高盐饮食对大鼠高血压肾病进展的影响

庞磊+姚春颖+林玲

【关键词】高盐饮食；大鼠；高血压肾病

【中图分类号】R541 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-6681.2016.21.0.02

原发性高血压（primary hypertension）是一种发病率很高的心血管疾病，主要以以体循环动脉压升高为临床表现，是最常见的慢性病，约占成人的10～20%，据调查我国成年人高血压患病率高达18.8%，全国高血压患者约有1.6亿。高血压与其他心血管疾病危险因素共存，对循环系统正常功能构成威胁，可以损伤心、脑、肾等重要脏器的结构和功能，最终导致这些器官的功能衰竭。高血压肾病（Hypertensive nephropathy）是其主要并发症及致死因素之一。高血压持续5～10年后，肾小球囊内压力明显升高，肾小球纤维化、萎缩，肾脏动脉硬化，导致肾实质缺血和肾单位不断减少，而肾单位是不可新生的，最终导致肾脏的不可逆损伤，慢性肾衰竭是长期高血压的严重后果之一。高血压病是多种因素共同作用的结果，包括遗传因素、环境因素、饮食、生活习惯等因素，其中盐的摄入在相关文献中显示对高血压的影响作用明显，盐的摄入在高血压的形成中起着关键的作用[1]。在低钠盐摄入人群中，平均血压也较低，高血压患病率也相对较低；相反的，在高钠盐摄入人群中，血压值平均水平较高。本实验的研究内容是观察自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）在长期高盐饮食条件下血压（收缩压SBP、舒张压DBP）、尿微量白蛋白蛋白（m-ABL）及血肌酐（SCr）变化，推测高盐饮食对大鼠高血压肾病发展的影响及可能机制，为高血液肾病的防治提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取20周龄SHR大鼠30只作为研究对象，雄性，体重280～340 g，同周龄WKY大鼠15只，体重330～390 g（北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号SCXK（京）2012-0001，合格证编号11400700021752），动物常规饲养，保持室温20～25℃，12 h光照（8：00～20：00），12 h黑暗，交替進行，适当通风，确保室内空气洁净，适应性喂养1周后，称量大鼠体重并记录。动物分组：SHR大鼠随机分为两组，每组15只，H组：高盐饮食组，给予8% NaCl 高盐饲料；L组：低盐饮食组，给予0.4% NaCl 普通低盐饲料；C组：WKY大鼠为正常对照组，给予普通饲料。各组大鼠自由饮水。

1.2 方法

1.2.1 主要仪器及试剂

动物血压计（北京软隆生物技术有限公司，BP-2010 Serise），低温高速离心机（SIGMA 2-16K），全自动生化分析仪（贝克曼库尔特AU5800），不同规格的饲料（0.4% NaCl 普通低盐饲料，8% NaCl 高盐饲料）购自北京科澳协力饲料有限公司。

1.2.2 大鼠尾动脉血压测量

分组后，大鼠标号，测量大鼠体重及尾动脉血压，利用动物血压计无创测量大鼠尾动脉收缩压（SBP）及舒张压（DBP），预热温度37℃，预热15 min，将加压鼠套套入大鼠尾根部，静置2 min，待大鼠脉搏稳定后测量血压。测量进行1次/周，上午8：00开始测量，大鼠测量2次/只，取平均值，单位mmHg，连续测量10周，并记录测量时间及结果。

1.2.3 大鼠尿微量蛋白

大鼠分别置入代谢笼，每鼠1笼，收集大鼠分组后正常饮食24 h尿液，记录尿量，期间禁食不禁水，收集24 h尿液，低温高速离心机离心后留取无残渣尿液分装，低温保存送检。大鼠24 h尿液收集1次/周，离心后送检并记录数据，连续10周。

1.2.4 大鼠血肌酐测量

大鼠分组后，各组大鼠分别采用眶后静脉丛采血法采集血液，将大鼠乙醚麻醉后，分别用毛细玻璃管经眶后静脉丛采集血液，低温高速离心机离心后分装血清，低温保存送检。大鼠血液采集1次/周，离心后送检并记录数据，连续10周。

1.3 统计学方法

应用SPSS 13.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以“x±s”表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 8% NaCl 高盐饮食与0.4% NaCl 普通低盐饮食对大鼠血压的影响

大鼠以SBP ≧150 mmHg和（或）DBP ≧100 mmHg为标准诊断为高血压，对照组大鼠舒张压无明显变化，高盐组大鼠血压自实验第二周开始增高且持续至实验结束，高盐组舒张压较低盐组增高明显，差异有统计学意义（P<0.05）。见图1。

对照组大鼠收缩压无明显变化，高盐组大鼠血压自实验第二周开始增高且持续至实验结束，高盐组收缩压较低盐组增高明显，差异有统计学意义（P<0.05）。见图2。

2.2 8% NaCl 高盐饮食与0.4% NaCl 普通低盐饮食对大鼠尿微量白蛋白的影响

对照组尿微量白蛋白升高不明显，高盐组尿微量白蛋白较低盐组升高显著，差异有统计学意义（P<0.05）。见图3。

2.3 8% NaCl 高盐饮食与0.4% NaCl 普通低盐饮食对大鼠血肌酐的影响

对照组血肌酐升高不明显，高盐组血肌酐较低盐组升高显著，差异有统计学意义（P<0.05）。见图4。

3 讨 论

肾脏是机体主要的排泄器官，利用尿的生成与排出讲体内代谢产物及多余物质排出体外，从而调节机体酸碱平衡，维持内环境的稳态。肾脏还是参与机体血压调控、参与循环系统功能调节的重要器官，同时肾脏也是高血压损害的主要靶器官。据流行病学数据显示[2]，盐是高血压病的进展中的重要影响因素，盐的摄入量与高血压发展呈正相关。钠盐摄入量相对较高的个体对高血压病进展影响的诱因主要有两个方面：一方面，肾脏水钠储留，引起血浆容量显著增加，造成肾脏自身调节功能紊乱，引起血压升高；另一方面，使强心甾类物质（又称为洋地黄类物质）增加，使钠钾泵的活性收到抑制，从而细胞内钠离子浓度增加，继而激活钠钙交换体，使细胞内钙离子浓度增加，从而刺激血管平滑肌或心肌使之收缩，最终引起高血压[3]。有研究表明长期钠盐摄入过多[4]从以下方面影响肾脏的结构及功能：①肾小球前血管阻力的增加；②肾脏滤过率的降低；③肾小管钠重吸收的增加。根据大量文献记载，尿微量白蛋白、尿蛋白和血肌酐的值是肾损伤的早期敏感指标，这些重要指标反映了肾小球的滤过能力和肾小管的重吸收作用，能从尿微量白蛋白、尿蛋白和血肌酐等指标中直观的了解肾脏的重吸收功能是否正常。有研究表明长期高盐饮食大鼠的肾小球明显萎缩，肾小囊腔增大，肾小管扩张，镜下检查，可以在肾髓质见到大量透明管型，这就表明长期持续的高盐饮食对肾脏造成了一定程度的损伤作用，Habibi 研究发现盐负荷会导致大鼠肾损伤甚至肾的纤维化[5]，有文献记载，长期持续的高血压[6]使肾小球囊内压力显著升高，尿蛋白增多，出现白蛋白尿，最终导致肾脏的不可逆损伤，出现慢性肾功能衰竭。本研究检测高低盐饮食对SHR大鼠收缩压、舒张压、尿微量白蛋白、血肌酐的影响，进一步验证了长期高血压且持续高盐饮食对肾脏滤过功能严重影响[7]。结合实验结果及文献分析，高盐饮食对高血压病靶器官的损害严重，对高血压病的发生发展也起到重要作用，因此对高血压病人血压及盐的摄入量的控制对于防止肾脏损害等并发症的发生与预防有非常重要的作用。

结合本实验研究结果及相关文献，得出结论，长期持续的高盐饮食使尿微量白蛋白、尿蛋白、血肌酐等高血压肾病相关指标显著增高，证明了高盐摄入对高血压肾病的发展有一定的促进作用，所以对高血压患者在控制血压之余再限制钠盐的摄入量是必要的。

参考文献

[1] Bi Z， Liang X， Xu A， et al. Hypertension Prevalence，Awareness， Treatment， and Control and Sodium Intake in Shandong Province，China： Baseline Results From Shandong-Ministry of Health Action on Salt Reduction and Hypertension （SMASH）， 2011[J]. Prev Chronic Dis， 2014，11：E88.

[2] Donghai Y， .Arndt P， Uta K， et al. Urinary podocyte loss is a more specific marker of ongoing glomerular damage than proteinuria. J Am Soc Nephrol 1b：1733-1741.

[3] Weinberger MH. Sodium and blood pressure 2003 [J]. Curr Opin Cardiol，2004，19：353-356.

[4] Iwamoto T，Kita S，Katsuragi T. Salt-sensitive hypertension， Na + / Ca2 + exchanger，and vascular smooth muscle[J]. Trends Cardiovasc Med，2005，15（8）：273-277.

[5] Daisuke Nakano，Hiroyuki Kobori，James L. Burford.Multiphoton Imaging of the Glomerular Permeability of Angiotensinogen. JOURNAL OF THE AMERICAN SOCIETY OF NEPHROLOGY.2012，5（4）：564.

[6] Habibi J，Hayden M R，Ferrario C M， et al. Salt Loading Promotes Kidney Injury via Fibrosis in Young Female Ren2 Rats[J]. Cardiorenal Med，2014，4（1）：43-52.

[7] 朱國献，谭毅华，李 涛.HIF-1α及VEGF基因促进大鼠缺血组织血管新生的实验研究[J].深圳中西医结合杂志，2016，5（18）：545.