绵羊胚胎移植技术

吴晓青 王汉勇

(1.唐山市丰南区农牧局,河北唐山 063300; 2.唐山市丰南区胥各庄动物防疫站,河北唐山 063300)

绵羊胚胎移植技术

吴晓青1王汉勇2

(1.唐山市丰南区农牧局,河北唐山 063300; 2.唐山市丰南区胥各庄动物防疫站,河北唐山 063300)

随着近几年养羊产业化、工厂化、标准化的不断推进，羊繁育新技术的应用也越来越普遍，尤其是胚胎移植技术，是种羊迅速扩群最常用的繁育新技术。唐山市丰南区早在90年代初期就在利用胚胎移植技术进行黑头杜泊种羊迅速繁育，已经掌握了该技术并取得了一定的成效，2017年3月份，丰南区东鑫扬农民养殖合作社调理供体杜泊羊306只、受体绵羊 1667只采用供体腹腔内窥镜子宫角一次输精、受体移植等先进技术进行胚胎移植，供体羊超排处理293只，配种291只，手术冲胚处理285只，冲胚数量2170枚，因掉栓、怀孕等原因淘汰供体11只，供体利用93.13%，平均冲取可利用胚胎7.61枚；受体手术移植处理1661只，移植1596只（移植单胚1022只，双胚574只），受体移植利用率达到95.74%。此次移植无论是同期发情率、还是有效胚胎生产数量均达到了国内先进水平，取得了良好的效果，超出预期。下面就绵羊胚胎移植技术给大家介绍一下，仅供参考。

1 羊胚胎移植技术概念及主要意义

也称受精卵移植，是指从一头良种母羊的输卵管或子宫内取出早期胚胎，移植到另一头生理状态相同母羊的输卵管或子宫内，使之继续发育成新的个体，也称作“借腹怀胎”。提供胚胎的个体称为供体，接受胚胎的个体称为受体。通过胚胎移植生产的后代，其遗传特性取决于供体母畜和与之交配的公畜的遗传特性，而受体对移植后代的遗传性能影响很小。

胚胎移植技术冲破了母畜繁殖率低的障碍，能大大提高母畜繁殖效率，使优秀母畜可以生产出比自然繁育更多的优秀后代，使优良公、母畜繁殖潜力得以充分发挥；利用胚胎移植技术可以代替优良种畜的引进，用胚胎代替活畜引种，运输更为方便，不仅可以节约数额巨大的进口种畜的费用，还可以把引种过程中疾病传播的危险性降到最低。

2 胚胎移植技术的主要技术环节

胚胎移植的主要技术环节包括：供、受体的同期发情、供体的超数排卵、配种、供体胚胎收集、受体胚胎移植等。

2.1 胚胎移植前期准备工作

选择的供体母羊应具有较高的生产性能和遗传育种价值；供、受体羊应该繁殖机能正常，体况良好；年龄 2.5～6岁为宜，青年羊至少应在 1.5岁以上，且是空怀母羊。受体与供体羊准备数量在 10∶1左右。

在胚胎移植前 2 个月，要对选择好的供、受体羊进行集中饲养调理。

在选择供体母羊的同时，也要注意与配公羊的选择，因为后者也为受精卵提供优良的遗传基因。除认真检查与配公羊精液品质外，还要给予全价饲料，特别是蛋白质和矿物质饲料的供给，在配种季节未曾到来之前，就应给予补饲。

2.2 供、受体同期发情

供、受体在发情周期的任意一天同时放置氟黄体酮海绵栓或埋植CIDR，埋植14d撤栓，受体羊撤栓同时注射200～300单位孕马血清，第1次发情时肌肉注射促排3号。

2.3 供体羊超排

供体羊在撤栓前48h开始减量肌肉注射垂体促卵泡素，间隔12h注射1次，连续6次递减注射，注射总剂量为200～300单位。在第4次注射垂体促卵泡素时同时注射氯前列烯醇0.1mg/只。发情后肌肉或静脉注射促排3号75～100单位，或促性腺激素类似物50～75μg。应用超排技术可使羊每次排卵由1～4个增加到6～20个或者更多。

2.4 供体羊发情鉴定及配种

所有供体羊撤栓后24h开始用性欲旺盛的公羊进行早、晚试情，每次试情时间不少以60mn，连续3d试情。内窥镜子宫角输精，可在发情后48～56h进行一次性输精，内窥镜观察卵巢黄体情况，对卵巢有反应一侧子宫角进行输精处理，输入精液量为原精0.2ml。

2.5 供体胚胎收集

以发情开始的第1d记为0d，所有供体在发情的第7d用手术法经子宫角回收胚胎。为防止手术时供体腹压过大而造成手术困难和生殖器官的损伤术前24h将供体、受体单圈饲养，断食，以达到空腹的目的。手术器械用0.15%新吉尔灭溶液浸泡消毒30min进行常规消毒。

术前将供体保定在移植车上，全身麻醉，术部剪毛、消毒，术前将羊头低仰卧体位45°～60°角左右斜倒立保定，手术部位选在乳房下3～4cm腹中线处，常规消毒、切开腹腔、将子宫角牵引出腹腔，观察卵巢反应及黄体数量，对卵巢有反应侧的子宫角进行冲胚处理。在子宫角基部用钝钳刺透子宫壁，插入冲卵导管，向冲卵导管内打入适量气体，直到冲卵管的气囊膨胀到适宜的程度保证冲卵液回流通畅，在子宫体与输卵管结合部插入套管针，抽出针芯，由此向子宫体内注入冲卵液20～25ml，在补注入空气5～10ml，可保证胚胎的正常回收。用培养皿接受回流的冲卵液，最后用手指轻轻挤压子宫体，使冲卵液尽量回收完全，然后将冲卵导管气囊放气，子宫体基部缝合。用同样的方法冲另一侧子宫角，之后将子宫角送回腹腔，用生理盐水冲洗子宫。采用常规手术法缝合、消毒创口，术后注射青链霉素等消炎药物，防止创口感染。

回收的冲卵液立即送入室温在21℃～26℃的无菌室进行胚胎镜检，吸取合格胚胎，根据其形态对质量进行评判，将A、B级胚胎1h后移植到卵巢上黄体发育好的受体羊的子宫角内。

2.6 胚胎移植

受体羊的移植过程同样采用手术法，受体羊除了不用麻醉外，术前准备和手术过程同供体相同。受体羊在乳房下3～5cm左右腹中线两侧各做一切口，借助腹腔内窥镜和肠钳的翻动，观察卵巢上的黄体情况，将判定合格受体羊黄体侧的子宫角牵出腹腔外，用钝针在子宫角前端无血管处扎孔，以装有合格胚胎的移植针穿过扎孔处进入子宫角内腔中，推入胚胎，完成移植。将子宫角放入腹腔，两侧切口各做一针常规缝合、消毒。

随着胚胎移植技术的日臻完善，绵羊胚胎移植技术的研究已经逐步由试验研究向商业化生产阶段转变。这一技术在生产中的广泛应用，充分发挥了优良绵羊品种的遗传优势，较快地实现了在短时间内提高绵羊的良种化程度，不仅促进养羊业的发展，也为当地经济繁荣带来广阔前景。对绵羊胚胎移植产业化进行研究，必将对肉羊新品种的引进和肉羊生产开发产生积极的推动作用。