梅州灵芝常用二级种制作方法比较试验

李 忠 曾振基 古培总

（广东省梅州市微生物研究所，广东梅州514071）

20世纪90年代中期，梅州开始试验、示范推广室内袋料栽培灵芝技术，至今梅州及其周边县区形成了年栽培菌包近400万包、年产灵芝孢子粉30余吨、子实体近80 t的产业规模，成为广东省袋料栽培赤灵芝最多的地区。

灵芝菌种是灵芝产业发展的基础和前提，灵芝二级种制作是灵芝栽培前期的重要工作，对灵芝高产和优质起关键作用。笔者通过调查、试验和经验总结，对广东省梅州市赤灵芝栽培中常用的二级种制作方法、二级种菌丝生长情况、成本、优缺点等进行比较，以期为梅州及其周边地区的灵芝栽培户缩短生产周期、降低生产成本和提高经济效益提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试菌株梅州本地灵芝种：由梅州市微生物研究所灵芝栽培基地分离培养，选一株菌丝浓白、健壮、无污染的作为试验菌株。

母种培养基配方：马铃薯汁20%，葡萄糖2%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.05%，琼脂2%，加水至1000 mL；并以此培养基配方作为CK配方，进行对比观察。

1.2 梅州常用二级种（原种）培养基配方配方1：玉米粒99%，石膏1%（简称玉米配方）；配方2：麦粒98%，石膏2%（简称麦粒配方）；配方3：木屑74%，麸皮14%，玉米粉10%，石膏1.5%，糖0.5%（简称木屑配方）。

1.3 常用二级种的制作

1.3.1 装瓶灭菌 玉米粒（麦粒）配方制作方法[1-2]：玉米粒（麦粒）除杂、除坏，1%石灰水浸泡12 h后反复漂洗3～4次，清水再浸泡24 h，捞起后沸水煮20～30 min，颗粒无白心时即可捞起，晾干至表面无水，加入石膏混合拌匀，装入750 mL透明广口菌种瓶，装至瓶高的2/3，每瓶折合干料150 g，封口待灭菌。

木屑配方制作方法[3～4]。按料∶水=1∶1.5加水与木屑拌好闷堆3～4 h后，再与辅料拌匀分装到750 mL透明广口菌种瓶中，装至瓶高的2/3，每瓶折合干料130 g，封口待灭菌。

以上三种二级种培养料灭菌方法相同，121℃高压灭菌1.5～2 h；常压灭菌温度达到100℃灭菌10～12 h，冷却室自然冷却后备用。

1.3.2 接种 均采用常规方法接种。待原种瓶的瓶内温度下降到28℃时，利用无菌操作台或无菌室及时接种。接种前，做好接种针等相关接种器材的灭菌、接种（室）环境的消毒和灵芝母种的挑选；接种时，一般采取两人协作进行，即一人解袋、封口，另一人接种，动作要快，以防污染；接种后，做好相关详尽接种记录，做到有质量问题可追溯备查。

试验在超净工作台内定量接入平板尖端菌丝，每个配方各接10瓶，重复3次，25℃恒温培养。

1.4 观察测定方法培养过程中，观察并记录菌丝定植能力、菌丝生长的整齐度、菌丝长势和颜色等；待菌丝全部长到瓶肩部时开始沿菌丝生长边缘划线，测量并计算菌丝生长速度、记录满瓶时间等，最后对数据进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 供试二级种培养料中灵芝菌丝的生长情况观察发现，灵芝菌种在三种二级种培养料中的定植能力都很强，菌丝生长整齐度都还是比较好的。从表1中可以看出，灵芝菌丝生长速度，依次为玉米配方＞麦粒配方＞木屑配方＞CK配方，除菌丝生长速度与CK配方差异十分显著之外，其他三者之间的差异不显著。菌丝生长速度的不同导致满瓶天数也不同，但总体上三个配方的菌丝长势好、生长速度快，菌丝浓密雪白。

2.2 成本计算食用菌生产在控制污染率的情况下，降低成本、提高经济效益也是食用菌生产者考量的重要因素。生产一万袋灵芝菌包，比较应用三种不同配方所需成本见表2。

由表2可以看出，在灵芝生产中三种料灵芝二级种生产成本（包括人工、水电和原材料成本等）略不同，生产万袋三级种所需二级种数量和总成本也有一定的差异，但人工成本是一样的，且占总成本的大部分。因此，很多灵芝生产栽培户不太考虑原材料成本，主要还是要考虑人工成本，以方便快捷、省时省工来安排灵芝二级种生产。

表1 灵芝菌株在供试二级种培养料中的生长情况

表2 灵芝二级种不同配方的成本计算

表3 三种配方制作灵芝二级种的优缺点分析

3 小结与讨论

通过制作方法、菌丝生长情况和成本核算等综合分析对比，可以看出三种灵芝二级种配方各有优缺点（表3）。

从目前来看，梅州及其周边地区在灵芝生产过程中，玉米配方和麦粒配方因其营养丰富、菌丝生长健壮、转接率高、发菌快、接种简便等优点，普遍被灵芝生产大户所采用。但菌种气生菌丝较多、菌丝易老化，不耐存放，且制作方法较繁琐，需要一定的经验和技术。而木屑配方因其取材容易、制作简便、成本低、相对耐存放等优势，也被不少灵芝生产户所喜欢，但生产周期较长，转接工作量较大，不利于大规模生产。笔者需要指出的是，以棉子壳为主的培养基配方也是灵芝二级种制备的上好选择，但梅州地区作为非产棉区，来源靠外运且不稳定，成本较高，当地菇农基本上不采用此配方，故本试验中未作为常用二级种配方。

以上仅是参考广东梅州室内赤灵芝栽培常用二级种配方所作比较，不同地区可能略有差异，菇农可根据本地区实际情况选择最适宜的二级种配方开展赤灵芝生产。