感染性疾病甲肝、戊肝的免疫学检验质量相关探讨

刘新

感染性疾病甲肝、戊肝的免疫学检验质量相关探讨

刘新

目的通过免疫学检验抗原与抗体反应的原理，探讨感染性甲肝、戊肝的免疫学检验效果。方法选取已确诊甲肝、戊肝患者各18例，采用两种方法检测，对照组采用胶体金法检测，实验组采用酶联免疫法进行检测。结果从选择的18例确诊患者中，通过酶联免疫法检测得出HAV-IgM呈阳性的人数，即甲肝检出人数为12例，检出率为66．7%；HEV-IgM呈阳性的人数，即戊肝检出人数为10例，检出率为55．6%；采用胶体金法检测得出HAV-IgM呈阳性的人数，即甲肝检出人数为9例，检出率为50．0%；HEV-IgM呈阳性的人数，即戊肝检出人数为6例，检出率为33．3%。对照组检测的准确率低于实验组的准确率，两者差异具有统计学差异。结论在感染性疾病甲肝和戊肝的检验过程中，酶联免疫法检测准确率高于胶体金法。

甲肝；戊肝；免疫学检测

我国是肝炎高发国家[1]，目前，很多地区已将甲肝、戊肝作为常规检查项目，对从业人员定期进行检查，特别是食品行业或饮食行业。甲肝和戊肝都是由粪口途径传播，易造成暴发性流行，因此，采用免疫学检查对甲肝和戊肝进行早期诊断并及时治疗有很重要的意义[2]。

1 甲肝、戊肝的免疫学检验质量比较

1.1 调查对象

选取2015年7月- 2016年7月某公司从业人员共8 534人，其中，男性5 217人，女性3 317人进行体检，已经确诊甲肝、戊肝患者各18例，年龄23～45岁，平均年龄（31.8±6.5）岁，无统计学差异。将患者用两种方法进行检测，分为对照组和实验组，对照组采用胶体金法检测，实验组采用酶联免疫法进行检测，对比两种方法检测结果准确率。

1.2 试剂与材料

甲型肝炎病毒lgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法，北京科卫诊断科技有限公司）、戊型肝炎病毒lgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法，北京万泰生物药业股份有限公司）；甲型肝炎病毒lgM抗体检测试剂盒（胶体金法，北京万泰生物药业有限公司）、戊型肝炎病毒lgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法，北京万泰生物药业股份有限公司）。

1.3 方法

酶联免疫法（ELISA）检测：清晨空腹抽取待检者静脉血，将血液进行3 500转/分的速度离心10 min，分离血清，以抗人IgM抗体作为固相抗体，将血清样本加入，IgM抗体可被固相抗体捕捉，37℃孵育30min后洗涤，将未结合的抗体洗去，得到被结合的抗体，再用Ag-酶标记的复合物与被捕获的IgM抗体相结合，37℃孵育30 min后洗涤，得到被结合的抗体，加入底物进行显色反应，再加入终止液结束反应，并测定OD值，从而得到标本中的HAVIgM和HEV-IgM抗体。测定谷丙转氨酶。男性谷丙转氨酶小于41 U/L，女性谷丙转氨酶小于31 U/L为正常。

胶体金法检测[3]：采用胶体金试纸快速测定，其操作方法和原理是将特异的抗体先固定于酸类纤维素膜的某一区带，当该干燥的酸类纤维素一端浸入血清样品后，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗体的区域时，样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合。同时利用金粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处进行标记。当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色的斑点。

1.4 统计学方法

将所测的数据用统计学软件SPASS 18.0进行分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05，差异有统计学意义。

2 结果

从选择的18例确诊患者中，通过酶联免疫法检测得出HAV-IgM呈阳性的人数，即甲肝检出人数为12例，检出率为66.7%；HEV-IgM呈阳性的人数，即戊肝检出人数为10例，检出率为55.6%；采用胶体金法检测得出HAV-IgM呈阳性的人数，即甲肝检出人数为9例，检出率为50.0%；HEV-IgM呈阳性的人数，即戊肝检出人数为6例，检出率为33.3%。对照组检测的准确率低于实验组的准确率，P＜0.05，差异有统计学意义。

3 讨论

免疫学检验是通过抗原与抗体反应的原理，用各种物质，如酶、荧光物质、放射线同位素等具有识别的物质进行标记，追踪，通过特异性的分析检测出各种生理与病理的免疫学指标，进行诊断，评价治疗疗效[4]。为避免暴发性大流行，采用免疫学检查早期诊断具有相当重要的诊断意义。

甲型和戊型肝炎主要的传播途径是食物、水、粪口、日常接触、院内感染。食物传播主要是因为食用生的、未加工的食物，而人们在食用过程中未发现其食用的水产品被污染，因此造成感染[5]。同样，人们在食用了未经消毒的水，其中水源被污染，导致肝炎暴发[6]。日常接触传播方式主要是人与人的亲密接触，不注意个人卫生，往往共同使用器具、用品等，一人得病，导致其他人员均被传染，尤其注意的是人多聚集的地方，比如工地、医院、幼儿园、部队或学生寝室等，常易引起肝炎的暴发[7-8]。

[1] 陈凤仙． 感染性疾病甲肝、戊肝的免疫学检验[J]． 世界最新医学信息文摘，2015，15（69）：40-41．

[2] 许斌，朱虎定． ELISA检测HBsAg影响因素的探讨[J]． 临床检验杂志，2001，18（4）：232．

[3] 曲萌． 胶体金免疫层析法同步检测甲、戊型肝炎特异性抗体的实验研究[D]． 吉林：北华大学，2001．

[4] 李海侠，裘宇容，杨佳． 临床免疫学检验精品课程建设的探索与实践[J]． 中华医学教育探索杂志，2010，9（1）：51-53．

[5] 哈鲁虹． 感染性疾病甲肝、乙肝的免疫学检验[J]． 中外健康文摘，2010，7（21）：107-108．

[6] 葛馨． 免疫学检验感染性疾病甲肝乙肝的临床体会[J]． 中国保健营养，2016，26（6）：368．

[7] 李尚琴，崔吉茂，何莉，等． 2010-2012年达州市从业人员健康体检甲肝、戊肝、ALT检测结果分析[J]． 大家健康，2014，7（4）：29-30．

[8] 于利英，王瑛，金学燕，等． 2010年-2013年吴兴区从业人员甲肝和戊肝病毒感染结果分析[J]． 中国卫生检验杂志，2015，25（5）：728-730．

To Investigate the Immunological Test Quality Related Infectious Diseases, Hepatitis A and E

LIU Xin Department of Clinical Laboratory, The Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, Changchun Jilin 130021, China

ObjectiveTo study the immunological test results of hepatitis A and hepatitis E in China by analyzing the principle of antigenantibody reaction in immunocompetent countries.Methods18 patients with confirmed hepatitis A and E were detected by two methods. The control group was detected by enzyme-linked immunosorbent assay. The experimental group was detected by colloidal gold method, and the accuracy of the two methods was compared.ResultsFrom 18 cases were selected, by enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of the HAV-IgM positive number, which was a positive number for 12 cases, the detection rate was 66.7%; HEV-IgM positive number, the number of 10 cases of hepatitis E were detected, the detection rate was 55.6%; detected by colloidal gold method was positive for HAV-IgM the number is a positive number for 9 cases, the detection rate was 50.0%; HEV-IgM positive number, the number of 6 cases of hepatitis E were detected, the detection rate was 33.3%. The accuracy rate of the control group was lower than that of the experimental group, and the difference was statistically significant.ConclusionThe detection accuracy of colloidal gold method is higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in the detection of hepatitis A and hepatitis E in infectious diseases.

hepatitis A; hepatitis E; immunological detection

R446．1

A

1674-9316（2017）01-0106-02

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．01．070

长春中医药大学附属医院检验科，吉林 长春 130021