亲水作用色谱固定相的发展及应用研究

李寒松

摘 要：随着我国科技的不断发展与进步，亲水作用色谱固定相在我国受到广泛的应用，具有十分宽广的发展前景。本文我们将从色谱材料结构的角度进行探讨和研究，同时，本文还对亲水作用色谱材料的色谱给予了一定的评价，希望可以对其未来的发展起到促进作用。

关键词：亲水作用色谱；固定相；发展及应用

在亲水作用色谱固定相中，反相液相色谱起着十分重要的作用，首先，它是一种高效的液相色谱技术，其次，它具有着非常好的选择性和分辨率，应用的范围比较广，其唯一的不足就是，在一些离子型强极性化合物中，这项技术很难达到预想的效果。而正相色谱技术虽然可以对极性化合物进行良好的分离和保留，但是，它依然有不足之处，即重现性非常差，同时，它的质谱和溶剂根本无法友好的同时存在。亲水作用色谱固定相的应用比较成功，可以说它很好的解决了反相液相色谱和正相液相色存在的问题。

1亲水作用色谱固定相的发展及应用

1.1在 HILIC 中，当属纯硅胶的应用是最为广泛的，其色谱固定相在酸性环境当中

硅胶柱之所以受到广泛关注，是因为其自身有很多的优点，譬如，稳定性比较好，和经过化学修饰的HILIC 固定相进行比较之后，我们会发现，硅胶柱根本不可能出现键合相流失的现象。同时，它在质谱之间的兼容性也非常好，没有一些不良的现象产生，因此，在对极性药物进行分析、分离的领域中，硅胶柱取得了非常广泛的应用。除此之外，硅胶柱在其他方面也有着普遍应用，譬如，在生物学以及非生物学领域内的药物检测中，硅胶柱就起着十分重要的作用。这是因为硅胶柱自身所具备的一些优势，首先，它可以对药物制剂中的一些活性药物成分，进行适当的分析，然后还可以对药物合成过程中的活性药物等进行分离，虽然硅胶柱的优点比比皆是，但是我们不可以否认的是，纯硅胶柱目前依然存在一定的弊端，其中较为常见的就是，它非常容易对一些强碱性化合物产生不可逆的吸附功能。在中性或者碱性的环境中，有时候因为缺乏键合相的相应保护，很容易就发生硅胶颗粒溶解的现象，导致其自身的稳定性特别差。在此基础上，硅胶颗粒得到了研发和应用，而且通过取得的成果我们可以看出，它明显的提高了硅胶柱在碱性和中性环境中的稳定性。虽然取得的效果比较可观，但是我们要知道，硅胶柱的亲水性是有限的，所以没有办法完全的把极性化合物保留下来，而且它的分离选择性功能也非常差，有待提高。

1.2 其实，氨基键合相在最早的 HILIC 材料的极性键合固定相中，采用的就是氨基键合相

在HILIC真正问世之前，我们最初在乙腈和水的混合流动相体系中，使用的是氨基修饰硅胶，利用它去对碳水化合物进行适当的分离。在对单糖和多糖进行分离时，我们通常采用氨基键合相，因为它可以充分的加快端基差向异构体的转换速度，很大程度上，避免了双峰的形成，进而在分离糖的阶段，可以形成比较好的峰型。事实上，氨基柱和酸性化合物两者之间，有着非常稳固的结合能力，对一些酸性较强的化合物可以很简单的就产生死吸附。而且，在分离一些还原糖的时候，醛基和氨基等，很可能就形成了席夫碱，进而就造成一些分析物以及键合相的性质发生变化。

1.3 如果要分类的话，氰基以及二醇基键合相氰基键合相算是比较传统的正相色谱固定相，可以用于HILIC中

不過，就这两者而言，氰基键合相极性相对而言比较弱，所以很难留下亲水性化合物。然而，二醇基键合相和氰基相比，占有一定的优势，首先它表面的极性就比较强。但是，如果和硅胶柱进行比较的话，它的亲水性就比较差。由此可知，氰基和二醇基键合相各有不足之处，所以应用范围比较狭窄。之后，我们在乙烯基硅的表面，会利用巯基点击反应把 1-硫代甘油和 2-巯基乙醇进行适当的键合，最终使其成为醇羟基型键合相。然后我们还需要采取措施，就是把硫氧化，为其形成TGO和MEO的键合相做好准备。通过以往的一些分析，我们可以看出，把亚砜基团引入到氰基键合相和二醇基键合相中，可以非常有效的提升强极性化合物的保留选择性。

2亲水作用色谱材料的色谱评价

近几年来，随着HILIC在我国应用领域的逐渐扩大，其固定相的类型也在日益增多。对于各种不同的色谱固定相而言，它们在分离效率以及分离选择性方面存在着很大的差异，这种差异的存在，为离子性极强型化合物的分析、分离，提供了很多的选择方式。同时，我们会适当的去结合反相色谱评价体系，在此基础上，去设计HILIC评价体系，经过长时间的思索之后，最后将其建立出来。它的基本骨架结构是由极性化合物尿嘧啶构成，在这里，碱性选择性的评价和酸性选择性的评价所采用的物质存在一定的差异，对于色谱柱的碱性选择性评价而言，我们采用的是含有碱性基团的胞嘧啶，而对于酸性选择性评价而言，我们采用的是含有酸性基团的乳清酸，然后，我们需要对色谱分离阶段出现的静电作用进行适当地考察和研究。对于采用尿嘧啶和胞嘧啶的色谱柱亲水选择性的检验中，在分子中要放入糖单元的尿苷和胞苷这两种物质。通过分析这一评价体系，我们可以获得一些信息，譬如，不同的HILIC色谱柱具有不同的分离选择性，它可以很好地体现出HILIC材料的色谱峰形以及分离选择性。不过，我们也必须意识到一个问题，那就是这个色谱评价体系相对而言比较交单，因此对于不同的色谱柱而言，它们之间的作用机理虽然存在很大的差异，但是依然无法进行准确的体现。所以，在对HILIC材料的未来评价中，我们一定要高度重视发展有效的色谱评价方法，争取在这方面取得更大的成就，进而为亲水作用色谱固定相的发展提供更多的帮助。

3结语

随着我国科研人员对亲水作用色谱的深入研究，目前，亲水作用色谱已经得到了很广泛的应用，受到了各个领域人员的高度重视。亲水作用色谱材料对于色谱技术的发展具有十分重要的影响，可以说是高效液相色谱的核心部分，起着决定性的作用。眼下虽然我们已经拥有了以硅胶为基质的亲水作用色谱固定相，但是，我们必须要意识到自身存在的不足。只有这样，才可能进一步的取得成就。我们现在的任务就是，坚持不懈的去研究一种新型的色谱固定相，然后不断地进行完善，使其可以拥有更宽广的发展空间。

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