肺癌组织HMGN5基因表达水平及与临床病理特征的相关性分析

谭真+王善宗+葛运贞

【摘要】 目的：探讨肺癌组织中HMGN5基因的表达水平及与临床病理特征的相关性，为肺癌的诊断和治疗提供依据。方法：采用RT-PCR法检测HMGN5基因在观察组45例肺癌组织及对照组35例癌旁正常组织中的表达，分析HMGN5基因的表达水平与肺癌组织临床病理特征相关性。结果：观察组肺癌患者HMGN5基因转录mRNA水平明显高于对照组的癌旁正常组织，比较差异有统计学意义（P<0.05）。肺癌组织中HMGN5基因与性别、年龄以及肺癌的病理类型无显著相关性（P>0.05）；与患者的病理分级和分期以及是否有淋巴结转移有着显著的相关性（P<0.05）。结论：肺癌组织中HMGN5基因的表达水平与临床病理特征显著相关，并与病理分级、淋巴结转移以及临床分期呈显著有关，这可能提示HMGN5基因的表达水平与肺癌的发生、发展有着密切的关系。

【关键词】 肺癌； HMGN5基因； 临床病理特征； 相关性

Expression of HMGN5 Gene in Lung Cancer and Its Correlation with Clinicopathological Features/TAN Zhen，WANG Shan-zong，GE Yun-zhen.//Medical Innovation of China，2017，14（10）：122-125

【Abstract】 Objective：To explore the expression of HMGN5 gene in lung cancer and its correlation with clinicopathological features，and to provide the basis for the diagnosis and treatment of lung cancer.Method：RT-PCR

was used to detect the expression of HMGN5 gene in observation group of 45 cases with lung cancer tissues and control group of 35 cases with corresponding non-tumor normal lung tissue.The correlation between HMGN5 gene expression and clinicopathological features of lung cancer were analyzed.Result：The expression of HMGN5 mRNA in observation group was significantly higher than that in the control group，the difference was statistically significant（P<0.05）.HMGN5 gene in observation group of gender，age and pathological types had no significant correlation（P>0.05）；pathological grading，clinical staging，and whether there was lymph node metastasis were significantly correlated（P<0.05）.Conclusion：The expression level of HMGN5 gene in lung cancer is significantly correlated with clinicopathological features of pathological grading，lymph node metastasis and clinical stage.This may suggest that the expression level of HMGN5 gene has a close relationship with the occurrence and development of lung cancer.

【Key words】 Lung cancer； HMGN5 gene； Clinicopathological features； Relevance

First-authors address：Linyi in Shandong Province Economic and Technological Development Zone Peoples Hospital，Linyi 276023，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.10.034

隨着全球环境改变及雾霾天气的加剧，肺癌的发病率呈现逐年上升趋势。现有数据表明，传统化疗、放疗和手术等手段对肺癌的疗效都较为有限[1]。但早期诊断和治疗，在某种程度上可延长患者长期生存率，故如何早期发现及诊断是医学研究的重点所在[2]。研究证实，核小体结合蛋白-1（HMGN5）在胞质内定位和含量高低与细胞增殖周期有着显著的相关性[3-5]，而肺癌患者已被证实其恶性增殖细胞周期调控机制明显异常，故通过检测肺癌组织中HMGN5基因的表达水平可能对肺癌的诊断有着一定的作用。本组研究通过肺癌组织及癌旁组织中HMGN5基因的表达与临床病例特征相关性进行研究，为肺癌早期诊断及治疗提供相关依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取本院2014年12月-2016年6月经病理证实的肺癌标本45例（术前均未接受放、化疗）为观察组，男32例，女13例；年龄48～76岁，平均（63.2±4.9）岁；病理分型：鳞癌26例，小细胞肺癌12例，腺癌7例；解剖分型：中央型肺癌24例，周围型肺癌21例，其中32例有淋巴结转移；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期21例，Ⅲ～Ⅳ期24例。同时选取肺癌癌旁正常组织35例为对照组，男23例，女12例；年龄47～75岁，平均（63.4±4.8）岁；病理分型：鳞癌19例，小细胞肺癌11例，腺癌5例；解剖分型：中央型肺癌19例，周围型肺癌16例，其中28例有淋巴结转移；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期13例，Ⅲ～Ⅳ期12例。两组患者TMN分期及病理分型等资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 总RNA的提取 观察组患者术后切除大小为0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm肿瘤组织，放入冻存管中进行液氮保存。对照组患者切除同样大小的癌旁正常组织块进行对照，同样方法保存。将肿瘤组织和正常组织各100 mg研磨至匀浆离心后弃去上清液，提取总RNA。采用TrizoI一步法，但在总RNA提取过程中，需要保持RAase-free進行操作，并且由同一人进行操作[6]。

1.2.2 HMGN5基因mRNA表达水平检测 采用Real-time PCR法检测肺癌组织和癌旁正常组织，取2 μL cDNA模板和20 μL的反应体系以HMGN5和β-actin特异引物扩增相应基因，引物退火温度均为60 ℃。取2.0 μg RNA和1 μL Oligo加入离心管中，补充去离子水，将其充分混匀后，72 ℃水10 min；取出后立即放置在0 ℃冰水浴中，使模板和Oligo退火；再将其放置在42 ℃水浴中1 h，通过72 ℃水浴对RT酶进行灭活处理，水浴10 min。以逆转录制备cDNA行Real-time PCR反应，程序为：95 ℃预变性2 min，95 ℃变性15 s，60 ℃变性1 min，循环45次；95 ℃变性1 min，变性后冷却至55 ℃，读取CT值，计算RNA相对表达量[7]。

1.3 统计学处理 采用SPSS 19.0软件进行数据处理，计量资料以（x±s）表示，比较采用t检验，计数资料用率（%）表示，比较采用 字2检验，相关性分析采用Person，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者HMGN5基因转录mRNA水平的表达比较 观察组肺癌患者HMGN5基因转录mRNA水平明显高于对照组癌旁正常组织，比较差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 HMGN5基因mRNA表达与肺癌临床病理特征的相关性 本组研究对肺癌患者年龄、性别、病理类型、病理分级、分期、是否有淋巴结转移等进行分析，结果发现肺癌组织中HMGN5基因与性别、年龄、肺癌病理类型无显著相关性（P>0.05），但与患者的病理分级、分期、是否有淋巴结转移有着显著的相关性（P<0.05），见表2。

3 讨论

肺癌的发病率及死亡率均位居我国各种恶性肿瘤之首，以非小细胞肺癌最为常见，占肺癌的80%左右[8-9]。目前针对肺癌的治疗无较好的疗法，其远期生存率较低，故早期诊断及早期治疗对肺癌的预后有显著意义[1-10]。

研究证实，HMG参与多种肿瘤的浸润转移，在肿瘤发生发展中起重要作用，HMGN5为HMG成员，在乳腺癌、膀胱癌等组织中表达水平显著升高，HMGN5基因重排、断裂与胃肠道肿瘤、神经胶质瘤及生殖系统肿瘤等发生密切相关[11-12]。研究还发现，采用RNA干扰沉默HMGN5基因，可明显抑制肺癌细胞增殖，因此抑制HMGN5基因表达可能是治疗肺癌的有效疗法[13-14]。故探讨肺癌组织中HMGN5基因的表达水平及与临床病理特征的相关性有重要意义。

本组研究发现，肺癌组织中HMGN5基因转录mRNA水平明显高于对照组癌旁正常组织，差异有统计学意义（P<0.05），与目前文献[15]报道类似。

文献[16]报道，影响肺癌疗效及远期生存率的因素较多，如TNM分期、病理分级、有无淋巴结转移等，还有如基础疾病、吸烟等患者自身因素。但研究发现，影响肺癌预后的独立危险因素主要为肺癌的病理分级和分期以及是否有淋巴结转移等[17-18]。

为进一步探讨肺癌组织中HMGN5基因的表达水平及与临床病理特征的相关性，本组研究对肺癌患者年龄、性别、病理类型、病理分级、分期，是否有淋巴结转移等分析，结果发现，肺癌组织中HMGN5基因与性别、年龄、病理类型无显著相关性（P>0.05）；但与病理分级和分期及是否有淋巴结转移有显著相关性（P<0.05），与目前文献[19]报道类似。

综上所述，肺癌组织中HMGN5基因的表达水平及与临床病理特征显著相关，并与病理分级、淋巴结转移及临床分期呈显著有关，这可能提示HMGN5基因的表达水平与肺癌的发生、发展有着密切的关系[20]。

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