奶牛寄生虫病研究进展

王传文，王海良，徐发荣，贾春涛，赵景义，汪明，潘保良

（1.中国农业大学动物医学院，北京 100193；2.北京市兽药监察所，北京 100029；3.北京市动物疫病预防控制中心，北京 100029；4.天津市武清区海林养殖场，天津 301718）

奶牛寄生虫病研究进展

王传文1，王海良2，徐发荣3，贾春涛4，赵景义3，汪明1，潘保良1

（1.中国农业大学动物医学院，北京 100193；2.北京市兽药监察所，北京 100029；3.北京市动物疫病预防控制中心，北京 100029；4.天津市武清区海林养殖场，天津 301718）

寄生虫病是奶牛养殖中一大类比较常见、危害严重的疾病，造成很大的经济损失。本文根据近10年来PubMed、中国期刊网数据库的相关报道，对奶牛寄生虫病流行病学调查、诊断方法的建立、防治技术研究、新型抗寄生虫药物和制剂研制等方面的国内外研究进展进行了一个简要的综述，以期为我国奶牛寄生虫病的研究和防控提供一定的参考。

奶牛；寄生虫病；研究进展

寄生虫病是奶牛养殖中一大类比较常见、危害严重的疾病。全球有相当一部分科研人员从事奶牛寄生虫病的研究，每年都有一些新的研究进展。为了方便同行和对该领域感兴趣的学者了解国内外奶牛寄生虫病近10年来的研究进展，笔者根据PubMed、中国期刊网数据库的相关报道以及国内外学术交流所掌握的情况，对奶牛寄生虫病的国内外研究进展做一个简要的分析和总结。

1 寄生虫病对奶牛的危害

寄生虫病主要由寄生在奶牛体内的线虫、吸虫、绦虫和原虫以及寄生在体表的节肢动物（如蝇类、螨虫、蜱、虱子）引起。寄生虫可给奶牛造成多种危害，甚至造成奶牛死亡，如隐孢子虫、焦虫。其中，环形泰勒虫可使种牛和外地引进牛的发病率和死亡率达100%。绝大多数寄生虫会阻碍犊牛生长发育，延迟发情，增加饲养成本。有的寄生虫感染会抑制奶牛对疫苗的免疫反应，降低其抗体效价，增强奶牛对疾病的易感性。例如，蠕虫感染能引起宿主过敏，降低其自身免疫性和炎症反应，降低疫苗反应，增加对共感染的易感性[1,2]。有的寄生虫会导致奶牛流产、死胎，如新孢子虫，美国、新西兰、荷兰、德国等国的调查结果显示，15%～45%的奶牛流产与新孢子虫有关。大部分寄生虫感染会导致泌乳牛产奶量及牛奶品质下降；如蜱，与不感染组相比，感染蜱的奶牛每天少产奶1.3kg，乳脂量每天减少0.14kg[3]。除了直接危害外，有的寄生虫还是重要的疾病传播媒介，如丝虫病可通过蚊子传播，蜱可传播焦虫[4]。

国内外大量研究显示，寄生虫病可给奶牛养殖业造成重大经济损失。据报道，奶牛感染寄生虫后，每头奶牛的产奶量每天可降低1.68～2.35kg[5]。据统计，在美国，胃肠道线虫、外寄生虫和吸血蝇每年给养牛业造成的经济损失分别达20亿、20亿和22亿美元[3]。

鉴于寄生虫病在奶牛养殖中的重要性，国内外开展了大量研究。研究包括奶牛寄生虫病流行病学调查、诊断方法的建立、防治技术研究、新型抗寄生虫药物和制剂研制等方面。

2 奶牛寄生虫病的国外研究进展

欧美、澳大利亚、新西兰等国家和地区，牧草丰富，牧场广袤，有很大一部分奶牛在天然牧场饲养，与圈养奶牛相比，寄生虫感染更为常见。因此，这些国家非常重视寄生虫病的研究和防治。近10年来，国外研究比较多的寄生虫是新孢子虫、隐孢子虫、贾第虫、球虫、线虫以及吸虫。

新孢子虫是造成奶牛流产的一个重要原因，造成很大的经济损失，是国外奶牛寄生虫病研究的一个热点。该寄生虫的热点研究领域包括诊断方法的研究、流行病学调查以及致病机制等方面。在诊断方面，日本的Dong等用大肠杆菌和蚕表达的新孢子虫抗原NcSAG1、NcSRS2和NcGRA2建立了检测奶牛新孢子虫抗体的ELISA方法，证实该方法有很好的敏感性、特异性和准确性[6]。在流行病学调查方面，González-Warleta 等对西班牙加利西亚地区奶牛的新孢子虫抗体进行了检测，发现与没有犬的农场相比，养犬农场的奶牛血清阳性率更高，与弓形虫的共感染增加了奶牛血清阳性的风险[7]。伊朗的Razmi等及Gharekhani等分别对Mashhad、Hamedan地区的奶牛场进行了奶牛新孢子虫抗体检测。数据显示，大型奶牛场中由犬新孢子虫感染造成的奶牛流产是非常普遍的，而且奶牛场是否养犬、犬是否接触牛群、奶牛是否有流产史以及奶牛场养殖规模对奶牛新孢子虫的阳性率有明显影响[8,9]。巴西的Cardoso等研究发现，犊牛新孢子虫的血清学阳性与母牛的血清学阳性存在明显的相关性，这表明新孢子虫垂直传播的风险较大[10]。美国的Salehi等利用微卫星技术检测了新孢子虫基因的多态性。从298头血清学阳性奶牛的流产胎牛脑组织中检测出12份PCR阳性样品。用9个微卫星标记：MS4、MS5、MS6A、 MS6B、MS7、MS8、MS10、MS12和MS21进行分型，发现同一地理株为同一种基因型，不同地理株之间有的存在差异，有的相同[11]。在致病机理方面，西班牙的Garc í a-Ispierto等研究了新孢子虫感染对杂交牛内分泌的影响，发现怀孕期间的新孢子虫慢性感染会调节P4（孕激素）和PAG-2（妊娠缔合糖蛋白-2）的表达，而对PAG-1和催乳素没有明显的影响[12]。上述研究结果表明，新孢子虫是导致奶牛流产的重要原因，犬与奶牛的密切联系可加剧奶牛场新孢子虫的传播，新孢子虫具有明显的垂直传播特性，ELISA方法是检测奶牛新孢子虫病的有效方法。

隐孢子虫、贾第虫和球虫是引起犊牛腹泻的重要原因，而犊牛腹泻是造成犊牛死亡的首要原因。国外对隐孢子虫、贾第虫和球虫也进行了比较多的研究。Fayer等报道，1～2岁奶牛隐孢子虫的感染率低于青年牛，且隐孢子虫的基因型存在多样性[13]。Winkworth等首次报道了新西兰南岛奶牛中存在贾第鞭毛虫和隐孢子虫感染，发现北岛与南岛两个区域间1～7周龄小牛的流行率没有差异，不同气候条件也不影响这两种病原体的流行率[14]。Meireles等调查表明，C. ryanae和C.bovis在断奶前对犊牛的感染率比C.parvum高，说明C. ryanae和C.bovis是断奶前犊牛主要感染的隐孢子虫种[15]。Lassen等对爱沙尼亚奶牛场进行了调查，发现所有牛群都存在艾美球虫感染，3～12月龄的犊牛感染率最高（63%），3月龄以内的小牛大多数会排出卵囊[16]。Bruhn等从37头荷斯坦牛的259个粪样中检测到了11种艾美尔球虫，说明该地牛球虫种类很多[17]。Uehlinger报道，在加拿大爱德华兹王子岛的圈养牛、散养牛和肉牛的粪便中，利用免疫荧光技术检测到Giardia duodenalis的感染率均超过30%，肉牛多易感染Assemblage E型鞭毛虫，奶牛多易感染Assemblage A鞭毛虫[18]。

在以放牧为主的一些奶牛养殖国家，蠕虫（线虫、吸虫和绦虫）感染也比较严重，其研究也比较多。在奶牛线虫流行病学调查方面，德国的Klewer等用ELISA方法对2 586份牛奶样品进行了胎生网尾线虫抗体检测，发现1月份抗体阳性率最高，达12.8%；9、10月份阳性率分别为6.9%和6.6%，说明胎生网尾线虫在德国奶牛场感染比较普遍，且有一定的季节性[19]。瑞士的Novobilský等对瑞士10%的奶牛进行了肝片吸虫流行病学调查，发现肝片吸虫的抗体阳性率为25%，说明肝片吸虫在瑞士奶牛中很常见，后备奶牛开始放牧的时间和放牧时间的长短是影响肝片吸虫流行的两个主要因素[20]。澳大利亚的Elliott等利用粪便检查和ELISA方法检测了维多利亚15个奶牛群的肝片吸虫感染情况[21]，发现有6个奶牛群存在肝片吸虫感染，感染率为47%～100%（平均为81%）。英国的Howell等利用ELISA方法检测了606个奶牛群的牛奶样品[22]，发现降雨量大、沼泽多、牧场有肉牛饲养、有溪流或池塘的牧场奶牛肝片吸虫的感染率明显较高。在蠕虫感染对奶牛生产性能影响研究方面，阿根廷的Perri等通过调查证实，围产期发生奥斯特线虫感染的奶牛产奶量与未感染的奶牛相比，减少7%～15%，说明奥斯特线虫感染对奶牛产奶量有较大的不良影响[23]。新西兰的Dank研究了胎生网尾线虫感染对奶牛产奶性能的影响[24]，发现感染胎生网尾线虫的奶牛每天的产奶量比未感染牛低1.01～1.68kg，乳脂率低0.08%～0.14%。英国的Howell等研究发现肝片吸虫阳性奶牛的产奶量较未感染牛低15%[22]。这些结果表明，蠕虫感染对奶牛生产性能有不利影响，可造成较大的经济损失。

在奶牛寄生虫病防治方面，比利时的Charlier等用氯氰碘柳胺对干奶期奶牛肝片吸虫进行驱虫，发现与未进行驱虫的奶牛相比，肝片吸虫抗体水平明显下降，奶牛产奶量增加303kg，说明在干奶期用氯氰碘柳胺防治奶牛肝片吸虫是一种非常有效的措施，且不用弃奶[25]。De Waele等研究发现，可以通过使用有效的隐孢子虫预防药物（例如乳酸常山酮）和良好的卫生管理措施相结合，实现隐孢子虫的有效控制[26]。波兰的Sorge等对明尼苏达地区的有机牧场和常规牧场的奶牛寄生虫及防控措施进行了调查，发现粪便中线虫卵数量低，这缘于该地区大多数奶牛场对泌乳奶牛和断奶前犊牛采取了蝇类防控措施[27]。

3 奶牛寄生虫病的国内研究进展

与国外相比，我国专业从事奶牛寄生虫病研究的人员比较少，国内相关的研究报道也较少。在已有的报道中，关于奶牛寄生虫病的流行病学调查比较多。李桂荣等调查了哈尔滨市的奶牛寄生虫感染情况，发现奶牛寄生虫主要有前后盘吸虫、东毕吸虫、肝片吸虫、消化道线虫和球虫，而且多呈混合感染[28]。叶秀娟等研究发现，金华地区奶牛寄生虫感染率高达73.02%，主要是结肠小袋纤毛虫、消化道线虫、球虫和肝片吸虫等；原虫的感染率高于蠕虫；感染率较高的是结肠小袋纤毛虫，混合感染情况比较严重，感染种类为2～5种[29,30]。徐发荣等对北京地区成年牛和犊牛的粪样进行了检查，成年奶牛和犊牛粪样中检出的主要是线虫卵和球虫卵囊，成年奶牛粪样中线虫卵和球虫卵囊的阳性率分别为14.64%、49.15%；犊牛粪样分别为24.56%、65.02%，平均OPG值范围为2540～7648，并在7月份出现一个高峰[31]。王海燕等对开封地区622份新鲜粪便样本进行检查，共检出7种肠道寄生虫，总感染率为41.6%，其中以球虫为主要感染虫种，感染率为33.4%。结果分析显示，不同调查点、不同年龄段及不同饲养条件下奶牛肠道寄生虫感染率均存在极显著差异（P＜0.01）[32]。周金石等对柳江县80头份奶牛粪便进行了寄生虫检测，发现奶牛肠道寄生虫总感染率为12.5%；隐孢子虫感染率为10%，其中0～12月龄小牛感染率为20%，成年奶牛感染率为6.67%；球虫感染率为2.5%，其中0～12月龄小牛感染率为10%[33]。Huang等从宁夏地区的21个奶牛场采集了1 580份粪便样品进行隐孢子虫检测，显微镜检测发现10个场存在隐孢子虫感染，平均感染率为4.81%，最高为25.2%。基于SSU rRNA基因的PCR-RFLP分析以及DNA序列分析显示，养殖场22个阳性样品中，14个为C. parvum，来自6个场；4个C. bovis，来自3个场；C.andersoni发现于一个场的4个样本。Gp60基因亚型分析显示，14个C. parvum亚型均为IIdA19G1，6个分离株属于IIdA15G1。调查显示，宁夏地区奶牛隐孢子虫种类分布和亚型特征不同于河南省和黑龙江省[34]。廖党金等在四川省3个市的12个奶牛场和5个奶牛养殖小区进行了奶牛寄生虫病流行调查，结果表明，螨虫病和前后盘吸虫病在各奶牛场和小区均有感染；片形吸虫的阳性率为83.3%，EPG值范围为78～123；牛场线虫虫卵的阳性率为91.7%，牛群的感染率为5.3%～44.4%，EPG值范围为60～400；牛场球虫卵囊的阳性率为100%，犊牛的感染率为12.3%～75.0%，OPG值为62～4186[35]。

在新孢子虫研究方面，国内在新孢子虫病流行病学调查、诊断方法、致病机理和疫苗研究等方面进行了研究。Xia等对我国南方奶牛新孢子虫感染情况进行调查，发现奶牛血清学阳性率为18.9%，其中流产奶牛的阳性率（22.7%）明显高于非流产奶牛（16.3%）[36]。Hao等从北京一奶牛场奶牛血液样品中分离出一株新孢子虫，命名为北京株（NC-Bj），并对其生物学特性进行了研究[37]。中国农业大学刘群教授课题组开展了几种重要新孢子虫微线蛋白和棒状体蛋白的研究，初步明确它们在虫体内的定位及相互之间的互作关系，获得了ROP5和ROP16的基因敲除虫株[38]，为下一步的功能及其作用机制研究奠定了基础。

上述调查结果表明，目前，我国奶牛寄生虫病的流行呈现以下特点：饲养方式是影响奶牛寄生虫感染的重要因素，放牧或半放牧奶牛感染寄生虫的几率远大于圈养奶牛，饲喂青草比饲喂干草感染寄生虫的机会要大得多；不同地域所流行的寄生虫种类不尽相同，需要定期对其感染情况进行调查；总体而言，危害我国圈养奶牛的寄生虫病主要有球虫病、新孢子虫病、螨虫病、隐孢子虫病、线虫病以及犊牛的虱子病；危害放牧奶牛的寄生虫病主要有线虫病、绦虫病、吸虫病、球虫病、隐孢子虫病及蜱、螨、虱等外寄生虫。

在奶牛寄生虫病防治方面，由于绝大多数寄生虫对绝大部分消毒剂有很强的耐受性，而且尚无成熟的商品化疫苗，药物防治是目前奶牛寄生虫病防治的主导手段。奶牛寄生虫防治药物的研制与其他动物存在明显差异，研制应用于泌乳奶牛的抗寄生虫药物，首先需要考虑药物在牛奶中的残留问题，如在猪、肉牛、羊、兔等动物中广泛使用的伊维菌素，给泌乳奶牛使用后，需要弃奶28d，因此，伊维菌素不适合在泌乳奶牛中使用[39]。研制应用于非泌乳奶牛的抗寄生虫药物，需要重点考虑药物的持效期和给药的方便程度，奶牛个体大，保定比较困难，持效期短、需要反复给药的抗寄生虫药物在临床上使用时劳动强度很大，很难被奶牛养殖场接受，难以推广。

在我国奶牛寄生虫病防治药物研究方面，中国农业大学与河北威远动物药业有限公司、浙江海正药业有限公司联合研制了乙酰氨基阿维菌素注射剂、浇泼剂和莫西菌素浇泼剂，并对这些药物的药理学、制剂学、药代动力学、残留消除规律和疗效进行了比较系统的研究[3,40～42]。其中，乙酰氨基阿维菌素注射剂和浇泼剂、莫西菌素浇泼剂均已获得国家新兽药证书，其质量标准也成为行业标准和企业标准。乙酰氨基阿维菌素浇泼剂应用于泌乳奶牛，牛奶中的残留量低于美国（12ng/mL）和欧盟（20ng/mL）规定的最高残留限量，应用于泌乳奶牛，不需要弃奶。一次给奶牛背部浇泼0.5mg/kg的乙酰氨基阿维菌素浇泼剂，对螨虫的杀灭率为100%，可以有效减少粪便中线虫卵的排出，虫卵减少率可达100%，有效期可达63d以上。乙酰氨基阿维菌素注射液以每千克体重0.2mg的剂量进行皮下注射对奶牛螨虫和线虫的驱杀效率均为100%，持效期长达42d[3,40～42]。课题组还开展了伊维菌素长效注射剂研制，利用固体分散体技术，将伊维菌素包被于缓释载体中，研制了伊维菌素固体分散体长效注射剂[43]。该注射剂在小尾寒羊体内进行的药物代谢动力学试验结果证实，伊维菌素固体分散体长效注射剂延长了药效维持时间，并提高了伊维菌素在小尾寒羊体内的生物利用度。吡喹酮纳米注射液的研制也同时开展，试验证实其具有良好的稳定性；在动物体内的药代动力学和疗效试验结果显示，吡喹酮纳米注射液显著增强了吡喹酮的药理作用和治疗效果。该制剂在奶牛吸虫病和绦虫病防治方面有较好的应用前景[44]。这些新兽药的研制将为我国奶牛蠕虫和外寄生虫病的防治提供高效、广谱的药物。

4 我国奶牛寄生虫病研究展望

综述所述，我国奶牛寄生虫研究与国外相比，存在不小的差距。主要体现在：①在流行病学调查方面，我国主要采用粪便检查的传统方法，免疫学方法（如ELISA）、分子生物学方法（如PCR方法）等现代检测技术应用比较少；而国外应用现代检测技术较多，因而其奶牛寄生虫病流行病学调查更系统和深入。②国内在奶牛寄生虫新型诊断技术上研究很少，如牛奶、粪便的ELISA检测方法；而国外研究比较多，有的已经在生产中广泛使用。③由于工作量、试验费用高等原因，国内关于奶牛寄生虫病药物防治试验的研究报道很少，而国外在药物防治奶牛寄生虫病方面会进行系统研究。目前，国内在奶牛寄生虫病研究方面，存在以下不利因素：①专业从事奶牛寄生虫研究的人员和机构较少；②研究的技术力量比较薄弱，研究内容以流行病学调查为主，而在奶牛寄生虫的致病机理、防控技术和诊断技术等方面的研究比较少；③研究资金匮乏，由于动物的特殊性以及奶牛养殖场离研究单位往往比较远，研究成本很高、投入大，但在开展奶牛寄生虫研究时很难获得国家科研项目的资助；④奶牛养殖场以及科研主管部门对奶牛寄生虫病的重要性认识不足。

为了不断提升我国奶牛寄生虫病的研究水平，笔者提出应该从以下几方面努力：①加大宣传力度，增强奶牛养殖场、企业和科研主管部门对奶牛寄生虫病重要性的认识，形成大家关注和支持开展奶牛寄生虫病研究的局面；②针对我国奶牛场寄生虫病防控中存在的突出问题，开展一些应用性研究，加强与企业和养殖场的合作，获取研发资金和试验材料；③加强国内外科研的交流与合作，整合各自的优势，不断提升科研水平，攻克难题，提高科研的成效和产出；④维持并不断扩大研究队伍，为奶牛寄生虫病的研究提供强有力的智力资源；⑤在研究内容上，以严重危害我国奶牛健康的球虫、螨虫、隐孢子虫、线虫、新孢子虫等主要寄生虫为重点研究对象，对其生物学、流行病学、防治药物以及诊断技术进行深入研究，为奶牛寄生虫病的防控提供强有力的技术支撑。

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Abstract:Parasitic diseases are common and serious diseases in dairy cattle breeding, which caused great economic losses. Based on the database of PubMed and China Journal Net, the research advances of parasitic diseases of cow at home and abroad were summarized from aspects of the epidemiological investigation, the establishment of diagnostic methods, the technology of prevention and development of the new parasite drugs. It is hopeful that this work is helpful for the research and prevention of parasitic diseases of cow in China.

Key words:Dairy cattle; Parasitic diseases; Recent progress

Recent Progress on Parasitic Diseases of Dairy Cattle

WANG Chuan-wen1, WANG Hai-liang2, XU Fa-rong3, JIA Chun-tao4, ZHAO Jing-yi3,WANG Ming1, PAN Bao-liang1
(1.College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100193; 2.Beijing Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100029; 3.Beijing Animal Disease Control Center, Beijing 100029;4.Hailin Farms of Tianjin Wuqing, Tianjin 301718)

S858.23

A

1004-4264（2017）09-0032-06

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.09.009

2017-01-03

国家奶牛产业技术体系（CARS-37）；公益性行业（农业）科研专项经费资助（201303037）；奶牛产业技术体系北京市创新团队。

王传文（1991-），女，博士研究生。

潘保良（1974-），男，博士，教授，主要从事寄生虫病防控技术研究工作。