超高效液相色谱法测定湿巾中的苯扎氯铵含量

＊成霈 王妍 郭松年

(西安市产品质量监督检验院 西安 710065)

超高效液相色谱法测定湿巾中的苯扎氯铵含量

＊成霈 王妍 郭松年

(西安市产品质量监督检验院 西安 710065)

采用超高效液相色谱法测定湿巾中的苯扎氯铵含量。称取一定量湿巾样品加甲醇-水（体积比1:1）超声、振荡提取后，离心过滤，上机测定，外标法定量。结果表明：该方法在1～50mg/L质量浓度范围内十二烷基二甲基苄基氯化铵和十四烷基二甲基苄基氯化铵线性良好，相关系数分别为0.9998和0.9997，检测限分别为0.50mg/L和0.60mg/L，RSD分别为0.97%和1.45%，加标回收率分别为88.20～91.96%和89.70～92.10%。该方法前处理简便快捷，准确度、精密度、稳定性好，检测结果准确可靠。

湿巾；苯扎氯铵；超高效液相色谱

引言

苯扎氯铵是一种阳离子表面活性剂，属于非氧化性杀菌剂，具有广谱、高效的杀菌灭藻能力，对革兰氏阳性菌和阴性菌，某些滴虫、原虫和真菌有效，常作为防腐剂和杀菌剂应用于卫生湿巾中。苯扎氯铵是由正烷烃基取代二甲基苄基氯化铵组成的同系物混合物，其中以十二烷基二甲基苄基氯化铵（DDBAC）和十四烷基二甲基苄基氯化铵（TDBAC）最为常见。苯扎氯铵对人体的皮肤和眼睛都具有强烈的刺激作用，国内已报道过量使用苯扎氯铵会引起变态反应性结膜炎、视力减退、接触性皮炎，灼伤中毒，严重者甚至可能导致死亡。根据卫生部编写的《消毒产品标签说明书管理规范》含有苯扎氯铵的卫生湿巾用品最小销售标签应当标注所用含量、使用方法、使用范围和注意事项。目前我国尚未制定相关检测方法标准，导致相关部门监管困难。本文采用超高效液相色谱法测定湿巾中的苯扎氯铵含量，并应用于餐饮及市售领域采集样品中苯扎氯铵含量的测定，结果满意。

1.实验部分

(1)仪器与试剂

DDBAC、TDBAC标准品，w=100．0%，美国Dr．Ehrenstorfer公司；甲醇，色谱纯，美国Honeywell公司；三乙胺、庚烷磺酸钠，分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司。UPLC液相色谱仪，配有二极管阵列检测器，美国Waters公司。准确称取0．10g DDBAC、TDBAC标准品，用甲醇-水（v：v=1∶1）溶解并定容至10mL得到10mg/mL的混合标准储备液，再用甲醇-水（v：v=1∶1）逐级稀释为1、2、4、8、10、20、50 mg/L质量浓度的混合标准系列。

(2)样品处理

准确称取湿巾样品1．00g于离心管中，加入20．0mL甲醇-水（v：v=1∶1）超声10min，振荡提取20min后以3000 r/ min离心5min，取上清液用针式过滤器净化，上机进行测定。

(3)色谱条件

ACQUITY UPLC T3液相色谱柱，2．1mm×100mm，1．8μm；柱温30℃，进样量2μL，流动相为甲醇-0．2mol/L庚烷磺酸钠+ 1%三乙胺（冰醋酸调PH=6）（v：v=88∶12），流速0．2mL/ min，检测波长210nm。

2.结果与讨论

(1)苯扎氯铵混合标准溶液色谱图

在1．3色谱条件下，苯扎氯铵混合标准溶液的色谱图见图1。由图1可以看出DDBAC、TDBAC基线平稳，分离良好，能够保证定量结果准确。

图1 苯扎氯铵混合标准溶液色谱图Fig.1 The chromatograms of benzalkonium chloride standard

(2)标准曲线、检测限和线性范围

在1．3色谱条件下对苯扎氯铵混合标准溶液进行测定，以质量浓度（ρ）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标建立标准校正曲线。结果表明，在质量浓度为1～50mg/L范围内苯扎氯铵混合标准溶液线性良好，DDBAC的回归方程为A=1．11×104ρ+6．67×103，r=0．9998，TDBAC的回归方程为A=5．25×103ρ+2．84×102，r=0．9997。将甲醇-水（v：v=1∶1）空白对照与4mg/L苯扎氯铵混合标准溶液按1．3色谱条件重复测定20次，按GB/T16631-2008《高效液相色谱法通则》中“获得最小检测限的方法”计算DDBAC和TDBAC的检测限分别为0．5mg/L和0．6mg/L。

(3)精密度

将4mg/L苯扎氯铵混合标准工作溶液按1．3色谱条件重复测定9次，计算得DDBAC的RSD=0．97%，TDBAC的RSD=1．45%。

(4)回收率

取4组湿巾样品分别准确称取3份1．00 g于离心管中，其中2份分别加入10、50mg/L的苯扎氯铵混合标准工作溶液3mL后混匀，1份作为空白，再按1．2样品处理后依照1．3色谱条件上机测定，以外标法定量，计算湿巾样品的加标回收率结果见表1。结果表明，4组湿巾样品中DDBAC不同浓度水平添加的加标回收率为88．20～91．96%，TDBAC不同浓度水平添加的加标回收率为89．70～92．10%，能够满足湿巾样品的检测要求。

表1 湿巾样品加标回收试验结果Table1 The results of Sample recovery

(5)样品提取方法的选择

将3组含有苯扎氯铵的湿巾样品分别采用体积比为2∶8、1∶1、8∶2的甲醇-水、乙腈-水溶液以及100%甲醇、100%乙腈、水作为提取溶剂处理，结果发现水溶液提取样品的检测结果最低，甲醇-水（v：v=1∶1）溶液提取样品的检测结果最高，而且色谱峰形良好，因此最终确定甲醇-水（v：v=1∶1）溶液作为提取溶剂。根据市售湿巾样品中苯扎氯铵含量的检测结果和标示使用量，结合标准曲线的线性范围，选择20倍的样品稀释倍数。

将3组湿巾样品分别称取3份，用20 mL甲醇-水（v：v= 1∶1）溶液提取3次，将3次提取液分别上机测定，结果发现第1次提取液检测结果最高，第2、3次提取液的检测结果近乎为零，故确定样品经甲醇-水（v：v=1∶1）溶液提取一次后，净化上机测定。

(6)样品检测结果

对餐饮及市售领域采集的不同厂家的36种湿巾样品按上述方法进行检测，结果发现所抽样品中有12种湿巾产品添加了苯扎氯铵作为杀菌剂，而且含量颇高，除其中2种湿巾外包装上标示含有苯扎氯铵外，其余10种均未按照卫生部《消毒产品标签说明书管理规范》在其最小销售标签上标注含有苯扎氯铵，因此可能对消费者产生误导。

3.结论

本文采用超高效液相色谱法测定湿巾中苯扎氯铵的含量，前处理快捷方便，稳定性、准确度、精密度良好，检测结果准确可靠。应用该方法对市售湿巾进行抽样检测，结果表明部分所抽检湿巾未按《消毒产品标签说明书管理规范》在最小销售标签标注含有苯扎氯铵及其含量，有可能误导消费者。

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Measurement of Benzalkonium Chloride Content in Moist Wipes by Super-efficient Liquid Chromatography Method

Cheng Pei, Wang Yan, Guo Songnian

（Xi’an Product Quality Monitoring and Inspection Institute, Xi’an, 710065）

Adopt super-efficient liquid chromatography method to measure the benzalkonium chloride content in moist wipes. Weigh and take certain quantity of moist wipes samples and then add methyl alcohol-water(volume ratio 1∶1) ultrasound，after shaking and extracting, take the centrifugal filtration, measurement by practical operation and external standard method measurement. The result has showed that this method, in the mass concentration range of 1-50mg/L, the linearity of dodecyl dimethyl benzyl ammonium chloride and tetradecyl benzyl dimethyl ammonium chloride is good and the related coefficient respectively are 0.9998 and 0.9997, besides, the detection limit respectively of 0.50 mg/L and 0.60 mg/L, RSD respectively of 0.97% and 1.45%, adding standard recovery respectively of 88.20～91.96% and 89.70～92.10%. This processing method is simple and fast with good accuracy, degree of precision and stability and the detection result is accurate and reliable.

moist wipes；benzalkonium chloride；super-efficient liquid chromatography

TQ

A

((责任编：卢凤英)

国家质量监督检验检疫总局科技计划项目“湿巾中常用保湿剂和杀菌剂的检验方法研究（2015QK202）”。

成霈（1982～），男，西安市产品质量监督检验院，研究方向：质谱分析、色谱分析。