竹醋液防治甜瓜细菌性果斑病药效试验

徐岩岩，彭艳芳，于文青，张温典，崔文杰，李 洁

（河北民族师范学院生物系，河北 承德 067000）

XU Yan-yan，PENG Yan-fang，YU Wen-qing，ZHANG Wen-dian，CUI Wen-jie，LI Jie*（Department of Biology, Hebei Normal University for Nationalities, Chengde 067000, China）

竹醋液防治甜瓜细菌性果斑病药效试验

徐岩岩，彭艳芳，于文青，张温典，崔文杰，李 洁

（河北民族师范学院生物系，河北 承德 067000）

采用抑菌圈法测定竹醋液原液，50%、20%、12.5%、10%体积浓度竹醋液，无菌水和链霉素0.5 mg/mL作对照，对甜瓜（Cucumis melo var. melo）细菌性果斑病菌进行药效试验。结果表明：竹醋液浓度越高，抑菌圈越大，其中以竹醋液原液抑菌效果最佳，其抑菌圈直径可达35.17 mm，50%竹醋液与0.5 mg/mL链霉素抑菌效果相当，10%竹醋液抑菌圈直径最小，为9.13 mm；12.5%竹醋液与硫酸链霉素0.5 mg/mL浸种过的甜瓜种子出芽率和出苗率均较高，且二者效果相当；竹醋液（20%、12.5%）与0.5 mg/mL硫酸链霉素浸种的幼苗长势优且二者相当，但竹醋液处理组幼苗更为矮壮，尤其竹醋液12.5%处理组效果最佳，其平均干物质重量可达0.112 g。

甜瓜；细菌性果斑病；抑菌圈法；竹醋液

甜瓜（Cucumis melo var. melo），又称香瓜，清凉爽口，汁多味甜，深受广大消费者的喜爱。近年来甜瓜细菌性果斑病的发生对甜瓜种植产生了严重的影响，该病在海南、山东、内蒙古、陕西、河南、吉林、甘肃、广西、福建等省、自治区都有不同程度的发生和危害。

细菌性果斑病又称细菌性果腐病，是由燕麦食酸菌西瓜亚种（Acidovorax avenae subsp. citrulli）引起的细菌性病害，是近年由国外传入我国的一种毁灭性病害，该病原细菌是国际检疫性病原细菌之一。该病主要侵染葫芦科植物[1～2]，通过嫁接、农事操作、灌溉等传播，但种子带菌是该病流行发展的主要原因。高温、高湿是甜瓜细菌性果斑病发病的主要条件。由于其可通过种子进行传播，所以蔓延的速度很快，近几年该病已对我国甜瓜产业造成了很大的威胁，这也引起了国内外学者的注意。

目前还没有培育出有效的商业化抗病品种，只存在具有一定程度耐病性的品种，生产上防治细菌性果斑病的药剂多以抗生素类及铜制剂为主，这些药剂在实际应用中导致有害生物抗药性的产生、残留毒性以及环境污染等问题[3～4]。因此筛选高效、低毒、绿色环保、特异性强的药剂是生产健康绿色食品的最佳措施之一。

竹醋液是竹炭烧制过程中的副产品，具有杀菌[5]、杀虫、保鲜除臭、无毒副作用等诸多优异的特性[6]，本次研究采用抑菌圈法，通过测定不同浓度竹醋液对甜瓜细菌性果斑病菌抑菌圈的大小，以及盆栽防效试验，筛选出有效安全的防治浓度。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试病原菌与甜瓜品种 供试病原菌：甜瓜细菌性果腐病菌来源于河北民族师范学院山杏优良品种繁育及产品开发工程技术研究中心。供试品种：超甜八里香，来源于河北省泊头市永红种子有限公司。

1.1.2 供试培养基 LB固体培养基：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，NaCl 10 g，蒸馏水1 000 mL、pH 7.0，琼脂 18 g，用于培养细菌，每瓶100 mL。

LB液体培养基：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，NaCl 10 g，蒸馏水1 000 mL、pH 7.0，用于培养细菌，每瓶100 mL。

1.1.3 供试药剂 硫酸链霉素可溶性粉剂（streptomycin，效价1 000 U/ mg），江西博莱大药厂产品；竹醋液，江阴中炬生物技术有限公司提供。

1.2 试验方法

1.2.1 抑菌圈法室内抑菌效果的测定 挑取单个致病菌菌株，接种在LB培养液中170 r/min振荡培养36 h，无菌水配制成浓度为1×108个/mL的菌悬液。取100mL LB固体培养基微波炉溶化后，待温度降至65℃时，倒到培养皿上，每皿10 m L，冷却，每瓶可倒10皿。将100 μL稀释好的病菌菌悬液加到冷却好的培养基上，涂布均匀，晾干，打孔8 mm×8 mm，每皿1个孔。用移液枪各取100 μL梯度稀释的药剂（竹醋液原液，50%、20%、12.5%、10%浓度竹醋液）滴入每孔中，设置无菌水作对照（CK）（100 μL），链霉素（0.5 mg/mL）（100 μL）处理为另一对照，一共7个处理，每个处理3皿，共21皿。37℃黑暗培养2 d，每隔24 h调查1次，采用十字交叉法测定抑菌圈直径大小。

1.2.2 盆栽防效测定 将甜瓜种子于1×108个/mL的菌悬液中过夜，自然晾干，然后于55 ℃温水中浸泡30 min，再将其放于不同浓度的处理中浸种40 min，无菌水和链霉素作对照。经浸种的甜瓜种子放于无菌水中清洗去除表面残留药剂，然后置于有湿润纱布的培养皿中，于25℃条件下催芽，待胚根长至2 mm时统计发芽率（发芽种子数与催芽种子总数的百分比）。然后将经浸种后催芽的甜瓜种子播种于装有营养土的钵（6 cm×6 cm）中，置于25℃、12 h光照/黑暗的培养室中培养，每个处理50钵，4个处理共200钵。幼苗出土后统计出苗率（出苗数与播种种子总数的百分比）。待幼苗长至5叶1心期时测定全部植株的真叶叶片直径、茎粗、株高、干重量。

1.2.3 数据处理与分析 数据处理采用SPSS 19.0软件，进行一元方差与多重比较分析各处理之间的差异显著性。

2 结果与分析

2.1 不同浓度竹醋液室内毒力试验

由表 1可知，竹醋液不同浓度处理间的抑菌效果差异显著（p＜0.05），其中以竹醋液原液抑菌效果最佳，其抑菌圈直径可达35.17 mm，50%竹醋液与0.5 mg/mL链霉素的抑菌效果相当，10%竹醋液抑菌圈直径最小，为9.13 mm。这说明在药剂的有效使用范围内，竹醋液浓度越高，抑菌圈越大。

2.2 不同浓度竹醋液对甜瓜种子出芽率及出苗率的影响

竹醋液原液与50%浓度抑菌效果最佳，但浓度太高，有烧苗现象；10%竹醋液浓度抑菌圈抑菌效果较差，因此选取了12.5%和20%竹醋液浓度进行出芽和盆栽实验。由表2可知，竹醋液不同浓度处理对甜瓜种子出芽率有显著影响（p＜0.05）。空白对照因为染菌出芽率与出苗率最低，12.5%竹醋液与硫酸链霉素0.5 mg/mL处理的甜瓜种子出芽率和出苗率相当，20%竹醋液浓度较高，浸种后对甜瓜种子的出芽与出苗有一定的抑制作用。

表1 不同浓度竹醋液对甜瓜细菌性果斑病菌的抑菌圈直径的影响Table 1 Effect of different concentrations of bamboo vinegar on diameter of inhibition zone of A. avenae

2.3 不同浓度竹醋液对甜瓜幼苗质量的影响

由表3可知，不同处理浸种的幼苗，其真叶的平

均叶面积、平均株高、平均干重在不同处理间差异显

著（P＜0.05）。竹醋液（20%、12.5%）浸种的幼苗长

势显著优于空白对照，与0.5 mg/mL硫酸链霉素处理

相当，但竹醋液处理组幼苗更为矮壮，其中竹醋液

12.5%处理组效果最佳，其平均干物质重量可达0.112 g。

表2 不同浓度竹醋液对甜瓜种子出芽及出苗的影响Table 2 Effect of different concentrations of bamboo vinegar treated seed on germination and emergence rate

表3 不同浓度竹醋液对甜瓜幼苗质量的影响Table 3 Effect of different concentrations of bamboo vinegar treated seed on seedling quality

3 结论与讨论

近年来开发低毒、低残留、对环境影响小的天然源农药，逐渐成为植物病害防治的热点。竹醋液是竹材热解得到的液体产物，主要成分是水、有机酸、酚类、酮类、醇类等物质。竹醋液是纯天然产物，是一种绿色环保产品，并具有广谱抗菌性，在医药、化工、农业、环保等领域有着非常广泛的用途[7]。本试验研究发现竹醋液对甜瓜细菌性果斑病菌有一定的抑制作用，尤其是经 12.5%的竹醋液浸种后的甜瓜幼苗长势佳，植株矮壮。但较高浓度的竹醋液会对幼苗产生药害，所以在田间施用过程中，应严格控制浸种的浓度和时间，也为竹醋液进一步的在植物病害防治方式的研究以及田间试验奠定了基础。

在大力提倡健康食品的现代，作为一种新型天然原材料的竹醋液的推广应用将有效减少农药用量，缓解有害生物的抗药性，并可减轻农药对环境的毒性压力，有力地促进我国无公害、绿色及有机农业的发展。

[1] 王雪，高洁，张静，等. 63种杀菌剂对西瓜、甜瓜细菌性果斑病菌的室内毒力测定[J]. 吉林农业大学学报，2012，34（6）：612-617，623.

[2] 赵廷昌，孙福在，王兵万. 哈密瓜细菌性果腐病病原菌鉴定[J]. 植物病理学报，2001，31（4）∶ 357-364.

[3] 李国英，任毓忠，张昕，等. 甜瓜细菌性病害药剂防治试验[J]. 中国西瓜甜瓜，2003（3）：12-14.

[4] 胡俊，黄俊霞，刘双平，等. 内蒙古哈密瓜细菌性果斑病的发生特点与防治技术[J]. 中国植保导刊，2006，26（12）：19-20.

[5] 王文桥，许晓梅，刘金朵，等. 竹醋液对几种植物病原真菌的抑制活性[J]. 植物病理学报，2005，35（6）：99-104.

[6] 邬国胜，李敏，应国清.竹醋液抑菌活性及其稳定性研究[J]. 浙江工业大学学报，2011，39（1）：44-46，66.

[7] 倪春耕. 竹醋液抑菌活性及应用技术研究[D]. 合肥，安徽农业大学，2006.

Experiment on Effect of Bamboo Vinegar on Bacterial Fruit Blotch

Bacteriostasis circle trials were conducted on different concentrations (100%, 50%, 20%, 12.5% and 10%) of bamboo vinegar on bacterial fruit blotch by Acidovorax avenae subsp. citrulli of Cucumis melo var. melo with sterile water and 0.5mg/mL of streptomycin as control. The results showed that concentration of bamboo vinegar had positive effect on inhibition zone diameter. It had 35.17mm inhibition zone of 100% of bamboo vinegar, 9.13mm of 10%. Infected C. melo var. meloboo seeds soaking b y 20% and 12.5% of ba mboo vinegar and control demonstrated that germination rate of the later one was better, the same as the control(0.5mg/mL of streptomycin). Seeds treated by 12.5% bamboo vinegar had the best seedling growth.

Cucumis melo var. melo; bacterial fruit blotch; inhibition zone; bamboo vinegar

S652；S463.5

：A

1001-3776（2016）03-0065-03

XU Yan-yan，PENG Yan-fang，YU Wen-qing，ZHANG Wen-dian，CUI Wen-jie，LI Jie*
（Department of Biology, Hebei Normal University for Nationalities, Chengde 067000, China）

2015-12-19；

：2016-03-20

河北省科技厅资助项目（13226511）；承德市财政局资助项目（CZ2013007）；承德市科技局资助项目（20157029）

徐岩岩（1985－），女，山东聊城人，讲师，研究方向为农业微生物学；*通讯作者。