ICU重症IgA肾病患者IL-4、C1GALT1及COSMC表达对疾病预后的调控作用分析

邵江炜

（上海市复旦大学附属华山医院北院急重症医学科，上海 201906）

ICU重症IgA肾病患者IL-4、C1GALT1及COSMC表达对疾病预后的调控作用分析

邵江炜

（上海市复旦大学附属华山医院北院急重症医学科，上海 201906）

目的探讨在重症 IgA肾病患者中 IL-4、C1GALT1及 COSMC的 mRNA表达及潜在预后因素对疾病及其预后的调控作用。方法选取本院ICU的重症确诊IgA患者61名，同时选取年龄性别可比的体检健康者65名作为对照，并使用荧光定量PCR测定外周血的单核细胞IL-4、C1GALT1以及COSMC的mRNA表达，同时问卷收集可能影响预后的相关因素，IgA患者随访5年，以随访结束时出现终末期肾病为预后不佳进行研究分析。对相关因素对本病预后的调控作用进行分析讨论。患者均知情同意并签署知情同意书。统计分析采用卡方检验以及 t检验对一般资料及两组基因表达进行比较，使用多因素 Logistics回归模型进行预后因素讨论，使用SPSS17.0统计软件包进行数据分析。结果IgA患者组IL-4 mRNA的表达水平为3.67±0.34，显著高于对照组的1.62±0.16；IgA组的C1GALT1 mRNA以及COSMC mRNA表达水平分别为1.42±0.22和1.34±0.13，出现相应的表达降低；对照组分别为1.61±0.22和1.63±0.18。对ICU重症IgA肾病患者进行预后分析，单因素分析结果提示 IL-4表达增加在预后不良者中的构成显著高于预后良好者，P＜0.05，肾病家族史构成比例在预后不良者中也明显较高。多因素Logistic回归结果提示年龄大于60岁、肌酐超标、高血压、肾病家族史以及 IL-4 mRNA表达增加和C1GALT1 mRNA表达减低均为IgA肾病不良预后的危险因素。结论ICU重症 IgA肾病患者IL-4 mRNA表达增加，同时可见相应的C1GALT1 mRNA以及 COSMC mRNA表达减低，且这三个因素与高龄、肌酐异常、高血压等因素同为重症 IgA的预后不良因素。

IgA肾病； IL-4； C1GALT1； COSMC； 预后因素

IgA肾病是临床上非常常见的原发性肾小球疾病中的一种，会出现肾小球系膜区IgA沉积，或可见以 IgA沉积为主同时可伴有其他免疫球蛋白的沉积出现，临床表现不一［1-2］。目前国内外研究关于 IgA肾病的病因仍不十分明确，除了原发性病变相关机理，继发性 IgA肾病可因肾脏以外的疾病如紫癜性肾炎、HIV感染、肿瘤等引发［3-4］。既往相关研究结果显示IL-4可以通过刺激 B细胞，参与肾损伤以及肾的纤维化，相关因子的过表达同肾小球肾炎、糖尿病肾病以及 IgA肾病的发生也均存在关联，目前比较公认的说法是IL-4参与下调C1GALT1及 COSMC的表达，同时对IgAl铰链区糖基化状态发生影响，因此其间会出现相应的C1GALT1以及 COSMC表达降低，并见低糖基化 IgA1的分泌增加，成为 IL-4参与IgA肾病发生机理的比较合理的解释，但人群研究尚不多［5-6］。本文就 ICU重症IgA肾病患者的 IL-4、C1GALT1及COSMC表达水平进行测定和分析，并就其对本病预后的调控作用进行了讨论。

材料和方法

1 资料

选取本院 2013年 2月至 2015年12月就诊于ICU的重症确诊 IgA患者 61名，同时选取年龄性别可比的体检健康者65名作为对照。

纳入标准：就诊于ICU的重症确诊IgA患者。排除标准：排除过敏性紫癜、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎以及强直性脊柱炎患者及其他肾病患者。IgA诊断标准：患者均存在镜下和（或）肉眼血尿及不同程度的蛋白尿，病理检查肾组织以 IgA为主的免疫球蛋白沉积为特征。所有受试者均知情同意并签署知情同意书。

2 方法

ELISA法测定血清 IL-4水平，并使用荧光标记定量PCR测定外周血单核细胞 IL-4、C1GALT1以及COSMC的mRNA表达；RNA提取，用Nano Drop ND-1000紫外分光度计测定总 RNA浓度、纯度；逆转录（cDNA第一链的合成），随后进行定量 PCR扩增；COSMC、C1GALT1、IL-4引物序列借助Primer 5.0软件设计，由上海英骏生物技术有限公司合成协助提供（C1GALT1：5′-3′正义链GGATACATGAGTGGA

GGAGCA，反义链 CAATGGAGGAACTGTGCGTA； COSMC：5′-3′正义链GTCCAGAGCGTAACCGAGTG，反义链TTCCAAGCATCACACCCTTC；IL-4：5′-3′正义链AGCACTGCCACAAGAACCT，反义链GCTAGTTG GTGGAAGAAGGTAC），PCR扩增程序反应程序使用两步法。同时问卷收集可能影响预后的相关因素。IgA患者随访5年，对相关因素对本病预后的调控作用进行分析讨论。预后评价系统采用多伦多预后评价系统，推算半定量估计进展至终末期肾脏病（end stage renal disease，ESRD）的时间，本研究以随访结束时出现ESRD为预后不佳进行研究分析。

3 统计学处理

采用卡方检验以及 t检验对一般资料和两组基因表达，以及预后因素的单因素分析完成比较检验，使用多因素 Logistics回归模型进行预后因素讨论，所有统计学检验均为双侧检验，检验水准α＝0.05。使用 SPSS17.0统计软件包进行数据分析。

结 果

IgA患者组 IL-4mRNA的表达水平为3.67± 0.34，显著高于对照组的 1.62±0.16，P＜0.01；此外，IgA组的C1GALT1mRNA以及COSMC mRNA表达水平分别为1.42±0.22和1.34±0.13，低于对照组，P＜0.01；如表1所示。

表1 ICU重症 IgA患者 IL-4，C1GALT1以及COSMC mRNA表达水平（±s）

表1 ICU重症 IgA患者 IL-4，C1GALT1以及COSMC mRNA表达水平（±s）

注：*P＜0.05，**P＜0.01

项目 IgA组（n＝61） 对照组（n＝65）1.62±0.16 C1GALT1 mRNA 1.42±0.22 1.61±0.22**COSMC mRNA 1.34±0.13 1.63±0.18 IL-4 mRNA 3.67±0.34****

对 ICU重症 IgA肾病患者进行预后分析，采用多伦多预后评价系统半定量估计肾脏病患者进展至终末期的时间，并以随访结束时出现ESRD为预后不佳进行研究分析。单因素分析结果提示，IL-4表达增加在预后不良者中的构成（100.00%）显著高于预后良好者（67.31%，P＜0.05），肾病家族史构成比例在预后不良者中也明显高于预后良好者（预后不良88.89%；预后良好 46.15%），P＜0.05。详见表2。

表2 ICU重症IgA肾病患者IL-4，C1GALT1以及COSMC mRNA及潜在预后因素的单因素分析［n（%）］

在单因素分析以及单因素回归分析的基础上，对 ICU重症 IgA肾病患者 IL-4，C1GALT1以及COSMC mRNA及潜在预后因素的多因素 Logistic回归分析，结果提示年龄大于 60岁、肌酐超标、高血压、肾病家族史以及IL-4 mRNA表达增加和C1GALT1 mRNA表达减低均为IgA肾病不良预后的危险因素，如表3所示。

表3 ICU重症IgA肾病患者 IL-4，C1GALT1以及 COSMC mRNA及潜在预后因素的多因素回归分析

讨 论

IgA肾病是临床上常见的一种肾小球疾病，探讨其机理对于诊断治疗意义重大［1-4］。IL-4可以作为激活 IL-4／STST6信号通路的因子之一，在活化过程中常常还伴有 C1GALT1以及COSMC的表达降低，此过程在肾病的发生激励中也同样存在，因此 Th2细胞因子 IL-4被认为是 IgA肾病的可能致病因子中的一个，且与众多疾病比如哮喘、肾病等疾病有关［5-9］。在肾脏病变中，IL-4主要是通过对近段肾小管上皮细胞上的相应受体发生作用而造成细胞损伤，进而导致肾脏病理性变化的出现的［5-6］。IgA肾病中是否也存在 IL-4，C1GALT1以及 COSMC的类似情况既往研究尚不多，特别是在人群中的研究更少，本文即选取IgA典型的重症病例，全部收拾对象来自 ICU重症患者，进行了相关研究，同时进行了预后因素的讨论，本研究提示 IgA患者组 IL-4mRNA的表达水平为3.67±0.34，显著高于对照组的 1.62 ±0.16；此外，IgA组的C1GALT1mRNA以及COSMC mRNA表达水平分别低于对照组。原理应该与 IL-4刺激B细胞，会出现C1GALT1以及COSMC表达的降低有关，印证了先前的动物实验以及IL-4，C1GALT1以及COSMC mRNA表达在IgA肾病发生中 的 机理 设 想［11-12］。

IgA肾病临床预后因素复杂多样，目前已经比较公认的预后相关因子比如升高的肌酐、严重的蛋白尿、动脉高血压、异常红细胞尿等等，都与本病的不良预后有关［10-12］。本研究中对 ICU重症 IgA肾病患者进行预后分析，单因素分析结果提示IL-4表达增加在预后不良者中的构成显著高于预后良好者，此外肾病家族史构成比例在预后不良者中也明显高于预后良好者，提示这两个因素可能与IgA肾病的不良预后存在关联，继续进行多因素Logistic回归分析，结果提示年龄大于 60岁、肌酐超标、高血压、肾病家族史以及 IL-4 mRNA表达增加和 C1GALT1 mRNA表达减低均为 IgA肾病不良预后的危险因素；印证了前人关于年龄、相关血清因子以及既往史等因素对本病预后的影响，同时也再一次表明 IL-4，C1GALT1以及COSMC mRNA表达与仅同IgA肾病的发生机理密切关联，而且同该病的不良预后也存在显著的统计学关联，IL-4 mRNA表达的增加会增加不 良预后 的发生 风险，同 时C1GALT1以 及COSMC mRNA的减低也是不良预后发生的危险因素 ［5-6，10-12］。

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（潘子昂编辑）

IL-4，C1GALT1 and COSMC Expression in Severe IgA Nephropathy and the Prognosis Analysis of the Disease

SHAO Jiang-wei
（Department of Emergency and Critical Care Medicine，Huashan Hospital Affiliated to Fudan University，Shanghai 201906，China）

ObjectiveTo study the expression of IL-4，C1GALT1 and COSMC mRNA in patients with severe IgA nephropathy（IgAN）and other potential prognostic factors of the disease.MethodsA total of 61 patients with severe IgAN and 65 controls with good match in age and gender were selected.Quantitative PCR assay was used to analyze mRNA expression of IL-4，C1GALT1 and COSMC.Questionnaires were sent out to collect potentially relevant prognostic factors.Patients were followed for 5 years，the poor prognosis was based on end-stage renal disease（ESRD）.Statistical analysis was performed by chi-square test and t-test.Gene expression was compared by multivariate regression model Logistics prognostic factors using SPSS17.0 statistical package.ResultsThe expression of IL-4 mRNA in the IgA patients was 3.67±0.34，significantly higher than the 1.62±0.16 for controls.C1GALT1 mRNA and COSMC mRNA were 1.42±0.22 and 1.34±0.13 in IgA pantients，controls were 1.61±0.22 and 1.63±0.18.The prognosis analysis showed that IL-4 expression was higher in poor prognosis in patients with severe IgA nephropathy than those who had good prognosis（P ＜0.05）.Family history of kidney disease had higher proportion of poor prognosis.Multivariate Logistic regression results suggested that older than 60 year-old，abnormal creatinine，high blood pressure，family history of kidney disease，as well as increased IL-4 mRNA expression and reduced C1GALT1 mRNA expression were poor prognostic risk factors IgA nephropathy.ConclusionPatients withsevere IgA nephropathy in ICU could have increased IL-4 mRNA expression，reduced C1GALT1 mRNA and COSMC mRNA expression.Poor prognostic factors include age，creatinine level，hypertension and others.

IgA nephropathy； IL-4； C1GALT1； COSMC； Prognostic factors

10.11748／bjmy.issn.1006-1703.2016.12.004

2016-09-09；

2016-09-30