右美托咪定对糖尿病大鼠体液免疫及补体的影响

童希忠 陈 勇 郎海丽 胡小兰 余树春 胡衍辉 徐国海

(南昌大学第二附属医院麻醉科，江西 南昌 330006)

右美托咪定对糖尿病大鼠体液免疫及补体的影响

童希忠1陈 勇 郎海丽 胡小兰 余树春 胡衍辉 徐国海

(南昌大学第二附属医院麻醉科，江西 南昌 330006)

目的 评价右美托咪定对糖尿病大鼠体液免疫及补体的影响。方法 健康成年雄性SD大鼠72只，体重300～350 g，采用随机数字表法，将其随机分为3组(n=24)：对照组(C组)、糖尿病组(DM组)和右美托咪定+糖尿病组(DEX组)。DM组和DEX组以链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg一次性腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，于模型稳定后4 w时3组大鼠均实施剖腹探查术，手术时间30 min。DEX组于手术开始前经10 min静脉输注右美托咪定负荷剂量1 μg/kg，随后以5 μg·kg-1·h-1(容量1 ml/h)的速率维持4 h，C组和DM组给予等容量生理盐水。分别于术前(T0)、术毕(T1)、术后24 h(T2)和72 h(T3)时每组随机取6只大鼠采集血样，测定血糖，并采用ELISA法检测血清IgG、IgA及IgM和补体CH50、C3及C4浓度；分别于T0～T3时采血结束后处死大鼠，处死前称重，解剖分离脾脏组织称重，计算脾脏指数。结果 与C组比较，DM组和DEX组T0～T3时血清IgG、IgM浓度及脾脏指数降低，IgA、CH50、C3及C4浓度升高(P<0.05)；与DM组比较，DEX组T1～T3时血清IgG、IgM浓度及脾脏指数升高，IgA、CH50、C3及C4浓度降低(P<0.05)。结论 右美托咪定可改善糖尿病大鼠围术期体液免疫及补体功能。

右美托咪定；糖尿病；免疫球蛋白；补体

糖尿病(DM)是一种以血糖升高为特征的常见慢性病〔1〕，研究表明，DM患者易出现多种免疫功能的异常，手术创伤、麻醉以及术后疼痛等均可抑制DM患者围术期机体免疫功能，增加患者术后感染及其他并发症发生的可能〔2，3〕，因此，有效地防治DM患者围术期免疫功能抑制对于促进其预后具有重要意义。右美托咪定是一种高效高选择性作用于外周和中枢α2肾上腺素能受体激动剂，具有镇静、镇痛、抗焦虑和抗交感等多种效应，且无呼吸抑制作用，主要用于ICU患者的镇静以及麻醉时的辅助镇静〔4〕。研究发现，右美托咪定可改善肿瘤患者围术期细胞免疫功能〔5〕，减轻DM患者围术期糖代谢紊乱〔6〕，但其对DM患者围术期体液免疫功能及补体功能的影响尚未见报道。因此，本研究拟评价右美托咪定对DM大鼠围术期体液免疫及补体的影响。

1 材料与方法

1.1 动物及分组 健康成年雄性SD大鼠72只(南昌大学实验动物科学部提供)，体重300～350 g，采用随机数字表法，将其随机分为3组(n=24)：对照组(C组)、糖尿病组(DM组)和右美托咪定+糖尿病组(DEX组)。

1.2 DM模型制备 DM组和DEX组参照文献〔7〕介绍的方法建立大鼠DM模型，一次性腹腔注射1%链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液60 mg/kg，2 d后经尾静脉抽血测空腹血糖(FPG)，≥16.7 mmol/L，并出现多饮、多食、多尿等症状即为大鼠模型制备成功。

1.3 实验方法 DM模型稳定后4 w时三组大鼠均实施剖腹探查术，腹腔注射戊巴比妥钠40 mg/kg麻醉下，于腹部正中切口开腹，行剖腹探查术，维持手术时间30 min。术毕伤口涂抹青霉素粉末预防感染，缝合切口。大鼠苏醒后单独饲养。DEX组于手术开始前经10 min静脉输注右美托咪定负荷剂量1 μg/kg，随后以5 μg·kg-1·h-1(容量1 ml/h)的速率维持4 h，C组和DM组给予等容量生理盐水。

1.4 观察指标 分别于术前(T0)、术毕(T1)、术后24 h(T2)、72 h(T3)时每组随机取6只大鼠采集血样，测定血糖，并采用ELISA法检测血清IgG、IgA及IgM和补体CH50、C3及C4浓度；分别于T0～T3时采血结束后处死大鼠，处死前称重，解剖分离脾脏组织称重，计算脾脏指数。

1.5 统计学方法 采用SPSS19.0软件进行单因素方差分析及LSD-t检验。

2 结 果

2.1 各组大鼠FPG水平比较 与C组比较，DM组和DEX组T0～T3时FPG升高(P<0.05)；与D组比较，DEX组T1～T3时FPG下降(P<0.05)，T0时无统计学差异(P>0.05)，见表1。

表1 三组大鼠围术期FPG水平比较

与C组比较：1)P<0.05；与DM组比较：2)P<0.05，下表同

2.2 各组大鼠体液免疫及补体变化 与C组比较，DM组和DEX组T0～T3时血清IgG、IgM浓度及脾脏指数降低，IgA、CH50、C3及C4浓度升高(P<0.05)；与DM组比较，DEX组T1～T3时血清IgG、IgM浓度及脾脏指数升高，IgA、CH50、C3及C4浓度降低(P<0.05)，见表2。

表2 三组大鼠围术期体液免疫、补体及脾脏 指数比较

3 讨 论

体液免疫中的抗体IgG、IgA和IgM是机体抗感染的重要组成部分，由浆细胞合成和分泌，存在于机体的血液、体液、外分泌液及部分细胞的细胞膜上，是反映机体体液免疫状态的关键指标〔7〕。研究证实，DM患者免疫球蛋白含量的改变与DM的发生发展程度密切关联，也与机体免疫功能及DM并发症的发生密切相关〔8〕。本研究结果表明，DM大鼠自身体液免疫功能下降，手术创伤后体液免疫功能进一步下降，而右美托咪定可改善DM大鼠围术期体液免疫功能。

补体系统作为炎性反应的重要组成部分日益受到重视，是由多种糖蛋白组成的蛋白酶解系统，在机体抗感染、免疫调节和免疫监视中发挥重要作用，特定情况下也可导致组织损伤。在临床上同时测定总补体活性(CH50)及补体成分C3及C4可以反映补体功能〔9〕。补体成分广泛沉积于DM患者的血管病变组织中，其水平的高低与组织病变的严重程度相关〔10〕，提示补体活化参与DM血管病变的发生。另有研究发现，2型糖尿病患者和糖耐量减低者补体C3水平升高〔11〕。本研究结果表明，DM可诱发大鼠补体功能异常，右美托咪定可有效抑制DM大鼠血清补体CH50、C3及C4水平的升高，从而改善DM大鼠围术期补体功能。付作文等〔12〕研究发现，右美托咪定可有效抑制患者围术期血清C3、C4的升高，与本研究结果一致。

脾脏指数是脾脏免疫功能的主要指标，其数值高低的变化在一定程度上可反映机体的免疫调节功能作用。本研究结果表明，右美托咪定可改善DM大鼠脾脏功能，提高大鼠体液免疫功能。免疫力下降是DM的显著特征，然而，导致机体免疫功能改变的机制尚不清楚，有学者认为是由于高血糖所致〔13〕。高血糖可导致红细胞膜代谢改变，影响红细胞的免疫功能；体内蛋白质的糖基化可导致免疫球蛋白功能低下；高血糖还可延缓淋巴细胞分裂。本研究结果提示右美托咪定可降低DM大鼠围术期血糖水平。高项羽等〔6〕的研究与本研究结果一致，其发现右美托咪定可抑制DM患者术中应激反应，改善围术期糖代谢紊乱，促进DM患者术后恢复。

1 徐 键，李树云，瞿 秋，等.慢性阻塞性肺疾病合并2型糖尿病患者肺功能的改变〔J〕.中国老年学杂志，2013；33(6)：1432-3.

2 Meretskyǐ VM.The humoral immunity changes in experimental cranio-cerebral trauma，concurrent with diabetes mellitus〔J〕.Klin Khir，2013；(5)：80-2.

3 Takeda Y，Shimomura T，Wakabayashi I.Immunological disorders of diabetes mellitus in experimental rat models〔J〕.Nihon Eiseigaku Zasshi，2014；69(3)：166-7.

4 Gerlach AT，Murphy CV，Dasta JF.An updated focused review of dexmedetomidine in adults〔J〕.Ann Pharmacother，2009；43(12)：2064-74.

5 梁 桦，刘洪珍，王汉兵，等.右美托咪定对结肠癌根治术病人围术期细胞免疫功能和血循环微转移的影响〔J〕.中华麻醉学杂志，2012；32(10)：1165-8.

6 高项羽，李 姗，吕志峰.右美托咪定对糖尿病患者围术期糖代谢的影响〔J〕.河南外科学杂志，2013；19(4)：76-7.

7 陈慰峰.医学免疫学〔M〕.北京：人民卫生出版社，2002：23.

8 Thumser AE，Moore JB，Plant NJ.Fatty acid binding proteins：tissue-specific functions in health and disease〔J〕.Curr Opin Clin Nutr Metab Care，2014；17(2)：124-9.

9 Uesugi N，Sakata N，Nangaku M，etal.Possible mechanism for medial smooth muscle cell injury in diabetic nephropathy：glycoxidation mediated local complement activation〔J〕.Am J Kidney Dis，2004；44(2)：224-38.

10 Nie F，Su D，Shi Y，etal.A preliminary study on the role of the complement regulatory protein，cluster of differentiation 55，in mice with diabetic neuropathic pain〔J〕.Mol Med Rep，2015；11(3)：2076-82.

11 Hess K，Alzahrani SH，Price JF，etal.Hypofibrinolysis in type 2 diabetes：the role of the inflammatory pathway and complement C3〔J〕.Diabetologia，2014；57(8)：1737-41.

12 付作文，程朝晖，谭海燕.右美托咪定对脑肿瘤切除术患者血清补体C3、C4水平的影响〔J〕.实用医学杂志，2013；29(8)：1341-2.

13 张 宏，于德民，陈 樱，等.2型糖尿病患者免疫功能变化与血糖和胰岛素水平相关性的研究〔J〕.免疫检验和临床医学杂志，2002；9(2)：90.

〔2015-09-12修回〕

(编辑 苑云杰/曹梦园)

江西省卫计委科技计划项目(20175208)

陈 勇(1986-)，男，硕士，主治医师，主要从事临床麻醉学研究。

童希忠(1971-)，男，硕士，主治医师，主要从事临床麻醉学研究。

R392

A

1005-9202(2017)03-0564-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.03.017

1 江西省玉山县妇幼保健院