取为后续病情诊断以及治疗提供可靠依据。
参考文献:
[1]陈余君,冯瑶.血细胞分析仪计量检定中细胞计数结果的影响因素[J].计量与测试技术,2011,38(11):911.
[2]赵鹏.血细胞分析仪主要技术指标超差的原因及“定期检定”的重要性[J].甘肃科技纵横,2007,(06):200.