藏猪和大约克夏猪血清中脂代谢相关细胞因子的发育性变化研究

钟志君，洪亮，顾以韧，陶璇，梁艳，杨雪梅，杨跃奎，曾凯，陈晓晖，吕学斌

（1.四川省畜牧科学研究院养猪所，四川成都610066；2.四川省巴中市恩阳区动物疫病预防控制中心，四川巴中636063）

藏猪和大约克夏猪血清中脂代谢相关细胞因子的发育性变化研究

钟志君1，洪亮2，顾以韧1，陶璇1，梁艳1，杨雪梅1，杨跃奎1，曾凯1，陈晓晖1，吕学斌1

（1.四川省畜牧科学研究院养猪所，四川成都610066；2.四川省巴中市恩阳区动物疫病预防控制中心，四川巴中636063）

采用酶联免疫吸附方法（ELISA）检测了2、4、6月龄藏猪和大约克夏猪血清中甘油三酯、瘦素和脂联素含量。结果表明，2、4、6月龄藏猪和大约克夏猪血清中甘油三酯含量分别为26.17 μmol/L和24.25 μmol/L、29.36 μmol/L和37.88 μmol/L、28.39 μmol/L和37.88 μmol/L；瘦素含量分别为2 403.82 ng/L和2 080.21 ng/L、2 513.31 ng/L和2 060.91 ng/L、2 564.75 ng/L和2 068.05 ng/L，脂联素含量分别为78.28 μg/L和104.94 μg/L、94.84 μg/L和129.13 μg/L、95.23 μg/L和103.01 μg/L。试验探索了藏猪和大约克夏猪脂肪代谢相关细胞因子的发育性变化规律和差异，为深入研究猪脂肪沉积机理提供了基础数据。

猪；甘油三酯；瘦素；脂联素

动物体内的脂类代谢在机体的能量平衡上有重要作用。而甘油三酯在脂肪代谢中尤为重要，因为脂肪组织是机体内最大的能量储存组织，能量的平衡很大程度上取决于甘油三酯的合成和分解代谢。瘦素是一种多靶器官蛋白激素，具有广泛的生物学效应，可调节摄食、能量利用、生长、繁殖和免疫等生物学过程[1-3]，其中最突出的功能是作用于下丘脑的体重调节中枢，引起食欲降低，能量消耗增加，从而降低脂肪沉积、抑制体增重[4-5]。脂联素（Adiponctin）是一种脂肪细胞分泌的激素蛋白，是脂肪细胞所分泌的脂肪细胞因子中含量最高的脂肪细胞因子[6]，它以内分泌方式循环于血液中，参与调节糖脂代谢和抵抗炎症反应[7]，增加脂肪酸氧化和减少肝脏葡萄糖合成等生命活动。

本试验以脂肪型的藏猪和瘦肉型的大约克夏猪为研究对象，采用酶联免疫吸附试验方法（ELISA）测定其2、4、6月龄血清中甘油三酯、瘦素和脂联素的含量，探索了脂肪代谢相关细胞因子在两猪种中的规律和差异，为深入研究猪脂肪沉积机理提供了基础数据。

1 材料与方法

1.1 试验动物及采样

试验于2014年3月至2015年6月在四川省畜牧科学研究院科研猪场进行。分别挑选健康的去势藏猪和大约克夏猪各9头组建试验群体，35日龄断奶后用相同的饲料饲喂，到2、4、6月龄时，每个品种随机挑选3头进行屠宰，屠宰前停食24 h，自由饮水。前腔静脉采血，室温放置15 min，4℃3 000 r/min离心10 min后吸取血清。

1.2 ELISA测定甘油三酯、瘦素和脂联素含量

血清中甘油三酯、瘦素和脂联素含量的测定严格按照猪甘油三酯ELISA试剂盒、猪瘦素ELISA试剂盒和猪脂联素ELISA试剂盒操作说明进行：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔和待测样品孔，在酶标包被板上标准品孔中准确加样50 μL，待测样品孔中先加样品稀释液40 μL，然后再加待测样品10 μL（样品最终稀释度为5倍），用封板膜封板后置37℃温育30 min，小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 s后弃去，如此重复5次，拍干。加入酶标试剂50 μL（空白孔除外），37℃温育30 min，再洗板5次后分别加入显色剂A和B各50 μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 min后加终止液50 μL，终止反应（此时蓝色立刻转为黄色）。在加终止液后15 min内用450 nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值），每个样品做3个重复。以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

1.3 统计分析

运用Excel进行数据的统计分析，结果以平均数±标准误表示，平均数间的比较用SigmaPlot 12.0的T-Test程序进行显著性检验。

2 结果与分析

2.1 血清中甘油三酯含量

由图1可知，两个猪种血清中甘油三酯的含量随着月龄的增加有升高的趋势。藏猪2、4、6月龄血清中甘油三酯含量分别为（26.17±0.42）μmol/L、（29.36±1.19）μmol/L和（28.39±1.12）μmol/L，经显著性检验可知，藏猪2月龄与4月龄间的甘油三酯含量达显著差异水平（P<0.05），与6月龄相比差异不显著（P>0.05）；4月龄与6月龄之间差异不显著（P>0.05）。大约克夏猪2、4、6月龄血清中甘油三酯含量分别为（24.25±0.78）μmol/L、（37.88±0.58）μmol/L和（37.88±0.46）μmol/L，且2月龄与4月龄、6月龄相比均达极显著差异水平（P<0.01），而4月龄和6月龄之间差异不显著（P>0.05）。对相同月龄不同品种的血清甘油三酯含量进行比较发现，在2月龄时藏猪和大约克夏猪血清中甘油三酯含量差异达显著水平（P<0.05），4月龄和6月龄时差异达极显著水平（P<0.01）。

图1 藏猪和大约克夏猪血清中甘油三酯含量

2.2 血清中瘦素含量

由图2可知，藏猪2、4、6月龄血清中瘦素含量分别为（2 403.82±35.99）ng/L、（2 513.31±53.79）ng/L和（2 564.75±60.75）ng/L，经显著性检验可知，藏猪2月龄与4月龄间的瘦素含量差异不显著（P>0.05），与6月龄间的差异达显著水平（P<0.05），4月龄与6月龄之间差异不显著（P>0.05）。大约克夏猪2、4、6月龄血清中瘦素含量分别为（2 080.21±60.41）ng/L、（2 060.91±47.76）ng/L和（2 068.05±45.55）ng/L，经显著性检验可知，各月龄间的瘦素含量差异均不显著（P>0.05）。对相同月龄不同品种的血清瘦素含量比较发现，在2、4、6月龄时藏猪血清中瘦素含量均极显著高于大约克夏猪（P<0.01）。

图2 藏猪和大约克夏猪血清中瘦素含量

2.3 血清中脂联素含量

由图3可知，藏猪2、4、6月龄血清中脂联素含量分别为（78.28±5.94）μg/L、（94.84±4.24）μg/L和（95.23±2.93）μg/L，经显著性检验可知，藏猪2月龄分别与4月龄、6月龄间的脂联素含量达显著差异水平（P＜0.05），4月龄与6月龄之间差异不显著（P＞0.05）。大约克夏猪2、4、6月龄血清中脂联素含量分别为（104.94±2.91）μg/L、（129.13±5.35）μg/L和（103.01± 6.95）μg/L，经显著性检验可知，2月龄与4月龄间的脂联素含量达极显著差异水平（P＜0.01），与6月龄之间差异不显著（P＞0.05）；4月龄和6月龄间的脂联素含量达极显著差异水平（P＜0.01）。对相同月龄不同品种的血清脂联素含量进行比较发现，在2月龄和4月龄时藏猪血清中脂联素含量均极显著低于大约克夏猪（P＜0.01），6月龄时差异不显著（P＞0.05）。

图3 藏猪和大约克夏猪血清中脂联素含量

3 小结

本研究初步阐明了藏猪和大约克夏猪不同月龄间血清中甘油三酯、瘦素和脂联素的水平的差异，为深入研究猪脂肪沉积能力的形成机理提供了基础数据。但影响猪脂肪沉积的因素是多方面的，要进一步揭示不同猪种脂肪沉积能力差异的形成基础，还有待于更加深入和系统的研究。

[1]李宏睿，孙文夏，潘杰.瘦素功能研究进展[J].中国动脉硬化杂志，2004，12（1）：108-112.

[2]Wauters M,Considine R V,Van Gaal L F.Human leptin：from adipocyte hormone to anendocrine mediator[J].European Journal of Endocrinology,2000,143(3)：293-311.

[3]Berthoud H R.Interactions between the"cognitive"and"metabolic" brain in the control of foodintake[J].J PhysiolBehav,2007,91(5)：486-498.

[4]杨雪芬，蒋宗勇.瘦素对猪脂肪沉积与代谢调控的研究进展[J].中国畜牧兽医，2009，36（8）：18-22.

[5]Münzberg H.Differential leptin access into the brain-a hierarchical organization of hypothalamic leptin target sites[J].J Physiol Behav,2008,94(5)：664-669.

[6]黄业传，贺稚非，李洪军，等.皮下脂肪和肌内脂肪对猪肉风味的作用[J].中国农业科学，2011，44（10）：2118-2130.

[7]Hoehne A,Nuernberg G,Kuehn C,et al.Relationships between intramuscular fat contents,selected carcass traits,and fatty acid profile in bulls using a F2-population[J].Meat Science,2012,90：629-635.

（编辑：富春妮）

合理吃肉有何窍门

【法新社巴黎10月26日电】国际癌症研究机构26日警告称，香肠和火腿等加工过的肉类导致肠癌，红肉“很可能”同样如此。

这是否意味着我们应该不再吃肉？

国际癌症研究机构称，肉类具有“已为人所知的健康益处”。

该机构称，并不知道安全的肉类摄入量是多少，甚至是否存在此种限量。

其他专家指出，肉类是锌、蛋白质、维生素B12以及铁等重要营养成分的良好来源。肉类中的铁比植物中的铁更易为人类吸收。

英国癌症研究会流行病学家蒂姆·基说：“这一论断并不意味着你需要停止摄入任何红肉和加工过的肉类。但如果你肉吃得太多，也许就要想一想减少摄入量。你可以试着在晚餐时吃鱼，而不是火腿，或者午餐时来一份豆子沙拉，而不是培根生菜番茄三明治。”

伦敦大学国王学院营养学教授汤姆·桑德斯说，通常的膳食建议是，限制红肉摄入，每周一两次，相当于大约两份牛排或三个汉堡。

他说：“问题在于，食物不像烟草—我们总得吃点什么吧。”

【美国石英财经网站10月27日报道】题：如果你不愿为了防止患癌而不吃肉，那么你应该如何合理摄入肉类？

“合理的”肉类摄入量是多少？要回答这个问题可不简单。我们所了解的只是，摄入红肉和加工过的肉类越少，患癌风险越小。

但如果培根爱好者戒不掉这一口，也许听一听英国政府的建议是值得的。试着将你每天的红肉和加工过的肉类总摄入量减至70克以下。还应该指出的是，没有明显的证据表明，新鲜白肉—火鸡肉、鸡肉或鱼肉—与任何种类的癌症有联系。

因此，尽管各种新闻满天飞，要保持健康，建议始终如一：摄入足够多纤维、水果和蔬菜；减少摄入红肉、加工过的肉类和盐；限制酒精摄入量。要过上健康生活，适度仍是一种美德。

（转自参考消息[N]，2015-10-28）

The Research on Developmental Changes of Lipid Metabolism Related Cytokines in Serum of Tibetan and Yorkshire Pigs

ZHONG Zhijun1,HONG Liang2,GU Yiren1,TAO Xuan1,LIANG Yan1,YANG Xuemei1, YANG Yuekui1,ZENG Kai1,CHEN Xiaohui1,LV Xuebin1
(1.Sichuan Animal Science Academy,Chengdu 610066,China; 2.Bazhong Enyang Animal Disease Control Center,Bazhong 636063,China)

The triglycerides,leptin and adiponectin content in serum of the 2,4,6 months old of Tibetan and Yorkshire pigs were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).The results showed that the triglycerides content in the serum of 2,4,6 months old of Tibetan and Yorkshires pigs respectively were 26.17 μmol/L and 24.25 μmol/L,29.36 μmol/L and 37.88 μmol/L,28.39 μmol/L and 37.88 μmol/L.The leptin content respectively were 2 403.82 ng/L and 2 080.21 ng/L,2 513.31 ng/L and 2 060.91 ng/L,2 564.75 ng/L and 2 068.05 ng/L.The adiponectin content respectively were 78.28 μg/L and 104.94 μg/L,94.84 μg/L and 129.13 μg/L,95.23 μg/L and 103.01 μg/L.Our study explored the developmental changes of lipid metabolism related cytokines of two pig breeds,and provided basic data for the further study of the lipormetabolism mechanism.

pig;triglycerides;leptin;adiponectin

S828.8

A

1002-1957(2016)01-0065-03

2016-01-04

四川省基本科研业务费专项资金（SASA2013B02）

钟志君（1985-），男，四川德阳人，研究实习员，硕士，主要从事猪的遗传育种研究工作.E-mail：378885733＠qq.com

吕学斌（1965-），男，四川成都人，研究员，博士，主要从事猪的遗传育种研究工作.E-mail：lvxuebin＠21cn.com