羊细管冻精简易制作方法

王旭 冯星 纪军 王华峰 左北瑶

摘要：本文结合工作实践，对在试验条件简陋条件下制作羊的细管冻精进行归纳，形成一个简易的制作羊细管冻精的方法，以期对羊的品种资源保护、高繁殖力种公羊利用等方面发挥积极作用。

关键词：羊；细管冻精；方法

中图分类号：S858.26 文献标识码：B 文章编号：2096-3637（2017）07-0043-01

20世纪50年代，国外开始研究羊的冷冻精液，80年代以后，随着输精方法的改进和输精器械的改良，羊冷冻精液的受胎率有了较大的提高。目前，国外关于羊冷冻精液的研究已有了较大的进展，并在畜牧业较为发达的国家得到广泛应用。国内羊冷冻精液的研究始于20世纪70年代，但在实际应用和推广实践中，由于受诸多因素的影响，受胎率一直不太理想[1]。本文结合基层工作实践和同行做法，形成一个羊细管冻精制作的簡易方法，希望在羊品种资源保护、提高高繁殖力种公羊利用率、推广人工授精技术等方面上发挥积极作用。

1 材料选择

1.1 采精公羊

选择生长发育良好、健康无疾病、性欲较强、品种特征明显的种公羊作为采精公羊。种公羊需提前1个月加强补饲，每只种公羊每天补充精料量为：玉米0.5～1kg，豆粕0.25～0.5kg，胡萝卜0.5～1kg，鸡蛋1～4枚。采精期间增加精料补给量，非采精期间酌情减少，早晚各补饲1次，自由饮水，每天运动不少于2h [2]。

1.2 稀释液和冷冻液配制[3]

基础液：葡萄糖3g+柠檬酸钠3g+双蒸水100ml，充分摇匀溶解。

稀释液：取80ml基础液+20ml卵黄，同时加入青霉素钠和链霉素各10万单位，摇半个小时，使其充分溶解混合。

冷冻液：取88ml稀释液+12ml甘油，摇0.5h，使其充分混合。

2 制作流程

2.1 精液采集

使用假阴道采精法采集精液，所有器械在使用前均要高温消毒或75%酒精消毒。采精时，半蹲在台畜右侧，右手横握假阴道，阀门靠手掌心，前低后高，待公羊爬跨阴茎头露出包皮时，左手托住阴茎包皮，顺势将阴茎导入假阴道，再把假阴道倾斜，使集精杯朝下，待公羊向前猛冲射精时，射出的精液就直接进入集精杯中，而不是沿着内胎再流入集精杯，减少了精液的污染。

2.2 精液稀释和平衡

精液采集后，首先检测精液品密度、活力，只有密度不低于20亿/ml，活力不低于0.7才能制作细管冻精。精液的稀释采用了二次稀释法，根据精液密度可先用稀释液（提前放到37℃水浴锅中加热）稀释1～2倍，然后4℃冰箱中平衡2h。待平衡后，再加入与稀释液等量的冷冻液（4℃），这样就对原精液稀释了2～4倍，然后再在4℃冰箱中平衡2h。

2.3 细管冻精制作

2.3.1封装

在一个不高于5℃的操作环境里进行操作，平衡后的精液从4℃冰箱中拿出后，轻微混合，然后将精液吸入0.25ml細管中，并用封口粉封好。

2.3.2平衡

细管精液封装好后，均匀摆放在细管架上，平衡5min左右。

2.3.3熏蒸

提前准备好的一个大的容器内倒入液氮，待分装好的细管平衡后，迅速将细管架放入容器内，确保细管与液氮面保持0.8～1cm的距离，盖上容器盖子，熏蒸5min左右。

2.3.4冷冻

细管精液在液氮面上熏蒸完后，将细管全部浸入液氮中，放置10～30min左右，便完成了细管冻精制作。

2.4冻精解冻和保存

将制作好的细管冻精随机抽取1～3只，在38～40℃的温水中解冻13～15s，然后再显微镜下观察解冻后的活力，活力检测在0.3以上便可收集保存，否则弃去不用。将制作好的细管冻精装入冻精袋，标注公羊的品种、冻精数量，精液活力以及生产日期等信息后便可装入液氮罐长期保存。

3 小结

在条件简易的情况下，如果制作细管冻精的环境温度较高，可以准备一个大的泡沫箱，在里面放上冰块，制造一个低温的小环境，便可以完成细管封装。

封装细管时，如果没有专用的设备，可以采取以下简易做法：将细管海绵端对齐，放入口中，另一端放入精液中，先吸少量精液，然后再吸入一小段空气，最后将细管吸满，用封口粉封住即可。

细管架放入液氮容器时一定要放平，同时确保液氮面与细管的距离适当，如果液氮面与细管太近，细管内的精液会立即冷冻，距离太远，冷冻的速度变慢，都会对结果造成影响。

参考文献

[1]周芬娜，贺晓珺，智利红等.羊冷冻精液人工授精技术研究进展[J].兽医导刊，2015（14）：66.

[2]纪军，王旭，艾尔肯江等. 巴音布鲁克种公羊驯化采精探析[J].安徽农业科学，2003，41（7）：2971-2972.

[3]郭志明，马涛. 绵羊冻精的生产及其影响因素[J].青海畜牧兽医杂志， 2003，33（3）：46.