过氧化物酶-1在肝癌中的表达及其临床意义

晏燕(信阳市中心医院 检验科 河南 信阳 464000)

过氧化物酶-1在肝癌中的表达及其临床意义

晏燕
(信阳市中心医院 检验科 河南 信阳 464000)

目的 分析过氧化物酶-1(Prx-1)在肝癌中的表达及其临床意义。方法 选取信阳市中心医院2015年1～12月期间收治的98例肝癌患者，应用免疫组织化学方法分析Prx-1在患者癌旁组织及肝癌组织中的表达，并对血清Prx-1水平采用ELISA(酶联免疫吸附法)进行检测。结果 患者肝癌组织Prx-1阳性率为75.5%，明显高于癌旁组织的36.7%(P<0.05)；经ELISA 结果显示，肝癌患者血清Prx-1水平明显高于正常患者，且患者肝癌分期越严重血清Prx-1水平越高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Prx-1 表达水平在肝癌患者中明显升高，与肝癌进展以及肿瘤的生成存在密切联系，可作为肝癌早期的诊断及预后的标记物。

过氧化物酶-1；肝癌；表达

原发性肝癌是临床最为常见的恶性肿瘤之一，其早期症状隐匿，难以及时诊断且易出现转移，多数就诊时已属于中晚期[1]。因此，寻找肝癌临床愈后及早期诊断的标记物，对于患者的治疗具有积极意义。有研究显示[2]，Prx-1在肝癌中表达上调，但其对于肝癌的临床意义尚不明确。对此，本研究应用免疫组织化学法分析Prx-1在肝癌中的表达及其临床意义，以为临床提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取信阳市中心医院2015年1～12月期间收治的98例肝癌患者，男50例，女48例，年龄为30～64岁，平均(48.3±2.2)岁，其中年龄<60岁56例，≥60岁42例；肿块直径≥2 cm 42例，<2 cm 56例；TNM分期：有62例Ⅰ、Ⅱ期，36例Ⅲ、Ⅳ期；有淋巴结转移58例，无转移40例。患者均经病理确诊，且术前未行化学药物及放射治疗。

1.2 治疗方法 切取正常组织、癌旁组织、癌组织，采用免疫组织化学法对癌旁组织及肝癌中Prx-1进行分析。将三种组织固定于福尔马林中24 h，脱水包埋，后制成切片，逐级脱腊至水，PBS(磷酸盐缓冲溶液)振洗3 min×3(下同)；为防止非特异性染色，以3%过氧化氢封闭30 min，振洗；为将抗体充分暴露，以尿素(3 mol/L)消化30 min，后以柠檬酸修复，振洗；滤纸擦干后置于湿盒，正常血清37 ℃封闭30 min，滴加一抗(3 μg/ml)，后将切片放入4 ℃冰箱过夜；次日37 ℃复温30 min后振洗；后依次滴加二抗、ABC(亲和素-生物素-过氧化物酶复合物)，分别于湿盒内37 ℃孵育30 min后振洗；以DAB(二氨基联苯胺)显色20 min，以清水冲洗切片，用苏木素将切片淡染，后脱水、透明、封片。并对血清中Prx-1水平用ELISA进行检测，试剂盒为美国R&D公司生产，操作同说明书。

1.3 观察指标 对阳性结果采用双盲法进行观察，每张切片均于光镜下选取5个癌细胞较多的视野(200×)，各计数100个细胞。细胞核无着色或呈现棕黄至棕黑色细胞个数≤10%为阴性(-)，>10%为阳性(+)。

2 结果

2.1 肝癌组织中的Prx-1表达 患者肝癌组织Prx-1阳性率明显高于癌旁组织(P<0.05)。见表1。

2.2 Prx-1在肝癌患者血清中的水平 Ⅰ、Ⅱ期肝癌患者血清Prx-1水平为(28.3±4.5)ng/ml，Ⅲ、Ⅳ期患者水平为(38.6±3.8)ng/ml，高于正常患者血清Prx-1水平[(13.2±11.9)ng/ml]，且患者肝癌分期越严重血清Prx-1水平越高，差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 不同组织中Prx-1的表达情况比较(n，%)

注：与癌旁组织比较，aP<0.05。

3 讨论

Prx-1可参与多种生物功能的调节，其在胃癌、肺癌、宫颈癌及结肠癌等多种肿瘤中均异常高表达。肺癌及宫颈癌的研究证实，血清Prx-1水平在肿瘤诊断中具有明显的诊断价值，且其与CA125合用有助于提高临床诊断宫颈癌的效能[3]。

本研究显示，与癌旁组织比较，Prx-1在肝癌组织中表达明显偏高，且与正常患者血清Prx-1水平比较，肝癌患者血清过氧化物酶-1水平明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)，这与林新峰等[4]研究结果基本相一致，提示在肝癌的早期诊断中血清Prx-1可成为其有效的标记物，具有一定的诊断价值。临床研究显示，Prx-1在肿瘤的发生、发展中具有十分重要的作用，而肝癌的迅速发展与加强细胞外基质降解的独特肿瘤微环境因素存在着密切关系[5]。此外，不同成分的肿瘤微环境对于上皮间质转化也提供了稳定的条件，提示在肝癌进展中Prx-1可能介导肝癌中上皮间质转化表型转化过程，可能是肿瘤微环境的重要成分之一。Prx-1参与上皮间质转化的调节机制，而对于肿瘤微环境中Prx-1的特异作用尚需进行更加深入的研究。

综上，在肝癌患者及肝癌组织血清中Prx-1表达升高，其与肝癌进展以及肿瘤的生成存在密切联系，对于肝癌的早期诊断和预后具有提示作用。

[1] 刘丽雅，洪清楚，张军能.肝病诊断中腺苷脱氨酶检测的临床价值分析[J].中国医药指南，2014，12(30)：236-237.

[2] 梁马可，李仁锋，夏晓博，等.CDC25C蛋白和CLDN6蛋白在肝细胞癌中的表达及临床意义[J].河南医学研究，2013，22(6)：807-811.

[3] 涂青松，何剪太.肝癌中过氧化物酶-1的表达及临床意义[J].中国现代医学杂志，2015，25(33)：8-14.

[4] 林新峰，朱华，周妮娜，等.过氧化物还原酶Ⅰ与肿瘤关系的研究进展及其在核医学中的应用[J].癌症进展，2013，11(5)：449-455.

[5] 纪相芬，王凯.谷胱甘肽过氧化物酶和硫氧还蛋白还原酶与肝癌发病关系的研究[J].中华肝脏病杂志，2014，22(8)：639-640.

R 735.7

10.3969/j.issn.1004-437X.2017.01.011

2016-05-10)