一例育肥猪圆环病毒Ⅱ型、猪蓝耳病病毒、弓形虫混合感染的诊断报告

赵建东，项朝荣，王 路，李春贤

（济源市动物疫病预防控制中心，河南 济源 459000）

1 基本情况

畜主左某从业时间半年，缺乏动物疫病防控意识和能力；2月前陆续从外地购入生猪480头左右，猪场为以前使用过的旧猪场，猪购入前没有对猪场、猪舍进行彻底消毒；猪场生物安全条件较差，缺乏必要的生物安全设施和制度，野犬和野猫可以随意出入猪舍。免疫情况没有记录，畜主称免疫过猪瘟、口蹄疫各1次，具体免疫时间、疫苗种类、免疫剂量不清；2017年8月13日开始发现部分生猪出现体温升高（41℃以上）、精神不振、咳嗽、呼吸困难等症状，使用氟苯尼考、替米考星、清瘟败毒散等药物治疗，并紧急接种伪狂犬病疫苗，治疗效果均不理想，8月15日至8月18日死亡育肥中后期生猪52头，诊断期间又有127头育肥猪死亡。

2 临床症状

该场所有育肥猪群共分为2批，一批平均体质量70kg（大育肥）左右，共175头，另一批平均体质量30kg左右（小育肥）共305头。体质量70kg发病率60%以上，病死率50%左右。患猪精神沉郁、显著衰弱，体温升高至41℃，稽留不退；耳翼、鼻端、下肢、股内侧、下腹等处出现紫红斑或小点出血，耳外壳有突出皮肤的绿豆到黄豆丘疹，耳变厚、变硬；病猪呈腹式或犬坐式呼吸，呼吸急促、声音粗粝；流清水样或白色泡沫状鼻涕；眼内出现浆液性或脓性分泌物、部分从眼睫毛中出现血样分泌物造成眼睑粘连、眼圈发青；大部分病猪出现便秘，呈粒状粪便，外附黏液，有的病猪拉黏液性血便；尿呈橘黄色；少数发生呕吐；个别后肢麻痹；个别病猪眼球肿胀、失明；绝大多数病猪因呼吸极度困难窒息而死。

3 剖检病变

剖检病死猪4头，腹下、臀部皮肤发红，有出血斑点；肺脏肿大，小叶间质增宽，其内充满半透明胶胨样渗出物、出血、肝变、气肿，其中1头猪纤维素性渗出严重，与胸腔粘连；气管充满白色泡沫、支气管内有胶样渗出物；脾脏肿大2～3倍、颜色棕黑色；腹股沟淋巴结和肠系膜淋巴结明显肿大、切面多汁；扁桃体有坏死、溃疡；胃有陈旧性出血点及溃疡；其中2头猪小肠多处溃疡，另2头猪结肠出血明显；肝脏有芝麻到绿豆大白色坏死灶；其中1头猪胆囊内充满血性渗出物，另1头猪胆汁浓稠、黄褐色，内壁有溃疡、假膜，其余2头猪未见异常；肾皮质有小米大白色坏死；膀胱黏膜有少量点状出血。

4 实验室检测情况

4.1 荧光定量PCR检测结果

取脾脏、淋巴结、扁桃体、肺脏、肠黏膜等组织病料，进行高致病性猪蓝耳病病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、圆环病毒2型、猪蓝耳病病毒欧洲株、猪蓝耳病病毒NADC-30株、弓形虫荧光PCR检测，结果显示弓形虫核酸强阳性，平均CT值16；圆环病毒2型核酸强阳性，平均CT值17；蓝耳病病毒NADC-30株核酸弱阳性，平均CT值35；其余均为阴性。

4.2 显微镜检查结果

取肺、肝、淋巴结做涂片，用姬氏液染色后检查发现大量蓝色香蕉状的速殖子。

4.3 动物接种试验

取肝、脾脏、淋巴结研碎后加10倍生理盐水，加双抗后置室温下1h。接种前摇匀，待较大组织沉淀后，取上清液接种小鼠腹腔，每只接种0.5～1ml。经1～3w小鼠发病时，可在腹腔中查到虫体。

4.4 细菌培养结果

无菌取脾脏、心血分别接种于普通琼脂、肉汤（TSB+1ml0.1g/100mlNAD+胎牛血清）培养基中，37℃，24h均无细菌生长。

5 诊断结论及治疗情况

5.1 诊断结论

根据发病状况、临床症状、剖检病变结合实验室检测结果，诊断为圆环病毒、蓝耳病毒NADC-30、弓形虫三重混合感染。

5.2 治疗情况

对发病猪进行隔离治疗，使用磺胺六甲氧嘧啶，肌肉注射，按照60～80mg/kg体质量，首次倍量，连用5d。

使用高效消毒液二氧化氯每天对猪场进行消毒；对病死猪集中无害化处理；采取措施防止野犬和野猫进入猪场。

采取上述治疗方案后，病情严重的猪又陆续死亡32头，其余全部康复。

6 讨论

6.1 防病常识缺乏

此次发生的混合感染造成了惨重损失，病程15d，共死亡育肥中后期生猪211头，经济损失超过25万元。主要原因是畜主缺乏防病常识，生物安全防护意识淡薄，对使用过的老猪舍没有在引入生猪前进行彻底消毒，对弓形虫传播的主要终末宿主犬猫缺乏有效控制措施；对动物疫病发生发展规律不了解，早期发现病猪没有引起足够警惕，导致感染扩散，同时早期反应迟钝，没有及时诊断和采取控制措施错过了最佳治疗时机。

6.2 三病混合感染损失更大

单纯的猪圆环病毒感染、猪蓝耳病一般不会引起育肥期生猪出现大批死亡；而猪弓形虫病根据全国各地报道，发病率和病死率均很高，发病率最高60%，病死率最高64%。此次疫情发病率60%左右，与弓形虫病相关报道基本一致，但病死率高达70%，这与畜主贻误治疗时机有关，可能也与猪群本身感染圆环病毒和蓝耳病造成免疫系统破坏有关，尤其是圆环病毒Ⅱ型荧光PCR检测强阳性，其对生猪的免疫抑制作用应引起同行高度重视。

这是首次在济源市生猪病料中检出猪蓝耳病ADC-30株，该毒株据报道毒力与高致病性猪蓝耳病JXA-1株相当，在此次疫情中起到的作用有待进一步研究。