克伦特罗在猪尿液和血液中的残留消除规律研究

2016-12-26朱文渊霍翠梅郝晴晴

畜牧兽医科技信息 2016年7期

关键词：伦特罗尿液血液

朱文渊，霍翠梅，郝晴晴

（山东省济宁市畜牧兽医局，山东济宁 272037）

克伦特罗在猪尿液和血液中的残留消除规律研究

朱文渊，霍翠梅，郝晴晴

（山东省济宁市畜牧兽医局，山东济宁 272037）

在饲料中添加10mg/kg的克伦特罗，使用HPLC法研究了克伦特罗在猪尿液和血液中的残留消除规律。研究结果表明：喂药期前3d尿液和血液中克伦特罗的含量逐步上升，4～15d无明显变化趋势；停药期前3d尿液和血液中克伦特罗的含量急剧下降，4～15d呈平缓下降趋势；喂药期和停药期尿液和血液中克伦特罗的含量变化成正相关，相关系数分别为r=0.64、r=0.9961。因此，使用HPLC法以血液样本代替尿样进行克伦特罗检测是可行的。

克伦特罗；猪；尿液；血液；残留消除

克伦特罗（Clenbuterol，CL）在畜牧养殖业中被非法添加，具有使用最早、使用范围最为广泛、毒性最强的特点。对养殖环节中CL违禁添加的监测是当前畜产品安全监管工作的重点之一，一般以动物尿液做为检测样本。但是，采集尿液时动物群体应激较大，并受限于动物排尿时间不固定，在采样过程中存在诸多不便。动物血液是兽医检测的最主要样本来源，且易于采集。因此，CL在猪尿液和血液中残留消除规律的研究，能为监测过程中以血液样本代替尿液样本提供参考依据，具有较大的应用价值。

1 材料与方法

1.1 试验动物

选择体重、年龄相近的健康公猪（70±2.5kg）10头，饲料为不含任何药物的配合日粮，按既有养殖模式饲养，自由饮水。

1.2 试验设计

在基础日粮中添加10mg/kg的CL，连续饲喂15d，自由采食、饮水。在用药的第1、2、3、4、6、8、10、15天，停药后的1、2、3、4、6、8、10、15d，于早8：00～9：00时，采集100mL尿液、10mL血液，用于测定尿液和血清中的CL含量。

1.3 仪器与试剂

主要仪器、耗材：高效液相色谱仪（Waters2695，配紫外检测器）、氮吹仪（Organomation N-EVAP 24）、SPE柱（Oasis WCX，Waters公司）等。主要试剂：克伦特罗标准品（Waters，98%）、乙腈（色谱纯、迪马），其余试剂均为分析纯。

1.4 检测方法与条件

样品前处理过程按照国标：动物性食品中克伦特罗残留量的测定（GB/T 5009.192-2003）操作，色谱条件参考姚开薇等（2011）、王琦等（2011）的条件进行调整，具体如下：色谱柱：waters sunfire C18柱（150×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈30%+0.02mol/L乙酸铵70%（以体积百分浓度计）；流速1mL/min；上样体积：10μL；检测温度：室温；检测波长：240nm。

1.5 数据处理

结果计算使用waters Empower2.0，相关性分析使用Excel软件。

2 结果与讨论

2.1 不同用药期猪尿液、血清中CL含量变化规律

如表1所示：在整个用药期，尿液中CL浓度在903～1542 ng/mL之间，血清中CL浓度在15.1～27.9 ng/mL之间。饲喂克伦特罗1d后，血清和尿液中均可检出较高浓度的CL，而且在前3d有逐步升高的趋势，这与李慧（2005）的研究结果相同。喂药期3～15d血清和尿液中CL浓度分别在16.9～27.9ng/mL和1127.3～1542.6ng/mL之间，未呈现明显变化趋势与孙泽祥等（2010）报道的一致。

2.2 不同停药期猪尿液、血清中CL含量变化规律

如表2所示：停药后15d内，尿液中CL浓度从1127.3下降至5.7ng/mL，血清中CL浓度从19.6下降至1.2ng/mL。停药后1～3d，血清和尿液中CL浓度急剧下降。停药3～15d，血清和尿液中CL浓度呈现平缓的下降趋势，特别是血清中，停药6d以后CL浓度仅从1.7ng/mL下降至1.2ng/mL。这一变化趋势和李慧（2005）、孙泽祥等（2010）报道的结果一致。

2.3 血清和尿液中CL含量变化相关性研究

对用药期间血清和尿液中CL含量变化进行相关性分析，r=0.64属于显著正相关。孙泽祥等（2010）研究表明，在猪饲料中添加4mg/kg克伦特罗，在用药1～14d内，血清和尿液中CL含量呈正相关，r=0.9385，其相关性高于本试验。

停药1～15d血清和尿液中CL含量变化呈现出基本一致的变化趋势，对两组数据进行相关性分析r=0.9961，此结果与孙泽祥等（2010）报道的停药后血清和尿液中CL含量呈正相关（r=0.94）的结果一致。