浅谈猪乙型脑炎的诊断与防治

钱新明

（南通市如东县曹埠畜牧兽医站，江苏南通 226402）

浅谈猪乙型脑炎的诊断与防治

钱新明

（南通市如东县曹埠畜牧兽医站，江苏南通 226402）

随着我国经济的不断发展，猪肉己经成为人们日常引用的主要肉食品之一，因此，猪肉的质量问题逐渐被人们愈加关注。猪乙型脑炎是一种极为危险的传染疾病，其主要通过蚊虫进行传染，不仅会给猪造成死亡现象，更会对人们的生命财产安全造成严中的威胁。本文简单的阐述了猪乙型脑炎的诊断方法与防治措施，找出一套可以科学、合理的诊断方法与防治措施。

猪乙型脑炎；诊断；防治

目前，人们生活水平的不断提高，农牧业获得了高速发展，而高速发展背后难免存在着或多或少的问题，对于食品安全问题，我国虽然不断的进行加强检测，但对其本源还不能进行有效的防治。猪乙型脑炎作为一种可以人畜共患的传染性疾病，急需要政府有关部门的防治，对养殖人员普及猪乙型脑炎的诊断方法，全面推广猪乙型脑炎的防治措施，是加强猪乙型脑炎的根本性问题。

1 病原

猪乙型脑炎作为一种传播性疾病，其扩散速度极快，一旦病原体产生，便会迅速的传染周围生物，而蚊虫作为该病毒主要传播途径之一，该病毒的吸附性极强，蚊虫感染病毒便会终生携带病毒，蚊虫繁殖的后代同样也会携带病毒。猪乙型脑炎是一种季节性传染疾病，秋天是其主要的活跃时间，其他时间便会潜伏在病原体与蚊虫体内，这种病毒对温度的抵抗能力较低，温度与药品对其有着极大的伤害，但是，病毒的病原体基数较多、传染迅速，使病毒的数量不断的增加，在病原体与蚊虫的双重传播下，猪乙型脑炎对猪的健康状况造成的极大的威胁，更对人们的生命财产安全造成了严重的影响。

2 临床症状

性别与年龄不同的猪，感染猪乙型脑炎后的临床反应也各不相同。

（1）猪乙型脑炎再传染猪仔后，猪仔会出现无目的的冲撞与转圈，还有出现抽搐与口吐白沫等现象，更有甚者会出现四肢无力、关节肿大与倒地不起等现象，在猪仔感染猪乙型脑炎后，饲养人员很难及时的发现与诊治，导致猪大多会在一到两天内死亡。

（2）妊娠母猪感染乙脑后，临床没有明显的症状，主要表现为流产或者是分娩后会见到木乃伊胎、死胎、畸形胎等。染病后的母猪，产后胎儿大小、病变有着很大的区别。在大小上，有的小如拇指、有的大如正常胎儿。早产仔猪多为死胎，此胎大小不一，黑褐色，有的干缩而硬固，中等大的茶褐色、暗褐色。

（3）公猪感染乙脑后，主要表现为单侧或双侧睾丸炎，有的会出现肿胀。初期肿胀时，触诊为热疼病，几日后可消炎，但是睾丸有萎缩症状，导致公猪性欲减退，精液质量下降，多会因无配种能力而被淘汰。

3 病理学变化

将2头流产死亡母猪和5头病死仔猪进行解剖发现，流产母猪子宫内膜出现严重的水肿病变，有粘稠的分泌物附着在黏膜上，有 1 头母猪的子宫内膜上可以观察到小的散状出血点，粘膜下组织存在水肿病变，胎盘呈现炎性军润。病死仔猪后驱体皮下存在弥散性水肿，全身呈现粉红色，有 8 头仔猪脑膜和脊髓硬膜存在出血点，所有病死仔猪胸腔和心包存在积液，实质器官呈现浊肿及散发小出血点等症状。

4 实验室检验

收集猪乙型脑炎感染导致死亡的猪仔脑组织，建立设备完善的实验室，配备专业的检测人员，对猪乙型脑炎使用RT-PCR检测措施，对其进行全面、细致的检测工作。

4.1 RNA的抽提

用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步方法提取基因组RNA。具体步骤如下：加入550µlTrizol剧烈震动荡5min，室温放置10min，加入200µl氯仿，剧烈震荡5min，室温放置10min后，4℃ 12000转/min离心 10min，将上层上清液转入新的离心管中，加入等体积的异丙醇，-20℃静置1～2h，4℃12000转/min离心10min，加入700µlDEPC水，4℃12000转/min离心15min，将沉淀自然风干，溶于适量无核酸酶的水中，用于立即反转录或者放于-80℃度备用。

4.2 RNA反转录

在新的EP管依次中加入8µlRNA模板，1微升Oligo（dt），1µlDNTP，65℃水浴5min，迅速冰浴3min，再向管中依次加入dd H20 4.5 µl，5×Buffer 4µl，反转录酶1µl，RNA抑制剂0.5µl，42℃水浴1h，70℃水浴15min。所得溶液立即进行PCR扩增。

4.3 猪乙脑病毒基因片段的PCR扩增

PCR反应体系：c DNA模板4µl，10×PCRBuffer 2.5µl，dNTP3 µl，上下游引物各1µl，Taq酶1µl，ddH2O12.5µl，总体积为25µl。反应条件：94℃，3min，94℃，30s，55℃，30s，72℃，30s，30个循环后72℃，5min。取PCR产物 7µl，加入Loading Buffer 1µl，在含有1.5%EB的琼脂糖凝胶上进行电泳检测，紫外线灯下观察结果。电泳结果显示，待检样品扩增到一条与阳性对照片段大小（820bp）相同的特异性条带，说明待检样品乙型脑炎病毒呈阳性。

5 诊断

针对猪乙型脑炎的诊断主要有两种方法，分为实验室诊断与临床诊断。而实验室诊断又分为三种诊断措施，分别是血清学、病毒分离鉴定与分子生物学等方法。

5.1 临床诊断

猪乙型脑炎临床上可根据以下临床表现进行诊断：该病有严格的季节性，呈散在性发生，感染该病的怀孕母猪会突发性流产、产死胎等，感染幼猪有明显的脑炎症状，死后多出现脑水肿、体腔水肿等，公猪发生睾丸炎、睾丸肿大等症状。

5.2 血清学方法

血清学方法中有血凝抑制试验（HI）、补体结合试验（CT）、中和试验（NT）、酶联免疫试验（ELISA）、胶体金法等。

5.3 病毒分离鉴定方法

病毒分离培养时，可取病死猪的脑、肝脏、脾脏、肾脏等组织样品，进行乳鼠脑组织接种和 BHK、C6/6、Vero 等细胞分离，通过分离培养取得毒株，再进行分子生物学等鉴定。

5.4 分子生物学方法

分子生物学方法诊断主要的检测方法有PCR－ELISA微板杂交法、RT－PCR、套式 PCR、半套式 PCR、实时荧光 PCR 和基因芯片方法等。

6 预防

现在，对于猪乙型脑炎的治疗并没有有效的药品，因此，对于猪乙型脑炎的控制，还需要养殖人员实施大量的防治工作，作为一种传播迅速的病毒，我们需要找到其传播的局限性。猪乙型脑炎对热量与消毒药剂有着极低的抵抗能力，所以，对于防治工作，养殖人员要定期的对猪群生活环境进行清扫与消毒、及时的对猪群注入疫苗，更需要养殖人员制定与完善出科学的养殖管理制度。全面的病毒预防，保障猪健康的成长与人们的生命财产安全。

6.1 保持养殖环境

猪乙型脑炎的产生主要是蚊虫将病毒带入养殖区域，携带病毒的蚊虫对猪进行叮咬，便会导致病毒的传染，所以，想要防止猪乙型脑炎的产生，对于养殖区域的环境需要进行定期的清扫与消毒。全面的了解蚊虫的生活习惯，根据蚊虫的生存需求，找到有效防止蚊虫产生的对策。对猪的排泄物与其他垃圾，养殖人员需要频繁的进行清理，防止蚊虫的滋生，必要时可以使用强效的杀虫药剂，对蚊虫进行全面的灭杀。在清扫工作结束后，养殖人员需要对养殖区域进行消毒工作，因为，猪乙型脑炎对与消毒药品的抵抗能力极低，消毒工作可以对病毒进行有效的灭杀。

6.2 及时进行疫苗接种

在灭蚊技术尚不完善及无有效疗法的情况下，控制JE流行最有效的方法就是进行疫苗接种。我国目前常用的猪用乙脑疫苗主要有灭活疫苗和活疫苗两种，猪乙脑鼠脑灭活疫苗于1996年由湖北省农业科学院畜牧兽医研究所研制，然后出现了以减毒株SA14-14-2 株为抗原制备的猪乙脑减毒活疫苗。为了提高猪群免疫力（尤其是头胎青年母猪），一般在每年蚊虫开始活动前的1～2个月进行乙脑疫苗预防注射，并且在以后的每个生产周期也要注意定期进行疫苗的免疫接种工作。

6.3 完善养殖管理制度

防治感染乙脑。猪是JEV传播的一个主要宿主，预防乙脑应加强宿主动物的管理。重点是管理好没有经过夏秋季（蚊虫活动期）的幼龄猪和从非疫区引进的种猪，因为这些猪是乙脑易感动物，一旦感染则产生病毒血症，成为传染源。要做到保持猪体清洁，维持良好体况，提高其自身抵抗力，避免人畜混居，加强动物疫病监测等管理措施。减少蚊虫的孳生，做好环境及畜舍卫生，防止积水，同时对积水、污水撒放药剂。为避免蚊对化学农药产生高抗性，应对驱蚊药进行轮用、混用或适时的停用。对流产死胎、胎衣等进行无害化处理。对于种猪，在乙型脑炎流行季节饲喂高能量高蛋白饲料，保存猪体清洁，维持猪良好体况，提高其自身免疫力。加强动物疫病监测，重点管理没有经历夏季的幼龄动物和新引进的动物。

7 总结

猪乙型脑炎对猪的健康有着极为严重的危害，而目前我国对于此种疾病的治疗药品并不能完全有效，特别是这种疾病对于人类同样有着极高的威胁。因此，为了人们的生命财产安全，必须要对猪乙型脑炎的产生进行有效的预防工作，防止病毒的产生，有关部门及时的普及预防知识，让猪可以免受猪乙型脑炎的危害，从而，显著的提高猪的产量与质量，让我国的农牧业可以快速的发展，为人们日常生活提供安全、健康的肉食品，保障人们的生命财产安全。

[1] 蔡雨函，朱玲，周远成，等.抗流行性乙型脑炎病毒药物的研究进展[J].中国人兽共患病学报，2015，31（1）：77-82.