气相色谱法同时测定油脂食品中抗氧化剂BHA、BHT、TBHQ的含量

张凤妹++朱炳祺++金绍强++胡帆

摘要：利用乙腈直接提取油脂中的丁基羟基茴香醚（BHA）、二叔丁基羟基甲苯（BHT）和特丁基对苯二酚（TBHQ），利用气相色谱法进行分析测定。结果表明，3种抗氧化剂加标回收率为86.9%～104.8%，BHA和BHT的最低检出限均为2 mg/kg，TBHQ的最低检出限为5 mg/kg，相对标准偏差为2.5%～3.2%，线性范围为1～200 μg/mL，线性相关系数均大于0.999。该方法简便、快速、稳定、可靠，适用于油脂及含油脂食品中BHA、BHT和TBHQ的快速定量检测。

关键词：气相色谱法；BHA；BHT；TBHQ；油脂食品

中图分类号：O657.7；TS227 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）08-1545-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.08.035

Simultaneous Determination of BHA，BHT and TBHQ

in Oil Foods by Gas Chromatography

ZHANG Feng-mei， ZHU Bing-qi， JIN Shao-qiang， HU Fan

（Zhejiang Institute for Food and Drug Control， Hangzhou 315100，China）

Abstract： In this study，three antioxidants butylhydroxy anisd（BHA）， butylated hydroxytoluene（BHT）， and tertiary butylhydroquinone（TBHQ） were extracted by acetonitrile from oils directly and analyzed by gas chromatography. The recoveries of three antioxidants ranged from 86.9% to 104.8%. The results showed that the detection limits of BHA，BHT and TBHQ were 2， 2 and 5 mg/kg，respectively. The relative standard deviations were from 2.5% to 3.2%. The linear ranges were from 1 to 200 μg/mL，with their correlation coefficients were higher than 0.999. This method was simple， rapid and stable. It can be used for the fast determination of BHA，BHT and TBHQ in oil foods.

Key words： gas chromatography； BHA； BHT； TBHQ； oil food

食用油脂和含有油脂的食品在不适当的保存条件下或者超过一定的保质期就会发生酸败现象，而加入抗氧化剂延缓油脂的氧化，能够提高食品的稳定性。其工作原理是与油脂在氧化过程中产生的过氧化物结合，中断氧化过程，达到抗氧化、防酸败的目的[1]。目前最常用的抗氧化劑是丁基羟基茴香醚（BHA）、二叔丁基羟基甲苯（BHT）和特丁基对苯二酚（TBHQ），但过量添加均对人体健康有害，如BHA有潜在的致癌性，BHT可能会抑制人体呼吸酶活性，因此研究测定食品中BHA、BHT和TBHQ含量是非常有必要的[2]。

近年来，BHA、BHT和TBHQ常用的分析方法主要有薄层色谱法、紫外分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱法等[3-10]。2009年中国颁布的可同时测定食品中BHA、BHT和TBHQ 3种抗氧化剂的国家标准GB/T 23373-2009《食品中抗氧化剂丁基羟基茴香醚（BHA）、二丁基羟基甲苯（BHT）与特丁基对苯二酚（TBHQ）的测定》。但该方法前处理复杂，净化过程繁琐，使用的凝胶色谱柱花费高。本研究采用正己烷脱脂，乙腈直接提取油脂中的BHA、BHT和TBHQ，其检测时间短、操作方便、回收率高，适用于油脂及含油脂食品中BHA、BHT和TBHQ的快速定量检测。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

BHA、BHT、TBHQ标准品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；乙腈（分析纯），乙醇（分析纯），正己烷（分析纯），石油醚（分析纯，沸程30～60 ℃），乙酸乙酯环己烷（色谱纯，Merck）。

Agilent7890型气相色谱仪（配FID检测器）、色谱柱HP-5石英毛细管柱（30 m×0.320 mm×0.25 μm）、涡旋混合器、旋转蒸发仪（IKEA）。

1.2 方法

1.2.1 样品处理 根据样品中油脂的实际含量，称取20～30 g粉碎并混合均匀的薯类样品，置于250 mL具塞锥形瓶中，加入适量石油醚，使样品完全浸没，放置过夜，用快速滤纸过滤后，减压回收溶剂，得到油脂试样备用。准确称取备用油脂试样0.5 g，加入正己烷20 mL，将溶液转移至150 mL分液漏斗中，用20 mL含0.1%抗坏血酸乙腈提取3次，合并乙腈层提取液于收集下层乙腈于圆底烧瓶中。旋转蒸发仪浓缩至干，精确加入5 mL乙酸乙酯∶环己烷（1∶1）溶解，经0.45 μm滤膜过滤进行气相色谱分析。

1.2.2 标准曲线制备 BHA、BHT、TBHQ混合标准贮备液的配制。称取BHA、BHT和TBHQ标准品各0.05 g（精确至0.1 mg），用乙酸乙酯∶环己烷（1∶1）溶解定容至50 mL，溶液每毫升相当于1 mg BHA、BHT和TBHQ，摇匀，备用。

混合标准工作溶液配制。精确量取混合标准贮备液，用乙酸乙酯∶环己烷（1∶1）稀释成1、2、5、10、25、50、100、200 μg/mL的混合标准工作溶液。

1.2.3 色谱条件 色谱柱初始温度为150 ℃，保持2 min，以3 ℃/min升至180 ℃，保持5 min，再以35 ℃/min升至240 ℃，保持5 min；载气为高纯氮，纯度≥99.999%；恒流1.0 mL/min；进样口温度260 ℃；检测器温度300 ℃；进样量1.0 μL；分流比10∶1；空气流速400 mL/min；氢气流速40 mL/min。

1.2.4 计算公式 X=■。式中，X—样品中BHA、BHT、TBHQ的含量，g/kg；C—由标准曲线计算出试样测定液中BHA、BHT、TBHQ的浓度，mg/mL；V—定容体积，mL；m—样品质量，g；N—稀释倍数。

2 结果与分析

2.1 提取溶剂的选择

分别采用无水乙醇、乙腈作为提取溶剂，大部分油脂溶于乙醇中，萃取效果不理想。而在提取前用正己烷溶解油脂，再用乙腈直接提取抗氧化剂，提取效果好，回收率高。

2.2 色谱条件的选择

采用HP-5毛细管柱，经过程序升温，各组分保留时间适中，峰形良好，并能达到很好的分离基线，标准色谱见图1。

2.3 线性关系和检出限

对标准系列溶液进行测定，以峰面积为纵坐标，抗氧化剂质量浓度为横坐标绘制标准曲线，计算相关系数和回归方程，以基线噪声3倍峰面积对应的BHA、BHT、TBHQ的含量为最低检出限，结果如表1所示。

2.4 精密度和准确度

在已知不添加抗氧化剂的薯类样品中加入混合标准工作溶液，进行精密度试验，测定精密度符合要求，结果见表2。在已知不添加抗氧化剂的薯类样品中加入高、中、低浓度的混合标准工作溶液进行加标回收测定，计算加标回收率，结果表明，BHA回收率为86.9%～104.8%，BHT回收率为86.9%～87.0%，TBHQ回收率为89.6%～98.6%，结果见表3。

2.5 与国标方法测定TBHQ含量的比较

在已知不添加抗氧化剂的薯类中加入不等量的标准溶液，按照GB/T 21927-2008方法进行测定。结果（表4）表明，试验方法测定TBHQ回收率符合要求，可以准确测定TBHQ含量。

3 结论

采用正己烷脱脂，乙腈直接提取油脂中的BHA、BHT和TBHQ，利用气相色谱法进行分析测定。3种抗氧化剂加标回收率为86.9%～104.8%，BHA和BHT的最低检出限均为2 mg/kg，TBHQ的最低检出限为5 mg/kg，精密度试验相对标准偏差为2.5%～3.2%。抗氧化剂在质量浓度1～200 μg/mL范围内线性良好，线性相关系数均大于0.999。该方法较GB/T 23373-2009和GB/T 21927-2008具有樣品前处理步骤简单、准确度高等优点，而且可以同时测定3种抗氧化剂，适用于油脂及含油脂食品中BHA、BHT和TBHQ的快速定量检测。

参考文献：

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