犬粪包虫抗原检测调查及防治

祁小英 青海省乐都区畜牧兽医站 810799

犬粪包虫抗原检测调查及防治

祁小英 青海省乐都区畜牧兽医站 810799

包虫病或称棘球蚴病，是由带科棘球属和泡球属绦虫的中绦期（幼虫）寄生于人和动物而引起的人畜共患寄生虫病。为了了解乐都区犬包虫病的感染情况，用酶联免疫吸附试验对驱虫前后的260份犬粪进行了包虫抗原检测，检出阳性4份，阳性率为1.54%。

犬粪；包虫；酶联免疫吸附试验；防治

1 流行病学

据报道，包虫病有棘球蚴病和泡球蚴病两种，是严重危害人畜健康和妨碍畜牧业生产发展的常见地方病。我国是世界上包虫病流行范围最广的国家之一，包虫病流行区的面积占我国陆地面积的44.6%，受威胁人口约为8000万。我国也是世界上包虫病流行最严重的国家之一，按照国际有关组织的划分属于高流行区。而青海是畜间特高流行区，牛羊等家畜呈高度感染，犬、狐、狼等犬科动物均易感染棘球绦虫，野生动物感染也较严重。

2 症状与病理变化

棘球蚴对人和动物的致病作用为机械性压迫、毒素作用及过敏反应等。症状的轻重取决于棘球蚴的大小、寄生的部位及数量。棘球蚴多寄生于动物的肝脏，其次为肺脏，机械性压迫可使寄生部位周围组织发生萎缩和功能严重障碍，代谢产物被吸收后，致使周围组织发生炎症和全身过敏反应，严重者可致死。

3 包虫抗原检测

用酶联免疫吸附试验对犬粪进行检测。如果待检样品中含有包虫抗原，就会与包被板上的包虫抗体及第二步加入的包虫抗体酶标结合物特异性结合。间接结合在包被板上的包虫抗体酶标结合物与底物反应的显色状况即可反映出样品中是否含有包虫抗原。

（1）材料与方法。采集新鲜的犬粪进行测试。诊断液由省动物疫控中心提供，深圳康百得生物科技有限公司生产。试验器械为电子天平、酶标仪、恒温箱和我移液器等。

（2）试验操作准备。采集犬粪样品。用蒸馏水或去离子水将洗涤液按1∶10稀释，充分混匀待用。用蒸馏水或去离子水将样品按1∶1稀释，充分混匀待用。犬粪样品需要预先低温（-70℃以下）冷冻7天以上灭活虫卵。称取1g粪便加入1mL样品稀释液充分搅拌混匀，静置10分钟，再3000rpm离心10分钟，取上清液待检。

（3）检测步骤。加样反应。样品孔中每孔加入100uL待检样品；空白对照2孔，每孔仅加入100uL样品稀释液；阴性对照2孔，每孔仅加入100uL阴性对照品；阳性对照2孔，每孔仅加入100ul阳性对照品。盖好封板膜，37℃避光反应30分钟。洗板。甩去孔内液体，每孔注满规定浓度洗涤液洗板6次，每次均需静置1分钟，最后一次甩净，拍干。加酶反应。除空白对照孔外，其余每孔加酶结合物100uL,盖好封板膜，37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体，如上洗板，拍干。显色反应。按所需用量，临用前取等体积底物和显示剂充分混匀后每孔加100uL盖好封板膜，37℃避光反应10分钟。终止反应。加终止液50uL，以空白对照调零，用酶标仪于450nm波长读取OD值。

（4）注意事项。试剂盒各组份从冷藏环境中取出时必须平衡至室温后方可开封启用。未使用完的试剂组份及时放回2～8℃密封保存。加试剂前应将试剂轻摇、混匀。孵育时必须用封板膜密封板孔，封板膜不可以重复使用。用弃的试剂盒及样品都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性，必须小心使用。采集的犬粪样品若不能及时检测，应将粪样低温（～70℃）冻存，防止腐败或反复冻融。如犬粪难以溶解，可适当捣碎处理。若没有低温冷冻条件，做试验时一定要做好个人防护，如穿防护服、戴口罩、帽子、手套和脚套等。称取样品后的镊子、剪子和试管架等用火烧烤，一次性防护用品、样品管等都要焚烧，做无害化处理。

4 结果分析

（1）检测结果表明我区家养犬有一定程度的棘球蚴感染。驱虫前犬粪包虫抗原检测感染率为3.75%，驱虫后感染率为0.56%，感染率下降了2个百分点，说明药物驱虫对犬包虫有一定的治疗作用。

（2）驱虫后10月份检测犬粪包虫抗原感染率为零，这与乡镇兽医站严格落实了省动物疫控制定的“月月驱虫、犬犬投药”的要求有关。犬粪的采集时间对检测结果有很大的影响。据相关实验，犬驱虫后第二天采集犬粪进行检测，因为虫体破裂，感染率会比驱虫前更高、更准确。虫体不成熟，没有排孕卵节片，感染率阴性。

（3）上述检测结果只能代表小部分地区的感染强度，要了解全区的感染情况，今后需加大检测量。

（4）犬粪抗原ELISA检测法虽然是诊断包虫感染的一种方法，但是由于采样和试剂等因素，对准确、大面积诊断有一定的影响，有待完善。

5 防治措施

根据家畜棘球蚴病流行病学情况，按照因地制宜、分类指导的原则，采取以控制传染源为主，以中间宿主防治、切断传播途径等措施相结合的综合性防治策略，全面开展家畜棘球蚴病的防治工作，减轻家畜棘球蚴病危害。早期诊断药物治疗可用吡喹酮犬5mg/kg体重，羊用丙硫咪唑驱虫等。禁止用感染了棘球蚴的动物肝脏和肺脏等组织器官喂犬。对犬定期驱虫，驱虫后的犬粪进行无害化处理（深埋或焚烧）。保持畜舍、饲草料和饮水卫生，防止犬粪污染。包虫病控制的焦点在于家畜间的控制，可以对新生羔羊进行羊棘球蚴病基因工程疫苗免疫。对家畜进行定点屠宰，加强检疫，对感染有棘球蚴的动物组织和脏器进行无害化处理，污染的污物污水不能任意向河渠排放。