结球菊苣叶中多糖的提取工艺研究

刘佳欣，刘玲翠，王小巍，王力

（沈阳化工大学，辽宁 沈阳 110000）

结球菊苣（Cichorium intybus L.）属菊科2年生或多年生草本植物。起源于地中海沿岸中亚和北非，欧美国家普遍种植，以意大利种植最广[1-3]。外观是红色的，颜色鲜艳[4]。菊苣营养丰富，其中所含的野莴苣甙和山莴苣素等苦味物质，具有清肝、利胆、催眠等作用[5]。结球菊苣营养价值高，食用部分含蛋白质、脂肪、糖类、维生素，维生素B1、维生素B2、维生素C 、钙、磷、铁，食用菊苣能降低血脂和胆固醇、活跃骨髓造血功能，对防治心脑血管硬化、糖尿病、高血压、营养不良性贫血等疾病有一定的作用[6-7]。综上所述，结球菊苣是一种新兴优质特菜，有良好的社会效益和经济效益[8]。

1 实验部分

1.1 实验对象

新鲜结球菊苣采购于辽宁省沈阳市中药材研究基地。

1.2 实验试剂

98%浓硫酸、氢氧化钠、苯酚、酒石酸钾钠、3,5-二硝基水杨酸、亚硫酸钠、考马斯亮蓝。

1.3 仪器

紫外可见分光光度计(WFZ-UV 2000尤尼柯上海仪器有限公司)，数显恒温水浴锅(HH-4国华电器有限公司)，电子天平(FA1104沈阳杰龙仪器有限公司)，真空干燥箱(DZG-6050SA上海森信实验仪器有限公司)。

2 实验方法

2.1 材料处理

将结球菊苣叶洗净，烘干，粉碎，过40目筛，保存备用。

2.2 多糖含量测定

2.2.1 对照溶液的匹配

准确称取标准葡萄糖10 mg于100 mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度，配0.1 mg/mL的葡萄糖溶液。

2.2.2 总糖的标准曲线绘制

取葡萄糖标准品10 mg于10 mL的容量瓶中加水至刻度线，混匀，取该液1 mL入10 mL容量瓶中加水至刻度线，即得0.1 mg/mL葡糖糖标准液。

取浓度为0.1 mg/mL葡糖糖标准液0, 0.2, 0.4,0.6, 0.8, 1.0 mL分别加入试管中，加蒸馏水至2 mL,再加入 6 % 苯酚1.0 mL、加浓硫酸5 mL，摇匀放置5 min，沸水浴15 min，取出冷却至室温，在490 nm波长下测其吸光度，绘制标准曲线。

2.2.3 还原糖的标准曲线绘制

精密吸取0.1 mg/mL葡糖糖标准液0, 0.1, 0.2,0.3, 0.4, 0.5 mL，各补加蒸馏水至0.5 mL，加DNS试剂1.5 mL, 沸水浴5 min，取出冷却后加入4 mL蒸馏水，在540 nm波长下测其吸光度，绘制标准曲线。

2.3 提取温度对多糖得率的影响

精确称取1 g结球菊苣粉末放置在圆底烧瓶中，以料液比1:40（g/mL），置于数显恒温水浴锅中，温度分别控制在75、80、85、90、95 ℃，提取 2 h，抽滤，取得上清液，离心，将上清液定容，测定吸光度值。考察提取温度对多糖得率的影响。

2.4 提取时间对多糖得率的影响

精确称取1 g结球菊苣粉末放置在圆底烧瓶中，在试验 2.3项所得的最佳提取温度下（85 ℃），以料液比1:40 （g/mL），置于数显恒温水浴锅中，分别提取30、60、90、120、150 min，抽滤，取得上清液，离心，将上清液定容，测定吸光度值。考察提取时间对多糖得率的影响。

2.5 料液比对多糖得率的影响

精确称取1 g结球菊苣粉末放置在圆底烧瓶中，在试验2.3和2.4项所得的最佳条件下，分别以料液比 1:20、1:30、1:40、1:50（g/mL）于试管中，置于数显恒温水浴锅中，提取 2 h，抽滤，取得上清液，离心，将上清液定容，测定吸光度值。考察料液比对多糖得率的影响。

2.6 提取次数对多糖得率的影响

精确称取1 g结球菊苣粉末放置在圆底烧瓶中，在试验2.3、2.4、2.5项所得最佳条件下，分别用水提取1、2、3次置于数显恒温水浴锅中，提取 2 h，抽滤，取得上清液，离心，将上清液定容，测定吸光度值。考察提取次数对多糖得率的影响。

3 结果与讨论

3.1 标准曲线的测定

根据所测试的结果计算得出多糖得的线性回归方程为：Y= 5.00714x+ 0.008 81(R2=0.9982)，式中x为葡糖糖的浓度，Y为溶液的吸度。

图1 结球菊苣总糖标准曲线

图2 结球菊苣还原糖标准曲线

3.2 提取温度对多糖得率的影响

当料液比1:40，提取时间t=120 min，从图3可以看出，多糖得率随温度的上升而上升，当提取温度高于 85 ℃时，由于温度过高，得率明显下降，可能的原因是由于高温使多糖结构被破坏。因此，最佳提取温度为85 ℃。

图3 不同提取温度下的多糖得率

3.3 提取时间对多糖得率的影响

当料液比1:40，提取温度T=85 ℃，由图4可知随着时间的继续延长，多糖提取率呈上升趋势，当提取时间超出120 min，随着时间的延长，多糖提取率下降，可能的原因是长时间的提取使多糖降解，因此考虑综合因素提取时间为 120 min最佳。

图4 不同提取时间下的多糖得率

3.4 料液比对多糖得率的影响

当提取时间t=120 min，提取温度T=85 ℃，由图5可知随着料液比的增加，提取多糖的得率也增加。当料液比增加到1:40时，多糖的得率达到最大值，其后保持平稳状态，而且当料液比提高时，后续的浓缩操作工作量会大大加重,因此提取的最佳料液比为1:40。

3.5 提取次数对多糖得率的影响

当提取时间为120 min，提取料液比为1:40，提取温度为85 ℃，由图6可知随着提取次数的增大，多糖得率逐渐降低。多次提取不仅耗时、耗能而且增加后续浓缩操作的工作量，因此最佳的提取次数为1次。

图5 不同料液比下的多糖得率

图6 不同提取次数下的多糖得率

4 结 论

通过单因素试验对结球菊苣叶中的多糖进行提取，得到的最佳提取条件为：提取温度 85 ℃，提取时间为120 min，料液比1:40，提取次数1次。

[1]赵文若, 李新江, 胡俊杰，等. 吉林地区结球菊苣引种试验研究[J].北方园艺, 2014, (21): 40- 42.

[2]高华杰, 何洪巨, 王文琪，等. 结球红菊苣(Cichoricum intybus var.foliosum Hegi.)花色苷初步研究[J].食品工业科技,2010,(1):141-143.

[3]李钦存.结球菊苣的栽培技术[J].特种经济动植物, 2003, (12): 31．

[4]赵文若, 建德锋, 逯占齐. 结球红菊苣的特征特性及栽培技术[J].吉林蔬菜, 2014, (12): 6.

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[6]张宝海, 韩向阳, 何伟明，等.结球红菊苣实用栽培技术[J].中国蔬菜, 2007, (12): 44- 45.

[7]张燕燕. 优质高档保健蔬菜—结球菊苣[J]. 当代蔬菜,2005, (5): 35．

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