HPLC法测定达沙替尼的含量

张萌 孙品 魏衍纲(辰欣药业股份有限公司，山东 济宁 272031)

HPLC法测定达沙替尼的含量

张萌 孙品 魏衍纲(辰欣药业股份有限公司，山东 济宁 272031)

目的建立达沙替尼的含量测定方法，为其质量标准提供依据。方法：色谱柱：岛津Wondasil C18（5μm，4.6× 250mm）；柱温：30℃；流动相：以0.05mol/L醋酸铵（pH5.5± 0.05）为流动相A；乙腈为流动相B，梯度洗脱；流速：1 mL/min；检测波长：320nm。结果在该色谱条件下，达沙替尼在0.09～0.21mg/ml范围内线性关系良好，相关系数为0.9999，达沙替尼供试品溶液的稳定性以及所建立定量方法的专属性、重现性、精密度、加样回收率均符合要求。结论所建立的测定方法简便、稳定、专属性强、可重复性好，可以用于达沙替尼的质量控制。

高效液相色谱法；达沙替尼；含量测定；

达沙替尼[1]是多靶点受体酪氨酸激酶受体抑制剂，临床用于对既往治疗失败或不耐受的慢性髓系白血病（CML）的所有病期患者,同时还用于治疗对其他疗法耐药或不耐受的费城染色体阳性的急性淋巴细胞白血病（ALL）成人患者。该药由美国Bristol Myers Squibb公司研发，2006年6月由美国FDA批准上市,商品名为SPRYCEL[2]。该药也被证明可治疗许多其他类型的癌症，包括加速期的前列腺癌.

本研究采用高效液相色谱（HPLC）技术建立达沙替尼的质量控制研究提供参考。

1 仪器与试药

岛津LC-20AT高效液相色谱仪；SPD-20AVP紫外-可见光检测器，HW2000色谱工作站；十万分之一电子分析天平（梅特勒公司）。

达沙替尼（辰欣药业股份有限公司；批号：160924301，160924302，160924303）。

达沙替尼对照品（辰欣药业股份有限公司，含量：99.20%）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：岛津Wondasil C18（5μm，4.6×250mm）；以0.05mol/ L醋酸铵（pH5.5±0.05）为流动相A；乙腈为流动相B，梯度洗脱；流速：1 mL/min；检测波长：320nm,进样量10μl，空白溶剂不出峰，空白溶剂及混合溶液中各杂质均不干扰本品测定；供试品主峰理论板数为69257，拖尾因子为1.05，说明本法系统适用性良好。

2.2 供试品溶液

取达沙替尼约15mg，精密称定，置100ml量瓶中，加稀释液[0.1mol/L盐酸-乙腈（50:50）]适量，超声溶解并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.3 线性关系考察

精密称取达沙替尼对照品15.12mg，置25ml量瓶中，用稀释液适量超声使溶解，放冷，加稀释液稀释至刻度，摇匀，作为线性试验储备液。分别精密量取储备液1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml、3.5ml置于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得线性0.09、0.12、0.15、0.18、0.21mg/ml溶液；分别取上述溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，以达沙替尼浓度和相对应的峰面积做线性回归，以峰面积（A)对浓度C（mg/mL)进行线性回归：A=5E+07X-8566.2 R=0.9999,在该色谱条件下，本品在0.09mg/ml～0.21mg/ml，其峰面积与浓度呈良好线性关系。

2.4 溶液稳定性

取同一批次的达沙替尼样品（批号:160924301），按照“2.2”项下方法制备成供试品溶液，置于室温下，于0h、2h、4h，精密量取20μl注入液相色谱仪，测定达沙替尼峰面积值并计算RSD值为0.65%，表明供试品溶液在室温放置的4h内是稳定的。

2.5 精密度

称取达沙替尼7.50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加稀释液适量，超声溶解并稀释至刻度，摇匀，取10μl连续6次注入液相色谱仪，记录色谱图，连续进样6次的峰面积RSD值为0.19%。

2.6 重复性

分别称取达沙替尼6.0mg、7.5mg、9.0mg各三份，置50ml量瓶中，加稀释液适量，超声使溶解，放冷，加稀释液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另称取达沙替尼对照品7.5mg，置50ml量瓶中，加稀释液适量，超声使溶解，放冷，加稀释液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；按“2.1”项下色谱条件进行平行测定，进样量10μl，测定达沙替尼峰面积积分值并计算RSD值为0.36%，表示本方法的重复性良好。

2.7 检测结果

取3批样品（批号：160924301，160924302，160924303），按2.1项方法制备供试品溶液及对照品溶液，分别精密量取10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量。3批样品的含量分别为99.27%，99.15%，99.26%。

3 结语

通过查阅参考文献，并经过严格的实验验证，采用HPLC法测定达沙替尼的含量的方法，能够有效分离、检验达沙替尼的含量，专属性强、准确度高，操作简便、准确，可用于该品种的质量控制。

[1]Mcintyre JA，Castaner J，Bayes M.Dasatinib：treatment of leukemia treatment of solid tumors Bcr-Abl and Src kinase inhibi⁃tor[J].Drugs of the Future，2006，31（4）：291.

[2]徐漫漫，李俊东，肖娟，等.达沙替尼联合卡铂对卵巢癌细胞株OVCAR3抑制作用的研究〔J〕.药物研究，2012，07-0061-02.