高效价冷凝集素所致血型鉴定困难200例报告分析

冯冬霞+陈敬霞

【摘要】 目的 本文主要针对高效价冷凝集素所致血型鉴定困难进行深入的分析， 为临床提供参考。方法 对200例含高效价冷凝集素患者的临床资料进行分析， 同时进行抗人球蛋白试验、冷凝集素效价测定以及红细胞ABO血型鉴定等血型血清学检测， 探讨血型鉴定困难的原因。结果 当冷凝集素的效价在<1∶2～1∶32， 不会出现假凝集现象。当冷凝集素的效价>1∶64， 冷凝集素就会感染血型的鉴别测定。若对高效价的冷凝集素效的血液进行血型的确定， 就容易导致血型判断出错。如果对高效价冷凝集素血液采取反向定型时， 易将A、B、AB血型错误鉴定为O型。结论 由于患者体内冷凝集素的效价在增高时， 会对ABO血型鉴定的结果造成一定的影响， 所以临床对于疑难血型的鉴定标本， 应尽量选择科学的鉴别试验方法进行排除， 最终正确鉴定ABO血型。

【关键词】 高效价冷凝集素；血型鉴定困难；血清学检查；抗人球蛋白试验；ABO血型鉴定

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.09.028

普通人的血清中都含有低滴度的冷凝集素， 一些肿瘤、EB病毒感染或者支原体等都会将滴度上高， 因此当血清检出高效价的冷凝集素， 会给患者的血型的鉴别的测定带来一定的不利影响， 偏差较大的会出现血型鉴别错误的情况[1]。本次研究主要选取200例含高效价冷凝集素患者为对象展开研究， 对其进行血型的鉴别和测定， 现将研究内容和结果报道如下。

1 临床资料

本院2012年5月～2015年5月期间共收治了235例含高效价冷凝集素患者， 从中选取200例作为研究对象， 其中， 男100例， 女100例， 年龄50～86岁， 平均年龄（76.32±5.21）岁。查体结果：全身皮肤没有出血点， 肝脾没有触及， 胸骨没有压痛感， 窦性心律不齐， 心率78次/min左右， 浅表淋巴结没有肿大迹象， 中度的贫血貌。实验室检查结果：网织红细胞计数（RET）：2.0%；血小板计数（PLT）：282×109/L；红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）：412 g/L；红细胞平均血红蛋白量（MCH）：32.2 pg；紅细胞平均体积（MCV）：78.1 fl；红细胞压积（HCT）：18.6%；血红蛋白（Hb）：77 g/L；白细胞（RBC）：2.38×1012/L；

红细胞（WBC）：9.6×109/L。所有患者进行骨髓穿刺检查结果表现为增生性贫血， 且贫血程度严重， 需进行输血治疗， 但是由于患者血样在常规室温下容易出现凝集的情况， 所以怀疑患者的血型是疑难血型， 需要将血样送检， 对血型进行重新鉴定[2]。

2 方法及结果

2. 1 RhD、ABO血型鉴定

2. 1. 1 微柱凝胶卡法 反向定型：BC管和AC管要分别加入已知B型和A型的微升的0.5%RBC悬液；正向定型：对照管和抗D、抗B和抗A各加入50 μl患者0.5%RBC悬液。使用专门的离心机进行5 min的离心， 后取出， 通过肉眼判定结果。

2. 1. 2 盐水试管法 抽取每例患者5 ml的静脉血， 经过离心分离处理得当血清样品， 用生理盐水对患者血清样品的红细胞进行洗涤， 并重复3次， 制成0.5%RBC悬液。反向定型：用3支试管， 标出OC管、BC管、AC管， 每个试管中分别加入患者的血清2滴， 再依次加入血型分型试剂RBC 1滴， 以3000 rpm的速度进行15 s的离心， 观察结果。正向定型：用3支试管， 分别标出抗D、抗B和抗A。分别加入患者0.5%RBC悬液1滴， 再依次加入抗D、抗B和抗血型分型试剂2滴， 3000 rpm的速度进行15 s的离心， 观察结果[3]。结果表明正向定型和反向定型的结果不一致， 见表1。后来经过37℃水浴处理5 min后， 正向定型和反向定型都确定为A型， 且RhD为阳性。

2. 2 血清冷凝集素效价测定方法 取患者的静脉血5 ml， 在常规条件下进行离心分离， 然后从中移取血清0.5 ml， 采用生理盐水对其进行稀释一倍。每管加等体积经洗涤的正常人O型2%RBC悬液， 摇匀之后， 样品放在4℃的冰箱中保存， 12 h后观察现象， 以出现“+”凝集者为冷凝集素效价的终点。4℃时， 患者的血清凝集效价是1∶16395， 放入37℃的水浴30 min， 样品凝集现象减退。

2. 3 抗人球蛋白试验 取5 ml患者静脉血样品， 离心分离得到血清， 用生理盐水对患者的红细胞进行三次洗涤之后， 制成0.5%RBC悬液。在微柱凝胶卡待测孔中加入50 μl 0.5%RBC悬液， 确定为阴性对照组。立即采用离心机离心5 min后视觉观察效果， 结果表明对照组和测定组样品均呈阴性。

2. 4 冷凝集素对ABO血型鉴定的影响 当冷凝集素的效价在<1∶2～1∶32， 不会出现假凝集现象。当冷凝集素的效价>1∶64， 冷凝集素就会感染血型的鉴别测定。若对高效价的冷凝集素效的血液进行血型的确定， 就容易导致血型判断出错。如果对高效价冷凝集素血液采取反向定型时， 易将A、B、AB血型错误鉴定为O型。

3 讨论

冷凝集素广泛存在于人体血清中， 其正常值为1∶8～1∶16范围之间， 但是当人体的冷凝集素效价偏高， 易发生血型鉴定误判的情况， 给血型的鉴定带来一定的困难[4-6]。研究表明在冬季遇到血型鉴定结果出现错误时， 其最主要原因是有高效价的冷凝集素的存在而干扰测定[7， 8]。因此在进行血型鉴定的研究实， 临床上需要注意以下方面：①测定时要有适宜的环境和温度， 温度尽可能保持在37℃， 消除冷凝集素对血型鉴定试验的干扰[9-11]；②目前在进行血型鉴定时， 少数条件较差的医院只能进行正向定型， 来对ABO血型进行鉴定， 建议在进行正向定型的同时， 还要进行反向定型， 进行正反向的相互印证， 才能做出最终的判断；③对于红细胞经生理盐水洗涤后的正、反向定型过程中出现结果偏差的现象时， 应将样品置于37℃水浴锅中加热5 min后再次观察样品现象。据相关报道表明， 冷凝集素的凝集能力和效价会随着温度的变化而发生变化， 37℃条件下冷凝集素在低效价时， 其凝集活性会降低甚至消失， 不会感染血型的测定和定型[12， 13]。

此外， 由于临床实际操作过程中， 会遇到很多突发情况， 患者由于受到一些外伤导致失血过多， 急需要输血， 但是输血科又无法在第一时间内进行吸收冷凝集素实验， 所以在平时实践过程中知识经验的积累非常重要[14]。如果遇到试管法或者玻片法正向定型和反向定型结果不符时， 实验者要进行全面的考虑， 排除不规则天然抗体影响和自己操作失误以后， 要和临床进行沟通， 询问患者的病史和临床用药情况， 并及时重新进行抽血复查， 确定是否存在冷凝集素的影响[15， 16]。确定有冷凝集素影响之后， 输血科要和临床做好沟通， 确保患者在输血过程中有专人陪护， 同时注意患者的保暖， 不要让患者受凉， 并将输注的悬液进行37℃的预温处理， 进行缓慢滴注， 确保临床输血安全。经过上述一系列措施之后， 患者的病情得到了有效的控制， 不仅挽救了患者的生命， 也有效避免了医患纠纷的发生。

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[收稿日期：2016-12-27]