Sysmex XN-3000全自动血细胞分析流水线血小板聚集报警信息的可信性分析

2017-03-13曹科罗小娟李世兴刘新刚陶明俊王丹马东礼

山东医药 2017年8期

关键词：血细胞批号标本

曹科，罗小娟，李世兴，刘新刚，陶明俊，王丹，马东礼

(深圳市儿童医院，广东深圳 518038)

Sysmex XN-3000全自动血细胞分析流水线血小板聚集报警信息的可信性分析

曹科，罗小娟，李世兴，刘新刚，陶明俊，王丹，马东礼

(深圳市儿童医院，广东深圳 518038)

目的分析Sysmex XN-3000全自动血细胞分析流水线(以下简称XN-3000)血小板聚集报警信息的可信性，并探讨其对血小板聚集的最佳诊断阈值。方法选取血液标本503例份，分别采用XN-3000和人工镜检判断血小板聚集情况。以人工镜检结果为金标准，分析XN-3000警示值对血小板聚集的判断价值，并分析两种方法检测结果的关系。绘制受试者工作特征(ROC)曲线，分析XN-3000对血小板聚集的最佳诊断阈值。结果 XN-3000检测血小板聚集阳性158例份、阴性345例份，人工镜检血小板聚集阳性181例份、阴性322例份。XN-3000警示值判断血小板聚集的敏感性为76.2%，特异性为93.8%，阳性预测值为87.3%，阴性预测值为87.5%，准确性为87.5%。Pearson相关分析显示，XN-3000警示值与人工镜检血小板聚集阳性率呈正相关(r=0.987，P<0.01)。ROC曲线分析显示，XN-3000警示值判断血小板聚集的最佳临界值为80，此时敏感性为87.8%、特异性为91.6%、AUC为0.92。结论 XN-3000警示值判断血小板聚集的可信性较高，其最佳诊断阈值为80。

全自动血细胞分析仪；血小板聚焦；警示信息

血小板聚集可导致血小板计数假性降低，容易造成临床误诊、误治[1～4]。儿童静脉血管小且不显露，患儿采血时常不配合，很容易造成血小板聚集，从而影响检测结果。为了提高工作效率，实验室只对血细胞分析仪提示异常信息的血液标本进行选择性地人工镜检，因此仪器对血小板聚集筛查报警信息的准确性就显得尤为重要[5]。Sysmex XN-3000全自动血细胞分析流水线(以下简称XN-3000)检测血常规时可提供血小板聚集警示信息并提供不同警示值(0～300)的直方图[6]，具有检测速度快、提供参数多、异常报警信息全、结果准确等优点。但目前鲜见其对血小板聚集报警信息可靠性的报道。为此，我们进行了如下研究。

1 材料与方法

1.1 材料选择2016年2～4月深圳市儿童医院住院部收集的血液标本503例份，均经EDTA-K3抗凝静脉血，EDTA-K3浓度为1.5～2.0 mg/mL，检验科接收标本时确认标本量充足、无肉眼凝块。主要仪器：XN-3000购于日本希森美康株氏会社；Olympus BX53光学显微镜购于日本Olympus公司。仪器配套校准品、质控品、血常规检测试剂：WNR(批号：A5051)、WDF(批号：A6011)、RET(批号：A5021)、PLT(批号：A5030)、WPC(批号：A5022)，稀释液：WNR(批号：A6005)、WDF(批号：A5033)、SLS(批号：A6003)、DFL(批号：A5010)、WPC(批号：A6001)、DCL(批号：G6068)。

1.2 质量控制实验前配套校准品校准血常规，每日采用配套高、中、低三水平室内质控品监测血常规各参数的稳定性。控制项目均在控。所有结果符合卫生部临床检验中心的室间质量评价要求。

1.3 血小板聚集检测 ①XN-3000检测：严格按照XN-3000操作规程，将503例份血液标本上机检测，仪器自动涂片推片、染色、烘干，以上操作均于标本采集后6 h内完成。记录XN-3000检测血小板聚集的警示值，以警示值为110～300判断为血小板聚集阳性，0～100判断为阴性。② 人工镜检：由2位技术熟练的主管技师对503例份血液标本进行血涂片，瑞氏-吉姆萨染色后显微镜下观察其尾部和体尾交界处，确认是否有血小板聚集。以血涂片中血小板聚集个数≥5个，并在观察区域中出现聚集频率≥5次判断为镜下血小板聚集阳性。

1.4 XN-3000警示值判断血小板聚集的价值及最佳阈值分析采用SPSS13.0统计软件。以人工镜检结果作为判断血小板聚集的金标准，采用Kappa检验判断XN-3000警示值和人工镜检结果的一致性：Kappa值≥0.75说明两者一致性相当满意，≥0.4～<0.75说明两者一致性尚可，<0.4说明两者一致性不够理想[7]。计算XN-3000警示值判断血小板聚集的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性。将XN-3000警示值分为0、10～100、110～200、210～300四个等级，采用Pearson相关分析法分析XN-3000警示值与人工镜检血小板聚焦阳性率的关系。采用非参数法计算XN-3000警示值对血小板聚集的判断价值，以“1-特异性”为横坐标、敏感性为纵坐标、绘制受试者工作特征(ROC)曲线，分析其最佳诊断阈值；曲线下面积(AUC)<0.7说明判断价值较差，0.7～0.9说明判断价值中等，>0.9说明判断价值较高。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 XN-3000检测与人工镜检结果 Kappa检验结果显示，XN-3000检测与人工镜检结果的Kappa值为0.72，说明两者一致性尚可。XN-3000检测与人工镜检具体结果见表1。

表1 XN-3000检测与人工镜检血小板聚集结果(例份)

2.2 XN-3000警示值对血小板聚集的判断价值 XN-3000警示值判断血小板聚集的敏感性为76.2%(138/181)，特异性为93.8%(302/322)，阳性预测值为87.3%(138/158)，阴性预测值为87.5%(302/345)，准确性为87.5%(440/503)。

2.3 XN-3000警示值与人工镜检血小板聚集阳性率的关系 XN-3000警示值为0、10～100、110～200、210～300的血液标本分别为106、239、83、75例份，其中人工镜检血小板聚集阳性率分别为9.4%(10/106)、13.8%(33/239)、80.7%(67/83)、94.7%(71/75)。Pearson相关分析显示，XN-3000警示值与人工镜检血小板聚集阳性率呈正相关(r=0.987，P<0.01)。

2.4 XN-3000警示值判断血小板聚集的最佳诊断阈值 ROC曲线结果显示，XN-3000警示值为230时，判断血小板聚集的特异性最高(99.7%)，但敏感性较低(37.0%)。以Youden指数最大的切点为临界点，XN-3000警示值判断血小板聚集的最佳临界值为80，此时敏感性为87.8%、特异性为91.6%、Youden指数为0.795、AUC为0.92。见图1。

图1 XN-3000警示值判断血小板聚集的ROC曲线

3 讨论

血小板是外周血细胞中体积最小的颗粒细胞，具有黏附和聚集功能，其计数准确性受检测方法、血小板形态等因素的影响。若存在血液未及时充分抗凝(如采血速度慢、采血过程不顺利、未充分混匀等)、血液与抗凝剂比例过高、患者合并血栓前状态(如高镁血症)、标本采集后室温下放置时间过短等因素[8～10]，血小板常聚集在一起，导致其计数假性降低，从而造成临床的判断失误，甚至误诊、误治[10]。血细胞分析仪作为过筛仪器，在检测血常规时能否准确提示血小板是否发生聚集显得尤为重要。XN-3000是Sysmex最新款的血细胞分析流水线，具有检测速度快、提供参数多、异常报警信息全、结果准确等优点，但其对血小板聚集预警信息的可靠性评价目前鲜见报道。

因目前国内外尚未对镜下血小板聚集作出规定，我们根据日常工作经验总结，以血涂片中血小板聚集个数≥5个，并在观察区域中出现聚集频率≥5次，作为镜下血小板聚集阳性的判断标准，以此计算XN-3000警示值。本研究结果显示，XN-3000警示值判断血小板聚集的敏感性为76.2%，特异度为93.8%，准确性为87.5%，与人工镜检结果的一致性尚可。ROC曲线分析显示，XN-3000警示值判断血小板聚集的最佳诊断阈值为80，AUC为0.92，此时判断血小板聚集的价值较高；随着XN-3000警示值的升高，人工镜检血小板聚集阳性率也逐渐升高，两者呈正相关。与李宝青等[11]、袁丽萍等[12]研究结果一致。本研究还发现，XN-3000警示值越高，镜下血小板聚集阳性率越高。当XN-3000警示值为230时，判断血小板聚集的特异性接近100%，说明XN-3000警示值可用于初步判断血小板有无聚集及其严重程度。同时本研究结果发现，部分XN-3000警示值为0的血液标本，人工镜检血小板聚集阳性率达9.4%，说明对血小板发生少量聚集的标本，仪器可能检测不到，从而造成假阴性。

本研究人工镜检结果显示，血小板聚集阳性的181例份标本中，有19例份XN-3000检测血小板计数低于100×109/L(正常值下限)，经重新抽血检测，结果显示血小板计数均高于正常值下限。考虑到儿童抽血相对困难，对于XN-3000检测血小板计数高于正常值下限的患儿，本研究并未要求重新抽血检测，因此可能会造成XN-3000检测结果的假性偏低，导致临床医生对部分血液病患者(比如血小板增多症)的误诊、误治。因此，建议检验技师在审核结果时通过对比历史结果、临床诊断、仪器警示值等因素综合判断是否需要重新抽血复检。

综上所述，XN-3000警示值判断血小板聚集的可信性较高，其最佳诊断阈值为80，对警示值高于80的标本应行人工镜检或重新抽血复查等以便为临床提供准确的检测报告。与人工镜检相比，XN-3000检测仍存在一定的局限性，其在鉴别血细胞的形态和结构等方面还不够完善，对异常细胞的筛检也不甚理想[13,14]。临床应根据血细胞分析仪的性能，建立和完善适合自身需要的全自动血细胞复检规则[15]。

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