狗獾油安全性评价
2017-02-15代长林孙红瑜刘朝阳代依脉
代长林 孙红瑜 刘朝阳 代依脉
(1.黑龙江省脉动獾子食品技术开发有限公司,哈尔滨150001;2.黑龙江省野生动物研究所,哈尔滨150081)
狗獾油安全性评价
代长林1孙红瑜2刘朝阳1代依脉1
(1.黑龙江省脉动獾子食品技术开发有限公司,哈尔滨150001;2.黑龙江省野生动物研究所,哈尔滨150081)
对饶河脉动珍稀动物繁育有限公司提供的狗獾油进行急性毒性和长期毒理试验验证,狗獾油原液对小鼠和大鼠的体重、进食量、脏器系数以及血液学指标均无明显影响,说明狗獾油安全无毒性。
狗獾油;毒理;安全性
狗獾油[1]是食肉目鼬科动物狗獾(Meles meles)的脂肪经熬制而成,也称獾子油。獾子油含有人体必需的多种脂肪酸和不饱和脂肪酸[2],渗透性好,具有清热解毒、消肿止痛、润燥生肌之功效,主治[3]烧烫伤、痔疮、秃疮、中气不足、胃溃疡等症,同时也是一种极佳的营养保健品。本研究以小鼠和大鼠为试验对象,通过急性毒性和长期毒性[4]试验对獾子油的安全性进行评价,以期为獾子油开发为保健食品提供科学依据。
1 试验材料与方法
1.1 试验材料
昆明系健康小鼠60只,体重18~22 g,雌雄各半;健康Wistar大鼠40只,雌雄各半,5周龄,体重105~110 g,均由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心提供。机制鼠块料购于哈尔滨汉方实验动物养殖场。
狗獾油由黑龙江省饶河脉动珍稀动物繁育有限公司提供。
1.2 试验方法
1.2.1 急性毒性试验
将40只小鼠(雌雄各半)进行常规饲养观察5天,试验前小鼠禁食12 h,不禁水,实验室温度20~25℃。将小鼠随机分为4组,每组10只。各组给药(獾子油原液)剂量分别为:40 mL/kg体重、4 mL/kg体重、0.4 mL/kg体重、0.04 mL/kg体重,采用一次性灌胃给药的方法进行灌胃,找出0%和100%死亡的剂量范围,或100%死亡剂量,然后进行正式试验。如果在最大给药浓度及最大灌胃体积(40 mL/kg体重)下无法找出小鼠100%死亡的剂量或0%和100%死亡的剂量范围时,则进行一日内最大耐受量测定。
一日内最大耐受量测定:取健康小鼠20只,采用与临床一致的给药途径,以小鼠能耐受的最大浓度(40 mL/kg体重)连续给药3次/日,中间间隔时间为5 h,计算一日内总给药量与人临床用量的倍数,连续观察7天。
1.2.2 长期毒性试验
将40只大鼠进行常规饲养5天后,开始正式试验。根据急性毒性试验结果将大鼠随机分为4组:狗獾油高剂量组(40 mL/kg)、中剂量组(4 mL/kg)、低剂量组(0.4 mL/kg)和空白对照组,每组10只大鼠,雌雄各半,每日进行灌胃给药;空白对照组每日按10 mL/kg体重的容积给予灌胃生理盐水1次,连续给药12周。每周称量1次体重并记录摄食量。
试验期间观察大鼠的一般状态,如外观体征、行为、活动、饮食、分泌物、粪便等。
最后一次给药后,对试验大鼠采血,做血常规检查,分离血清做血液生化检查。之后处死大鼠,取其心、肝、脾、肺、肾、胸腺等主要脏器,称其湿重,计算脏器系数。
2 结果与分析
2.1 急性毒性试验
急性毒性试验中,以最大浓度及最大灌胃体积进行灌胃试验后小鼠全部成活,未能找出100%死亡剂量,故因未能测出LD50,因此进行一日内最大耐受量测定。
24h内以小鼠能耐受的最大浓度连续3次灌胃后观察,小鼠自发活动稍有减少,对外界反应稍见冷漠,但30 min内便陆续恢复正常,个别小鼠肛门周围有稀便。7天内动物在自发活动、外观、对外界反应、肤色、分泌物、眼、呼吸、食欲、肌肉运动等方面均未观察到异常变化,且无小鼠死亡,仅有个别小鼠肛门周围有稀便残留。经计算,在24 h内小鼠累计给药量为120 mL/kg(40 mL/kg×3),以人(60 kg体重)每日临床合理服用量为40 mL推算,小鼠的服用量相当于人用量的180倍,即倍数=(120 mL/kg)/(40 mL/60 kg)=180倍
2.2 长期毒性试验
2.2.1 一般形态
在试验期间,各剂量组大鼠的全身状况良好,活动正常,无口鼻出血情况和其他异常行为,生长发育良好。而且被毛平顺,眼睛有神,反应正常,呼吸平稳,进食饮水正常,大、小便无异常改变。表明獾子油对各试验组大鼠的一般形态无明显影响。
2.2.2 对体重和进食量的影响
各剂量组和空白对照组大鼠体重均随试验期间周龄的增加而增加,生长发育情况良好,各剂量组进食量无明显变化。
2.2.3 对脏器系数的影响
獾子油连续灌胃给药12周后,各剂量组大鼠的脏器指数与空白对照组无显著性差异(P>0.05)(表1)。
表1 给药12周后大鼠脏器指数
2.2.4 对大鼠血液学指标的影响
用全自动血细胞分析仪进行血液学检测,检测项目有:白细胞(WBC)、淋巴细胞数(LYM)、单核细胞(MON)、中性粒细胞数目(GRAN)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、血小板数(PLT)、血小板平均体积(MPV),检测结果(表2)表明,连续灌胃给药12周,各剂量组大鼠的血液学指标与对照组比较差异无显著性变化。
表2 獾子油给药12周对大鼠血液学指标的影响
3 结论
本试验利用狗獾油原液进行了急性毒性和长期毒性试验,其中急性毒性试验未能测出獾子油的半致死量LD50,当小鼠一日内灌胃量达120 mL/kg时,相当于人用量的180倍,7天内小鼠无死亡,形态未见异常变化。各剂量组给药12周后,大鼠一般形态、体重和进食量、脏器系数以及血液学指标无明显变化,证明其安全无毒性。
[1]高耀亭等.中国动物志兽纲[M].北京:科学出版社,1987.
[2]施银,陈若晞.冬眠期狗獾油脂肪酸组成分析及安全性动物试验[J].中国油脂,2015,40(5):95-40.
[3]朱琳等.獾子油的化学成分研究[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(22):108-110.
[4]徐叔云等.药理实验方法[M].北京:人民卫生出版社,2002.
第1作者简介:代长林(1974-),男,工程师,狗獾饲养及产品开发。
(责任编辑:王岳)
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1001-9499(2017)01-0045-02
2016-11-16