丹参防治顺铂肝毒性的实验研究

曹思思，龚 双，颜 苗，张毕奎

(中南大学1. 药学院、2. 湘雅二医院药学部、3. 临床药学研究所，湖南 长沙 410011)

◇研究简报◇

丹参防治顺铂肝毒性的实验研究

曹思思1,2,3，龚 双1，颜 苗2, 3，张毕奎2, 3

(中南大学1. 药学院、2. 湘雅二医院药学部、3. 临床药学研究所，湖南 长沙 410011)

丹参；顺铂；肝毒性；小鼠；抗氧化；HO-1；

顺铂广泛用于治疗各种实体瘤，但由于其在肝脏蓄积，且肝脏对顺铂敏感性高[1]，高剂量给药或低剂量重复给药，患者肝毒性频发。氧化应激与顺铂所致肝脏病理损伤有密切关联[2]。而丹参具有抗氧化，清除脂质过氧化物的功效[3]。因此，本课题旨在研究丹参对顺铂给药小鼠肝功能的影响，并探讨其作用机制。

1 材料

1.1 实验动物 SPF级♂ ICR小鼠，体质量20 g～23 g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，许可证SCXK(湘)2011-0003。

1.2 药物与试剂 丹参注射液(正大青春宝药业有限公司)；顺铂(Sigma)；ALT、AST测定试剂盒(和光纯药工业株式会社)；SOD、GSH-Px、MDA检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)；一抗(Abcam)；二抗及β-actin (Proteintech)。

1.3 仪器 全自动生化分析仪(日立公司)；电动玻璃匀浆器(日本新芝)；酶标仪(汇松公司)；低温高速离心机(深圳黑马)；电泳仪(BIO-RAD公司)；转膜仪(北京六一生物科技有限公司)。

2 方法

2.1 分组 将小鼠随机分为4组(n=9)：对照组(腹腔注射等体积生理盐水)、丹参组(腹腔注射丹参3 g·kg-1)、顺铂组(单次腹腔注射顺铂20 mg·kg-1)、丹参+顺铂组(丹参连续给药7 d，d 5腹腔注射顺铂)。实验d 8处死小鼠，取血和肝组织用作后续分析。

2.2 检测指标 全自动生化分析仪测定血清ALT、AST活性；肝脏HE染色，观察病理变化；试剂盒测定肝匀浆SOD、GSH-Px活性和MDA含量；蛋白免疫印迹法检测肝脏HO-1蛋白表达。

3 结果

3.1 肝功能 丹参保护组血清ALT、AST活性低于顺铂组，差异具有统计学意义(P<0.05)，见Tab 1。

GroupALT/U·L-1AST/U·L-1Control36．80±6．17119．51±21．28Danshen36．22±5．12111．98±14．30Cisplatin65．82±5．71∗∗293．90±43．60∗∗Danshen+Cisplatin53．83±8．32##216．16±21．65##

**P<0.01vscontrol;##P<0.01vscisplatin.

3.2 肝脏病理切片 顺铂组小鼠出现轻微肝细胞水肿，炎性细胞浸润和坏死。丹参保护组肝组织形态结构接近对照组，未见明显病理改变。

3.3 SOD、GSH-Px活性及MDA含量 与顺铂组相比，丹参保护组SOD、GSH-Px活性增高，MDA含量降低，其中，GSH-Px和MDA组间差异具有统计学意义(P<0.05)，见Tab 2。

GroupSOD/kU·g-1ProGSH⁃Px/kU·g-1ProMDA/μmol·g-1ProControl6．37±1．7656．99±20．803．71±1．64Danshen6．76±1．7054．84±20．163．23±1．27Cisplatin3．51±2．13∗30．78±13．79∗7．67±2．10∗∗Danshen+Cisplatin5．89±2．8353．15±17．87#4．63±2．07##

*P<0.05,**P<0.01vscontrol;#P<0.05,##P<0.01vscisplatin

3.4 HO-1蛋白表达 丹参保护组HO-1蛋白含量高于顺铂组，差异具有统计学意义(P<0.05)。同时，与对照组相比，丹参组小鼠肝组织HO-1蛋白表达明显上调(P<0.05)。

4 讨论

本研究发现小鼠单次腹腔注射顺铂20 mg·kg-1引起血清转氨酶升高，抗氧化物耗竭，脂质过氧化物增加，与文献报道一致[4]。首次证实丹参能拮抗顺铂所致肝脏氧化损伤，发挥防御作用。HO-1是血红素代谢的限速酶，上调HO-1的表达能防治多种药物所致肝组织病理损伤[5]。研究发现丹参能上调HO-1表达，发挥肝保护作用。由于丹参兼具抗肿瘤活性，因此，丹参与顺铂合并用药可能发挥减毒增效的独特优势。

(致谢：本实验在中南大学药学院和湘雅市第二医院药学部实验室进行，在此对参与本试验研究和给予帮助的人员表示衷心感谢。)

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Preventive effects of Danshen on cisplatin-induced hepatotoxicity

CAO Si-si1,2,3, GONG Shuang1, Yan Miao2,3, ZHANG Bi-kui2,3

(1.SchoolofPharmaceuticalScience; 2.DeptofPharmacy,theSecondXiangyaHospital; 3.InstituteofClinicalPharmacy,CentralSouthUniversity,Changsha410011,China)

Danshen; cisplatin; hepatotoxicity; mice; antioxidant; HO-1

时间：2016-12-27 16:13

http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20161227.1613.050.html

2016-08-19,

2016-11-19

国家自然科学基金资助项目(No 81202985,81573686)

曹思思(1990-)，女，硕士，研究方向：临床药学，E-mail:1169233155@qq.com; 张华奎(1968-)，男，博士，教授，研究方向：临床药学，通讯作者，E-mail:zhbk68@163.com

10.3969/j.issn.1001-1978.2017.01.025

A

1001-1978(2017)01-0144-02

R-332；R282.71；R322.47；R575.1；R979.19