关于“瘦肉精”分类、危害及检测标准的探讨

魏凤静 （辽宁省绥中县畜产品质量安全监察所 125200）

文献综述

关于“瘦肉精”分类、危害及检测标准的探讨

魏凤静 （辽宁省绥中县畜产品质量安全监察所 125200）

“瘦肉精”是一类肾上腺素受体激动剂的统称，在我国被严格禁止应用于食品动物中。本文对“瘦肉精”的分类、作用机理、中毒危害等做了梳理和归纳，并针对其检测手段和标准做了比较和探讨，以期为瘦肉精的有效监管提供参考和借鉴。

1 “瘦肉精”的分类

“瘦肉精”不是指某一种特定的药物，而是一类具有促进蛋白质合成，抑制脂肪沉积的苯乙醇胺类化合物的统称。它们同属于肾上腺素受体(主要β受体)激动剂类物质，按结构通常可分为苯胺型、苯酚型和苯二酚型等三大类。市场上常见的“瘦肉精”主要是盐酸克仑特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇等三种[1,2]。2001～2002年，农业部等国家部委先后下发了第176号公告、第193号公告和第1519号条例等禁止使用β激动剂类药物作为兽药和饲料添加剂[3,4,5]。

表1 “瘦肉精”的主要分类

除了上述16种“瘦肉精”外，近年来又出现了一些新型“瘦肉精”物质。比如可乐定(Clonidine)、巴氯芬(Baclofen)、赛庚啶(Cyproheptadine)等[5]。

2 “瘦肉精”的作用机理及其危害

2.1 作用机理 以盐酸克仑特罗为例，它与β-肾上腺素受体结合，形成激动剂受体复合物，复合物激活G5蛋白，G5蛋白的α亚基随后激活腺苷酸环化酶，由该酶产生的环腺苷酸(cAMP)是一种重要的胞内信使分子。环腺苷酸(cAMP)产生效应的机制是通过结合到蛋白激酶k的调节亚基，以释放该酶的催化亚基，使其磷酸化一系列的胞内蛋白。其中的部分蛋白是酶，在被磷酸化时激活。环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB)被蛋白激酶A磷酸化，结合到一个基因调控部位的cAMP应答元件上，并激活该基因的转录，磷酸化增强了CREB的转录活性，这也是在哺乳动物细胞中，β-肾上腺受体激动剂介导的很多基因转录的机制，其他一些酶的活性在磷酸化时受到抑制[6,7]。

2.2 危害 （1）盐酸克伦特罗急性中毒主要是由于激动心脏和骨骼肌的β2肾上腺素受体所致。若短时间摄入过量的克伦特罗可引起急性中毒，在临床上主要表现为心悸、胸闷、头晕头痛、恶心呕吐、颈背部肌肉酸痛、血压升高。心电图显示窦性心动过速，阵发性室上性心动过速、窦房传导阻滞、早搏等。实验室检查血象增高、心肌酶学登高、血糖增高、血钾降低、肌酐增高、尿素氮增高等[8]。（2）盐酸克仑特罗可作用于多种靶器官，过量且长时间使用会对器官造成慢性毒性。小鼠染毒30d，解剖发现其右心室扩张，心脏外形呈卵圆形。心尖钝圆，心壁变薄而柔软，心脏内积有多量的血液，切开心脏后心壁自行塌陷，心脏组织形态出现了明显的变化[9]。Femmer等给予麻醉的狗连续静脉注射克伦特罗12.5μg/kg剂量，心率增加18%，血压升高44%，增加心脏容积43%，降低外周阻力30%，心肌在显微镜下有小损伤，此损伤非剂量依赖性，全部定位于左心室乳头状肌[10]。李明祯等在研究克伦特罗对小鼠的肝脏损伤时发现，在染毒30d后可观察到高剂量组小鼠体内MDA明显升高，而SOD和GSH-PX活力出现明显降低。而谷丙转氨酶(ALT)，天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)出现明显上升[11]。（3）盐酸克伦特罗对肾脏的毒性主要表现在高剂量能使肾脏器系数发生改变。同时也有实验表明，长时间染毒的大鼠其肾上腺皮质激素细胞会增生，说明长期服用可盐酸克仑特罗会导致肾上腺分泌过度，对机体产生不利影响。Spencer等对绵羊的实验表明盐酸克仑特罗对抗体的产生有抑制作用，在一定程度上降低了免疫力。作为重要的免疫器官，胸腺和脾脏在克仑特罗作用下也会出现一系列的病理变化。此外，盐酸克仑特罗对大鼠胚胎枝芽细胞的分化也有一定的抑制作用，显示出其细胞毒性[12]。

3 检测方法及其标准限值

3.1 检测方法 （1）根据监测对象和代谢规律的不同，“瘦肉精”检测通常采用尿液检测，近年来，反刍类动物中毛发检测也成为研究热点[13]。（2）根据检测原理的不同，目前我国的“瘦肉精”检测技术主要包括了快速筛查技术和确证分析技术。快速筛查技术主要利用免疫学分析原理，通过胶体金免疫技术和酶联免疫技术(ELISA)，产品对应为快速试纸检测卡和试剂盒。可用于“瘦肉精”的定性/半定量检测筛查。检测限值一般在纳克(ng)数量级。其优点是价格相对低廉，快速便捷，适于大规模的样本初筛。对检测出的阳性样本仍需实验室确证才可以作为执法依据。（3）确证分析技术主要包括了薄层层析(TLC)、高压液相色谱(HPLC)、高压液相色谱/二极管陈列(HPLC/ PDA)、高压液相色谱/荧光(HPLC/FLU)液相色谱-质谱联用(LC-MS)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)、气相色谱-傅里叶红外联用(GC-FTIP)和毛细管电泳等方法。优点是准确度、灵敏度高，但需要复杂昂贵的检测设备，对其广泛应用有一定的限制[14]。

表2 我国“瘦肉精”检测标准限值

3.2 标准限值 （1）农业部在第176号公告、第193号公告、第235号公告中明确指出盐酸克仑特罗、(硫酸)沙丁胺醇、莱克多巴胺等禁止在饲料和动物饮用水中使用，在所有可食用组织中不得检出，LC-MS方法中检测标准限值为≤0.5μg/L；胶体金试纸条可从农业部备案产品中或者各省组织的比对试验优质产品中选择。假阳性率应≤5%，假阴性率为0。盐酸克仑特罗和莱克多巴胺检测限值应≤3μg/L，沙丁胺醇检测限值应≤5μg/L；酶联免疫试剂盒应符合农业部《兽药残留酶联免疫试剂(盒)备案参考评判标准》的要求。假阳性率应≤5%，假阴性率为0。盐酸克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇检测限值应≤1μg/kg。（2）在国外，欧盟早在1996年通过委员会指令96/23/EC中，对盐酸克仑特罗等进行了严格管制，禁用于食用动物。对于β2类激动剂用于牲畜支气管痉挛、抑制子宫收缩等要进行登记使用，并严格控制用量。根据86/469/EEC指令，欧盟成员国均有义务对动物及肉制品中合法及非法兽药(添加剂)残留等进行管控。美国食品和药物管理局(FDA)法规21CFR530.41规定，克仑特罗为食品动物禁用物质。其只能用于某些动物疾病的治疗，并且严格指定了克仑特罗原料供应商，其他购买方式和途径均视为违法。日本等国对盐酸克仑特罗的检出限定值定为0.05μg/kg[15]。

4 讨论

（1）“瘦肉精”对于我国养殖业来说并不陌生，部分养殖户出于利益和投机，将其非法饲喂于食品动物，造成了在动物肌体和人体内的残留和蓄积损伤。近几年来，群发性和单发性的“瘦肉精”中毒事件更是屡见报端。中国、美国、日本、欧盟等国家对克仑特罗等“瘦肉精”已经亮起了红灯。（2）本文以“瘦肉精”的定义入手，从结构上对其做了分类，并归纳总结了近年来新兴的“瘦肉精”类物质。以实际生产中最为常用的、价格最便宜的盐酸克仑特罗为例，从分子层面和表观症状上对其作用机理和危害做了详述，使人们知其然和所以然。（3）在检测标准上，近年来我国已经出台了相应条例对饲料中、肉制品中、尿液中的“瘦肉精”残留检测限值提出了明确规定。但应该清晰地认识到与发达国家标准差异和不同。以克仑特罗为例，我国检出限值定为0.5μg/kg，而日本为0.05μg/kg，较中国严格10倍，检测能力的巨大差距和实际残留的高风险对我国的进出口肉类产品都造成了一定压力和隐患，也为下一步技术标准的革新提供了参考。（4）检测手段上，应该清晰地认识到快速筛查和确证分析的利弊，根据实际情况，选择合适的检测手段，以满足工作和实际需求。需要强调的是，目前“瘦肉精”快检卡生产厂家众多，而在农业部备案的生产厂家仅约为30家。盐酸克仑特罗检测卡种类可达180余种，而经农业部备案的CL快检卡只有10余种。所以在监管采购的选择上要注意甄别。

[1] 王培龙. β-受体激动剂类药物分子印迹和质谱分析技术研究[D]. 北京∶ 中国农业科学院, 2012.

[2] 赵文成. β-兴奋剂残留的分离检测研究[D]. 兰州∶ 甘肃政法学院. 2016.

[3] 中华人民共和国农业部公告第176号[S]. 2002.

[4] 中华人民共和国农业部公告第193号[S]. 2002.

[5] 中华人民共和国农业部公告第1519号[S]. 2010.

[6] 王益琦, 陈为升, 徐文锦等. 边缘下皮质脑区微注射克仑特罗对线索诱导海洛因复吸的抑制作用[J]. 中国药理学与毒理学杂志. 2015(5)∶33-35.

[7] 程庆华. 克伦特罗及普萘洛尔对去势大鼠骨代谢的影响[D]. 南京∶南京医科大学, 2009.

[8] 张琪玉, 李海云, 朱雅君. 盐酸克仑特罗中毒40例分析[J]. 中国医师杂志. 2002(9)∶ 56-57.

[9] 邹明, 邹本革, 张启迪. 盐酸克仑特罗对小鼠心肌超微结构的影响[J]. 毒理学杂志. 2012(5)∶ 13-16.

[10] Femmer K, Heer S(1978) The hemodynamic and cardiac effects of toluidine blue on the anesthetized dog. Pharmazie 33∶ 673–675

[11] 李明祯, 刘焕奇, 邹明. 盐酸克伦特罗对小鼠肝脏损伤的研究[J].毒理学杂志. 2009(3)∶ 12-13.

[12] Spencer G S, Oliver M H.Suppression of immune response in lambs during treatment with the beta-adrenergic agonist clenbuterol. Journal of Animal Sciences. 1996, 10(3)∶ 1201-1205.

[13] 张琦. 牛毛检测瘦肉精新技术研发成功[J]. 广西质量监督导报. 2014(10)∶ 78-79.

[14] 张改平, 王选年, 肖肖. 瘦肉精的毒害作用及其试纸快速检测技术[J]. 中国动物检疫. 2011(5)∶ 1-6.

[15] 田颖. “瘦肉精”检测及在畜产品安全监督中的应用[J]. 现代畜牧兽医. 2011(10)∶ 33-34.

S816.76

A

1007-1733(2017)04-0059-02

2016–12–27）