不同药剂处理对南方根结线虫胚胎发育的影响及田间防效

丁晓帆　黄小筛　唐琦　周珊虹　兀旭辉

摘要：采用室内浸渍法研究不同药剂处理对南方根结线虫胚胎发育的影响，并在田问测定了3种药剂与有机肥配施对根结线虫的防治效果。结果表明：供试药剂均对线虫卵胚胎发育起抑制作用，多数胚胎停在原肠期和1龄幼期阶段，其中9.00 mg/L 1.8%阿维菌素乳油，16.00、32.00 mg/L 3.2%甲维盐·氯氰微乳剂的死亡卵比例分别高达48.49%、49.97%、54.23%，均显著高于灭菌水对照；不同药剂与有机肥配施对白菜根围土壤中的侵染性根结线虫幼虫均有较好的防控效果，药后18 d，10.5%阿维·噻唑磷颗粒剂速效性最好，线虫减退率为46.76%，防效达49.36%；药后35 d，3.2%甲维盐·氯氰微乳剂持效性最好，线虫减退率为85.42%，防效达90.36%。

关键词：药剂；根结线虫；胚胎发育；防治效果

中图分类号：S433.89 文献标志码：A 文章编号：1002—1302（2016）01—0146—02

海南岛地处热带，可为发展反季节农业提供良好的环境与气候条件，因此反季节蔬菜已经成为海南省热带高效农业的支柱产业。根结线虫（Meloidogyne spp.）是一类植物土传病原物，据调查，海南岛大部分地区瓜菜根结线虫病株发病率在50%以上，以南方根结线虫（M.incognita）为优势种群。大棚蔬菜由于其特殊的栽培环境，蔬菜生长周期短，土地复种指数高，根结线虫主要以卵、卵囊和幼虫在土壤中持续危害，线虫无明显越冬越夏现象，虫口密度大，最终造成严重的经济损失。基于蔬菜对农药残留的特殊要求，适用于线虫防治的药剂较少，目前登记用于蔬菜根结线虫病防治的药剂仅十几种，国家明令禁止高毒农药用于蔬菜线虫病防治。为了筛选高效、低毒、低残留且对蔬菜安全的杀线虫剂和施用方法，笔者以南方根结线虫为靶标，测定不同药剂处理对线虫卵胚胎发育的抑制效果，并通过田间试验比较了不同药剂与有机肥配施对根结线虫的防治效果。

1材料与方法

1.1供试材料

1.1.1供试农药及肥料 主要农药有：（1）1.8%阿维菌素乳油，江苏丰源生物工程有限公司产品；（2）3.2%甲维盐·氯氰微乳剂（甲氨基阿维菌素苯甲酸盐含量0.2%、氯氰菊酯含量3%），上海沪联生物药业（夏邑）股份有限公司产品；（3）10.5%阿维·噻唑磷颗粒剂（阿维菌素含量0.5%、噻唑磷含量10%），北京燕化永乐农药有限公司产品。供试肥料：双春牌有机肥料粉剂[总养分含量（N+P₂O₅+K₂O）≥5%，有机质含量≥45%]，澄迈恒富肥业科技有限公司产品。

1.1.2试验材料 试验材料为南方根结线虫，由海南大学环境与植物保护学院线虫实验室采用番茄苗培养扩繁获得。供试植物为大白菜（Brassica campestris）（早皇京白皮球大白菜），由汕头市金韩种业有限公司提供。

1.2试验方法

1.2.1不同药剂处理对南方根结线虫胚胎发育的影响 将番茄根结线虫病根洗净后挑取卵囊，用0.5%次氯酸钠溶液振荡消毒15 min，过325、500目筛，用灭菌水冲洗直至没有次氯酸钠气味。回收500目筛上的卵悬液，用移液器吸取10粒单胞卵到单凹玻片上，分别加入不同稀释浓度的药剂各100μL，其中1.8%阿维菌素乳油为9.00（2000倍液）、6.00 mg/L（3000倍液），3.2%甲维盐·氯氰微乳剂为32.00（1 000倍液）、16.00（2000倍液）、10.67 mg/L（3 000倍液）。每个处理设6次重复，以灭菌水作为空白对照（cKn），将单凹玻片置于保湿的培养皿中，于25℃培养；48 h后将药液除去，置换成灭菌水后继续保湿培养；6 d后于解剖镜下观察记录胚胎各个发育阶段的卵数，并按Duncans新复极差法测验各处理的差异显著性。

1.2.2不同药剂与有机肥配施防治大白菜根结线虫病的田间小区试验 （1）试验地点：试验地点设在海南省现代农业展示示范园区，立柱蔬菜大棚，试验田平坦，根结线虫病普遍发生。（2）试验方法。本试验共设5个处理，4次重复，共20个小区，随机区组排列，小区面积10m²（1.2 m×8.0 m），小区间以排水沟作为隔离保护行。有机肥作基肥的处理在整地时撒入拌匀，使用量0.6 kg/m²。施药后2 d撒播大白菜种子，除受控因子外，田间管理按当地习惯进行，各小区其他管理一致。具体处理如下：T1处理：有机肥作基肥，耙平后用10 mL 1.8%阿维菌素乳油稀释2 000倍（9 mg/L）均匀浇洒土壤；T₂：有机肥作基肥，耙平后用10 mL 3.2%甲维盐·氯氰微乳剂稀释2 000倍（16 mg/L）均匀浇洒土壤；T₃：有机肥作基肥，用10 g 10.5%阿维·噻唑磷颗粒剂拌毒土，与有机肥一起在整地时撒入拌匀；T4：6 kg有机肥作基肥，整地时撒入拌均匀；CK：整地时拌入6 kg细沙并浇水作为空白对照。（3）调查方法：分别在药前、药后18 d、药后35 d采用5点取样法取大白菜根围（0～20cm深）土样，每个小区土样充分混匀后量取200 mL采用浅盘法分离线虫，在体视解剖镜下统计侵染性线虫数量，并用以下公式计算线虫减退率和防治效果。

式中：CK為空白对照区线虫减退率，%；PT为药剂处理区线虫减退率，%。

2结果与分析

2.1不同药剂处理对南方根结线虫胚胎发育的影响

图1中Ⅰ至Ⅴ为南方根结线虫胚胎正常发育各个阶段的卵，Ⅵ、Ⅶ为停止发育的死亡卵，可以看出正常发育的卵内含物清晰可辨，而死亡卵内含物模糊，细胞处于离析降解状态。结合图1、表1分析可知，随着药剂浓度的增高，死亡卵的比例呈正相关增加，9.00 mg/L 1.8%阿维菌素乳油，16.00、32.00 mg/L 3.2%甲维盐·氯氰微乳剂处理组的死亡卵比例分别高达48.49%、49.97%、54.23%，差异不显著，但与灭菌水对照相比均差异显著；各处理组卵胚胎发育多数停止在原肠期、1龄幼期阶段，正常孵化的2龄幼虫比例均为0，而灭菌水对照中2龄幼虫期所占比例高达59.60%，且在6 d后镜检时原肠期前卵态已极少，仅见1.85%的多胞期卵。

2.2不同药剂对大白菜根结线虫病的防治效果

表2结果表明：不同药剂与有机肥配施对大白菜根围土壤中的侵染性根结线虫幼虫均有较好的防控效果。药后18 d，阿维·噻唑磷处理组线虫减退率为46.76%，防效较其他2个药剂稍高，达49.36%，说明阿维·噻唑磷的速效性较阿维菌素和甲维盐·氯氰好；药后35 d，空白对照组线虫数增多，达2 471.25条/L，而3个药剂处理组线虫数明显下降，线虫减退率均超过70%，甲维盐·氯氰防效最高，达90.36%，说明3个药剂中甲维盐·氯氰的持效性最好；同时，有机肥处理组对线虫影响不大，药后18、35 d线虫减退率分别仅为9.28%、6.21%。

3结论与讨论

卵胚胎发育试验结果表明，随着不同药剂处理浓度的增高，根结线虫停止发育的死亡卵比例呈正相关增加，尽管发育到原肠期或1龄幼期的卵也不能正常孵化成2龄幼虫，处理浓度为9.00 mg/L的阿维菌素乳油与16.00、32.00 mg/L的甲维盐·氯氰微乳剂对卵的致死率差异不显著，即阿维菌素较低浓度的作用效果仍与较高浓度的甲维盐·氯氰微乳剂相当，说明根结线虫卵的胚胎发育对阿维菌素的敏感性较高。漆永红等研究表明，10%噻唑磷、3%阿维菌素单剂分别对根结线虫卵囊、卵表现出极强的抑制作用。田间药效试验结果表明，药后18、35 d，药剂对线虫的减退率均超过40%、70%，防效均超过40%、80%，说明药剂对侵染性线虫有直接的致死作用，同时影响线虫卵、卵囊的发育与孵化，直接干扰线虫的有效侵染。本研究中，有机肥的施用不仅起到增产作用，而且对植物寄生线虫种群数量表现出一定的抑制作用，说明有机肥能有效调控土壤环境、抑制侵染性线虫的种群数量，但其在土壤中施用对线虫病害的防控机制仍需进一步研究。

综合以上试验结果，生产中建议药剂与有机肥配施，以提高土壤肥力、增强植株的抗病虫能力，并注意药剂轮换使用，防止病原线虫产生抗药性。对于叶菜类作物生长周期比较短的蔬菜可在播种或定植前施用1次药剂即可；生长周期较长的茄科、豆科植物建议在药后35 d以后，根据作物生理特点追施1～2次药剂。