LED组合光源对红掌愈伤组织培养的影响
2017-04-05覃婕黄钊
覃婕+黄钊
(1.惠州学院,广东 惠州 516007;2.惠州原艺科技有限公司,广东 惠州 516002)
摘 要:本文研究LED为光源的光环境调控对红掌愈伤组织诱导及分化的影响,结果表明:叶柄比叶片更易产生愈伤组织;光质配比为5R:1B,光强为10~15μmol/m2·s的组合光源对红掌愈伤组织培养最有利。
关键词:LED;红掌;组培
中图分类号:S682.14 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20170230032
光在组织培养中是重要的环境影响因子,本实验应用新型照明能源LED灯(即发光二极管)对红掌组培的光环境进行调控和研究。
1 材料与方法
1.1 材料
供试材料为红掌品种“维多”的试管苗,LED组合光源在无锡诺达克生物照明科技有限公司定制。无菌苗的叶柄切成1cm长,叶片切成 1cm见方小块。
1.2 方法
愈伤组织诱导培养基:1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.2mg/L2,4-D,愈伤组织增殖培养基:1/2MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LTDZ,分别添加琼脂6.5 g/L,白糖30 g/L,pH调至5.8,温度(25±2)℃;该实验每瓶接种 5个外植体,每个处理接种10瓶。
光照处理光周期为12h/d;分别设置3种光质组合处理3R:1B,5R:1B,7R:1B,以及一个对照CK(白色荧光灯);光强以光量子通量密度计算,单位为μmol/m2·s,设置0,5,10,15,20五个水平。
2 结果与分析
2.1 光质影响
表1 不同光质处理对愈伤组织诱导及分化的影响
3R:1B 5R:1B 7R:1B CK(白色荧光灯)
接种数 50 50 50 50
愈出数(40d) 45 49 30 41
叶柄 分化芽块数 29 39 15 25
芽分化率% 64.4 79.6 50 60
接种数 50 50 50 50
愈出数 40 45 28 40
叶片 分化芽块数 24 37 15 21
芽分化率 60 82.2 53.5 52.5
表1结果表明,“维多”愈伤组织诱导中,叶柄愈出率高于叶片,光质组合中5R:1B的组合对外植体诱导效果最好,叶柄愈出率达98%,叶片也有90%,接种12d后可见叶柄两端膨大,接种17d后可见叶片边缘膨大,7R:1B组合效果较差,3R:1B组合与对照的愈出效果相近;在愈伤组织的分化中,5R:1B的组合也表现最好,在该组合下叶片愈伤组织的芽分化率达到82.2%,稍高于叶柄。
2.2 光强影响
愈伤组织分化需要一定光强刺激,以上面实验筛选出的5R:1B光质组合为基础,再通过光强组合来筛选适合愈伤组织分化的光环境组合。
表2 不同光强处理对愈伤组织分化的影响
光量子通量密度/(μmol/m2·s)
0 5 10 15 20
愈伤组织块数 30 30 30 30 30
叶柄 分化块数 3 19 28 25 11
分化率 10 63.3 93.3 83.3 36.7
芽的质量 细弱 较细 密,较细 密,较粗 较细
愈伤组织块数 30 30 30 30 30
叶片 分化块数 2 15 26 25 12
分化率 6.7 50 86.7 83.3 40
芽的质量 细弱 较细 密,较细 密,较粗 较细
表2结果表明10~15μmol/m2·s强度光照有利于红掌愈伤组织分化,其中10μmol/m2·s分化率最高达93.3%,但芽質量最好的是15μmol/m2·s的光照,暗环境下芽的分化难以进行,20μmol/m2·s光照对芽的分化不利。
3 结论与讨论
综合来看,“维多”的叶柄比叶片诱导愈伤容易,愈出率高,愈出时间短,分化芽 的数量较多,2个部位分化芽的质量无明显差异。光质配比为5R:1B,光强为10~15μmol/m2·s的组合光源对红掌愈伤组织培养最有利。
本实验只研究了光环境对红掌愈伤组织培养的影响,其结果还受取材部位,培养基配方,激素配比,设备环境等因素的影响,有些条件的设置是根据前人的研究数据[1],结果会有一定的差异性,还需要进一步的研究,以期为红掌组培快繁体系的优化提供更准确的数据支持。
参考文献
[1]林茂,王华新,唐遒冥,等.红掌组织培养研究进展[J].北方园艺,2012(24):192-196.
[2]兰芹英,李启任,何蕙英,等.红掌愈伤组织诱导和芽的分化[J].园艺学报,2003,30(1):107-109.