抗 CCP抗体和 AKA在类风湿关节炎诊断的应用价值

姚春红，邓建平

（黄石市爱康医院，湖北 黄石 435000）

抗 CCP抗体和 AKA在类风湿关节炎诊断的应用价值

姚春红，邓建平

（黄石市爱康医院，湖北 黄石 435000）

目的比较抗环瓜氨酸肽抗体（抗 CCP抗体）和抗角蛋白抗体（AKA）在类风湿关节炎诊断中作用，探讨 RA的早期诊断方法。方法对已确诊的85例 RA患者、74例非 RA的自身免疫病患者同时测定抗 CCP抗体（ELISA法）、AKA（间接免疫荧光检测）。结果抗 CCP抗体对诊断 RA的灵敏度和特异性分别为75.3%和93.2%；AKA对 RA诊断的灵敏度和特异性分别为89.4%和85.14%。抗CCP抗体的灵敏度与AKA灵敏度差异无统计学意义（P＞0.05），特异性差异有统计学意义（P＜0.05）；抗CCP抗体或AKA与二者联合检测的灵敏度差异有统计学意义（P＜0.05），特异性差异有统计学意义（P＜0.05）。阳性预测值抗 CCP抗体较高，阴性预测值以二者联合检测较好，Youden index二者联合检测比单独检测抗 CCP抗体或 AKA高。抗 CCP抗体和 AKA在检测 RA组中抗 CCP抗体和 AKA同时阳性检出 58例；抗CCP抗体或AKA阳性共检出85例。抗CCP抗体或AKA阳性率（96.5%）比二者同时阳性率（68.2%）大大提高。结论抗 CCP抗体、AKA对RA具有较好的灵敏度和高度的特异性，联合检测抗CCP抗体和AKA可作为早期RA患者及RF阴性RA患者的早期诊断指标。

抗环瓜氨酸肽抗体； 抗角蛋白抗体； 类风湿关节炎

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RF）是一种常见的以对称性多关节炎为主要表现的慢性弥漫性自身免疫疾病，其病因和发病机制迄今尚未阐明［1-2］，而早期诊断和系统性治疗是防止关节畸性和致残的关键。类风湿因子是诊断 RA重要检测指标，但 RF特异性不高，特别是早期检出率不高，对早期预防和治疗带来一定的困难。近年来陆续发现抗核周因子抗体 （antiperinuclear factor，APF）、抗 角 蛋白 抗体（antikeratin antibody，AKA）等，瓜氨酸是 AKA、ARF、AFA的共同抗原决定簇，以合成的CCP为抗原，可以用ELISA检测抗 CCP抗体［3］，可在 RA发病早期发现。本文通过对抗 CCP抗体和 AKA的检测，了解抗CCP抗体、AKA在RA早期诊断中的作用和价值。

材料和方法

1 研究对象

2014年8月至2015年5月我院门诊和住院 RA患者85例，符合美国风湿病学会（ACR）1987年修订的 RA诊断标准［4］，男性 39例，女性 46例，年龄20～76岁。非 RA组：74例，其中系统性硬化症（PSS）16例，原发性干燥综合征（SS）18例，强直性脊柱炎（AS）6例，系统性红斑狼疮（SLE）17例，骨关节炎（OA）4例，混合性结缔组织病（MCTD）3例，痛风10例。门诊健康体检对照组82例，均未作任何治疗，无感染性疾病、肿瘤、自身免疫性疾病等。其中男性36例，女性46例，年龄26～63岁。

2 方法

2.1 抗 CCP抗体的检测 ELISA法检测 IgG型 CCP抗体，试剂采用上海荣盛生物有限公司提供的试剂盒，操作过程严格按照说明书，参考质控及阴阳性对照进行检测。抗 CCP抗体浓度＞12RU／mL为阳性，抗 CCP抗体浓度 ＜12RU／mL为阴性。

2.2 AKA检测 采用间接免疫荧光法检测，检测结果在荧光显微镜下观察，见到角质层出现明显的多条板层状（连续）或者点片状（不连续）的荧光即为阳性结果。

3 统计学处理

收集的数据采用 SPSS22.0软件进行统计学分析。计数资料采用 χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 抗CCP抗体和AKA在RA组、非RA组和健康对照检测结果

在85例RA患者血清中，抗CCP抗体阳性64例，AKA阳性76例；74非RA患者血清中，抗CCP抗体阳性5例，AKA阳性11例。二者联合检测以抗CCP抗体或 AKA任何一项阳性均判断为阳性，见表1。

表1 抗 CCP抗体和 AKA各组组检测结果

2 抗CCP抗体、AKA对RA诊断的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值

抗 CCP抗体的灵敏度与 AKA差异无统计学意义（P＞0.05），特异性与AKA差异有统计学意义（P＜0.05），抗CCP抗体或AKA与二者联合检测的灵敏度差异有统计学意义（P＜0.05），特异性方面抗CCP抗体与 AKA二者联合检测差异有统计学意义（P＜0.05）。阳性预测值抗CCP抗体较高，阴性预测值以二者联合检测较好，Youden index比单独检测抗 CCP抗体或 AKA高。见表2。

3 抗CCP抗体和AKA在RA组中的检测

抗CCP抗体和 AKA在检测 RA组中抗 CCP抗体和AKA同时阳性检出 58例，阳性率为 68.2%（58／85）；二者均阴性3例，抗CCP抗体或AKA阳性共检出82例，阳性率为96.5%（82／85）。抗CCP抗体或 AKA任何一项阳性比二者同时阳性检出率大大提高。见表3。

表3 抗 CCP抗体和 AKA在RA组中的关系

讨 论

类风湿性关节炎（RA）是最常见的慢性炎性关节疾病，在世界范围内发病率为0.5%到1%。RA滑膜关节炎症，到发病中晚期将发生如骨关节不可逆损坏等严重后果，因此早期诊断早期治疗是至关重要的［5］。然而在疾病的早期临床症状不明显，临床医生在诊断类风湿关节炎时，主要要依靠临床表现、X线和检测RF［6］。在1987年美国风湿病协会制定的RA分类标准中，RF是唯一的血清学指标。虽然 RF的灵敏度高，但其特异性却相对较低，不但在结缔组织病中表现阳性，在一些非结缔组织病，如感染、肿瘤等疾病，甚至3%～5%正常人中如健康老年人都可以检测出RF。当临床症状不典型时，如60岁以后起病的 RA，其发病不典型，大关节发病多，肩、下肢关节者仅有关节痛而无关节炎，往往 RF阴性［7］，检测 RF很难为早期诊断提供可靠的依据。对RA进行早期诊断可以减少致残率，提高治愈率。抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）是近年来新发现的一种 RA诊断指标，国外有研究显示，该抗体可早期诊断 RA，甚至可在患者临床症状出现前数年检出RA，其灵敏度和特异性均高于传统诊断指标RF。近年来陆续发现抗核周因子抗体、抗角蛋白抗体、抗 Sa抗体、抗 RA33抗体等，可在 RA发病早期发现，对RA具有较好的灵敏度和很高的特异性，因此对这些抗体的检测具有很高的临床应用价值。有文献报道，除抗RA33抗体外，这些抗体具有相关性，它们有共同的抗原决定簇即瓜氨酸，并提出将 APF、AKA、抗 Sa抗体、抗CCP抗体定义为环瓜氨酸相关的自身免疫系统。目前，可以人工合成高纯度的 CCP，是较理想的抗原底物；且较之 APF、AKA须采用间接免疫荧光法检测，抗 CCP抗体应用ELISA方法，结果判定更易标准化，易于临床推广和应用。2010年 ACR和EULAR重新修订的诊断标准中将抗CCP抗体纳入血清学诊断标准［8］。

AKA是在 RF患者血清中发现的一种能与鼠食管中上段角质层反应的IgG抗体。在疾病早期即可检出，且抗体与疾病严重程度和活动性有一定的相关性［9］，对 RA具有高度特异性。本研究发现 AKA灵敏度相对较高，单项检测其灵敏度高于抗 CCP抗体，达 85.1%。AKA抗体靶抗原存在于人颊黏膜角质透明颗粒中，1995年有学者从人颊黏膜细胞中提取该抗原，AKA与角蛋白丝聚集原或 Filag-grin前体的单克隆抗体可显现相同的条带［10］，故作为 RA诊断指标之一，可用于区分 RA及RF阳性骨关节炎症。AKA是在 RA患者血清中发现的一种能与鼠食管中上段角质层反应的IgG抗体。AKA具有很高的特异性，在疾病早期即可检出，且抗体与疾病严重程度和活动性有一定的相关性。AKA与RA病情严重性和功能障碍有关，其检测 RA的敏感性 40%～70%［11］。在本项研究中 AKA的灵敏度为 89.4%，特异性为85.1%，特异性较抗CCP低，与研究报道相符。但是由于AKA敏感度较高，故一般可以作为临床上早期诊断RA的辅助指标。

本组检测中，抗CCP抗体灵敏度75.3%，特异性93.2%，与Guo等［12］报道的对RA的灵敏度68%，特异性98%结果较接近。RA组抗CCP抗体阳性预测值明显高于非 RA组，在非 RA组中，有 5例抗 CCP抗体检测阳性，其中 3例是 SLE，1例是MCTD，1例是 PSS，抗 CCP抗体和 RF有 3例同时阳性。抗 CCP抗体对RA诊断的灵敏度、特异性和AKA对 RA诊断的灵敏度、特异性分别是75.3%、93.2%和89.4%、85.1%，抗 CCP抗体的灵敏度较AKA低，有显著性差异（P＜0.05），但特异性高于AKA，无显著性差异（P＞0.05），Palosuo等［13］在一组300例正常老年人群中，仅 1例抗 CCP抗体阳性。这说明抗CCP抗体的特异性很高。在 RA组中抗CCP抗体和RF同时阳性 58例，阳性率仅为68.2%；抗CCP抗体或AKA阳性82例，阳性率为96.5%，Youden index比单独检测抗CCP抗体或AKA高，因此联合检测抗 CCP抗体和AKA，任何一项阳性可显著提高对 RA的灵敏度，较单独检测抗CCP抗体或AKA一项对 RA的诊断大为提高。另外抗 CCP抗体在 RA疾病的早期诊断、区分损伤性与非损伤性 RA疾病、在疾病的预后评估等方面都有非常重要的意义，在 RA早期患者的检测中有较好的表达，在活动性病变中其含量可迅速升高。联合检测抗 CCP抗体与 AKA更有利于 RA的早期诊断。

［1］谢冰，钟树奇.抗CCP抗体诊断类风湿性关节炎的最佳临界值.现代检验医学杂志，2012，27（4）：101-103.

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［3］康霞，李欣，杨春莉，等.ECLIA、CMIA、ELISA 3种方法测定血清抗CCP抗体在 RA诊断中的应用.重庆医学，2014，43（11）：1290-1292.

［4］Amett F C，Edworthy S M，Bloch D A，et al.The American rheumatism association 1987 revised criteriafor the classification of rheumatoid arthritis.Arthritis Rheum，1983，31（3）：315-324.

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［8］胡凯，袁光勇，邓文，等.自身抗体检测在类风湿关节炎的临床诊断价值评价.实验与检验医学，2015，33（1）：108-111.

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［13］Palosuo T，Tilvis R，Strandberg T， et al. Filaggrin related antibodies among the aged.Ann Rheum Dis，2003，62（3）：261-263.

（潘子昂编辑）

Anti-CCP and Anti-AKA Application Value in the Diagnosis of Rheumatoid Arthritis

YAO Chun-hong，DENG Jian-ping
（Clinical Laboratory of Huangshi Aikang Hospital，Huangshi 435000，China）

ObjectiveTo compare the diagnostic value of anti-CCP and anti-AKA in rheumatoid arthritis and to explore the early diagnosis of rheumatoid arthritis（RA）.MethodsThe anti-CCP（ELISA）and anti-AKA（indirect immunofluorescence assay）were used in 85 patients with RA and 74 patients with non-RA.ResultsThe sensitivity and specificity of anti-CCP for the diagnosis of RA were 75.3%and 93.2%.The sensitivity and specificity of anti-AKA were 89.4%and 85.1%.There was no significant difference on the sensitivity of between anti-AKA and anti-CCP（P＞0.05）.On the specificity of anti-AKA，the difference was significant（P＜0.05）.The difference on sensitivity of anti-CCP and antAKA combined detection was statistically significant（P＜0.05）.The specificity of anti-CCP and anti-AKA combined was statistically significant（P＜0.05）.Anti-CCP antibodies were higher for positive predictive value，combined detection of both offered high negative predictive value.Youden index on combined detection of anti-CCP or anti-AKA was higher than tested.Anti-CCP and anti-AKA were detected in 58 cases，anti-CCP or AKA positive in 85 cases.The positive rate of anti-CCP or anti-AKA（96.5%）was significantly higher than that（68.2%）.ConclusionAnti-CCP and anti-AKA have higer sensitivity and specificity for diagnosis of RA.Combined detection of anti-CCP and anti-AKA can be used as good diagnostic indicators for early RA patients and RF negative RA patients.

Anti-CCP； AKA； Rheumatoid arthritis

10.11748／bjmy.issn.1006-1703.2016.12.027

2016-09-21；

2016-10-16