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风湿免疫病患者的血清可溶性补体受体2水平变化及应用价值

2016-12-10曾惠芬沈明静

标记免疫分析与临床 2016年11期
关键词:活动期风湿病患者

曾惠芬,刘 芳,缪 蕙,刘 玺,沈明静

(深圳市龙岗中心医院,广东深圳518000)

风湿免疫病患者的血清可溶性补体受体2水平变化及应用价值

曾惠芬,刘 芳,缪 蕙,刘 玺,沈明静

(深圳市龙岗中心医院,广东深圳518000)

目的 探讨风湿免疫病患者的血清可溶性补体受体2(sCR2)水平变化及应用价值。方法 随机选取2013年3月至2016年3月我院收治的风湿免疫病患者45例,将这些患者作为研究组,另选取同期来我院进行体检的健康人员40例为对照组,运用固相的ELISA法对两组人员的sCR2浓度进行测定,然后对两组人员的血清sCR2水平、研究组中RA和SLE患者的血清sCR2水平和相关指标的相关性及RA中处于活动期和非活动期患者的血清sCR2水平进行统计分析。结果 组内比较,研究组中RA和SLE患者的血清sCR2水平之间的差异不具有统计学意义(P>0.05);组间比较,研究组中RA和SLE患者的血清sCR2水平均显著低于对照组(P<0.05)。RA患者的血清sCR2和RF水平无相关性;SLE患者的血清sCR2和C3水平无相关性。RA中处于活动期患者的血清sCR2水平显著低于非活动期患者(P<0.05)。结论

风湿免疫病; 血清可溶性补体受体2; 水平变化; 应用价值

风湿免疫病属于一种自身免疫病,和人类白细胞特异性抗原密切相关,存在大量免疫复合体及抗体,对人类健康造成了严重危害,常见类风湿关节炎(RA)和系统性红斑狼疮(SLE)两种类型[1]。sCR2属于一种单链表面糖蛋白,能够对过度的炎症及免疫反应进行对抗[2]。但是,现阶段,国内还没有风湿免疫病患者血清sCR2水平的变化及应用价值的相关报道[3]。本研究对2013年3月至2016年3月我

院收治的风湿免疫病患者45例和进行体检的健康人员40例的临床资料进行了统计分析,探讨了风湿免疫病患者的血清可溶性补体受体2(sCR2)水平变化及应用价值,现报道如下。

资料与方法

1 一般资料

随机选取2013年3月至2016年3月我院收治的风湿免疫病患者45例,所有患者均符合美国风湿病协会(ARA)制定的RA及 SLE的相关诊断标准[4],均知情同意。其中男性患者3例,女性患者42例,年龄31~63岁,平均年龄为46.9±14.6岁。在疾病类型方面,29例患者为RA,其中20例患者处于活动期,9例患者处于非活动期;16例患者为SLE。将这些患者作为研究组,另选取同期来我院进行体检的健康人员40例为对照组,其中男性患者6例,女性患者34例,年龄30~62岁,平均年龄45.1± 14.2岁。两组患者各基线资料比较差异均不具有统计学意义(P>0.05),具有可比性。见表1。

表1 两组患者各基线资料比较

2 方法

清晨将两组人员的空腹静脉血采集下来,采用瑞士帝肯公司生产的Rainbow星酶标仪,应用美国RaidBio公司生产的sCR2双抗体夹心酶联免疫吸附试验试剂盒,运用固相的ELISA法对两组人员的sCR2浓度进行测定。同时,将两组患者的其中3mL静脉血抽取出来,在血清管中放置血清,放置前对其进行离心,然后冻存在冰箱中,冰箱温度为-80℃。实验前先对试剂盒和冻存的血清标本的温度进行平衡,使其达到室温。将已包被抗体的酶标版取出来,位置为sCR2试剂盒,将sCR2标准品及血清加入到每孔中,剂量为20μL,同时将抗人sCR2抗体工作液依次加入到每孔中,剂量为100μL,室温下将液体甩干,时长为0.5h,然后进行5次洗涤;将抗人sCR2 POD依次加入到每孔中,剂量为150μL,室温下进行温育,时长为20min,然后进行5次洗涤;将TMB显色液依次加入到每孔中,剂量为100μL,室温下进行温育,时长为20min;将Stop Solution终止液依次加入到每孔中,剂量为50μL,采用酶标仪对A值进行检测,酶标仪波长为450nm,将浓度计算出来。将横坐标设定为sCR2的标准品浓度,将纵坐标设定为A值,将标准曲线(已知二者之间是多项式关系)做出来。依据多形式方程和各样本A值将sCR2水平计算出来。

3 统计学分析

结 果

1 两组人员的血清sCR2水平比较

组内比较,研究组中RA和SLE患者的血清sCR2水平之间的差异不具有统计学意义(P>0.05);组间比较,研究组中RA和SLE患者的血清sCR2水平均低于对照组(P<0.05),见表2。

表2 两组人员的血清sCR2水平比较(μg/L,±s)

表2 两组人员的血清sCR2水平比较(μg/L,±s)

注:与同组SLE患者比较,#P<0.05;与对照组比较,*P<0.05

组别分类例数sCR2研究组RA29162.1±21.4*#SLE16131.5±27.3*对照组40315.5±61.3

2 研究组中RA和SLE患者的血清sCR2水平和相关指标的相关性

RA患者的血清sCR2和RF水平无相关性;SLE患者的血清sCR2和C3水平也无相关性。

3 RA中处于活动期和非活动期患者的血清sCR2水平比较

RA中处于活动期患者的血清sCR2水平显著低于非活动期患者(P<0.05),见表3。

表3 RA中处于活动期和非活动期患者的血清sCR2水平比较(μg/L,±s)

表3 RA中处于活动期和非活动期患者的血清sCR2水平比较(μg/L,±s)

注:与同组非活动期患者比较,#P<0.05

分类例数sCR2活动期20129.4±43.3#非活动期9231.5±21.2

讨 论

sCR2分布的主要场合为所有成熟滤泡树突状细胞及B细胞上,一些T细胞系的原始细胞及上皮细胞上也是其在一些情况下存在的场合,有膜型CR2和可溶型CR2两种形式,后者只具有前者胞外的活性部位,能够和后者对配体进行竞争[5-7]。风湿免疫病属于一种自身免疫性疾病,常见RA和SLE两种类型,主要临床特征为T细胞及B细胞功能障碍、免疫复合物沉积等。自身免疫病在B淋巴细胞高度活化产生自身抗体的情况下发生,其中一个极为重要的因素就是T淋巴细胞无法有效调控B淋巴细胞[8-10]。本研究结果表明,组内比较,研究组中RA和SLE患者的血清sCR2水平的差异不具有统计学意义(P>0.05);组间比较,研究组中RA和SLE患者的血清sCR2水平均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),充分说明了疾病本身直接而深刻地影响着血清sCR2的减少,其一方面会降低血清sCR2水平,另一方面还能够有效排除掉不同性别及年龄组之间的差异。在被免疫复合物及B细胞受体吞噬的C2d的作用下,B细胞被激活,进而促进 B细胞表面CR2浓度的降低。因此,相关医学学者认为[11-12],血浆sCR2的清除在循环免疫复合物吞噬的C3d的作用下增加、B细胞激活两个方面降低了血清 sCR2水平。sCR2从细胞表面向细胞质中脱落,属于CR2糖蛋白的细胞外部分。将健康受试者和RA患者的外周血中的T细胞及B细胞收集起来,然后对其进行细胞培养,最后深入分析CR2的脱落,结果表明,免疫复合物不断清除sCR2是RA患者血清sCR2水平降低的主要原因。同时,sCR2对体内免疫复合物的协助清除及对B细胞功能的调节作用在其水平降低的情况下减弱,进而促进自身免疫病发展速度的极大加快。从这里我们可以看出,在自身免疫病的发生发展中,sCR2发挥着极为重要的作用。

sCR2能够和膜型CR2对配体进行竞争,从而将抗原结合膜型CR2的现象阻断,对过度的炎症及免疫反应进行对抗,使损害机体的现象得到有效的预防和避免[11]。相关动物实验研究结果显示[13],重组sCR2一方面能够在较低的浓度下将有效作用充分发挥出来,另一方面也能够将CR的功能及活性结构有效保留下来。从这里我们可以看出,临床在治疗自身免疫病的过程中,sCR2可能发挥着积极有效的作用。本研究结果表明,分析RA患者的血清sCR2水平和RF浓度的相关性,结果表明,二者无相关性;分析SLE患者的血清sCR2水平和C3浓度的相关性,结果表明,二者也无相关性。RA中处于活动期患者的血清sCR2水平显著低于非活动期患者(P<0.05),充分说明了RA的活动度直接而深刻地影响着血清 sCR2水平。患者血清sCR2浓度在疾病活动期显著降低,无法对炎症及免疫反应进行充分的对抗,从而加重病情。因此,临床普遍认为[14],血清sCR2水平可能在一定程度上影响着自身免疫病的活动程度。

综上所述,风湿免疫病患者的血清sCR2水平较低,可能在一定程度上影响到疾病的活动程度,值得临床充分重视。

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(李 凌编辑)

Soluble Complement Receptor 2 Level and Clinical Value in Patients with Rheumatologic Disease

ZENG Hui-fen,LIU Fang,MIU Hui,LIU Xi,SHEN Ming-jing
(Longgang Shenzhen Central Hospital,Shenzhen 518000,China)

Objective To investigate the serum levels of soluble complement receptor 2(sCR2)level and application value in patients with rheumatologic disease.Methods A total of 45 patients with rheumatologic disease were randomly selected,these patients were regarded as the study group,and the other 40 healthy subjects were selected as the control group.sCR2 concentration of the two groups were measured by solid phase the ELISA method.sCR2 levels in RA and SLE and sCR2 levels of active and inactive stage of RA were analyzed.Results sCR2 levels between RA and of SLE in the study group showed no differences(P>0.05).sCR2 levels between the study group and the control group were statistically different(P<0.05).The serum sCR2 levels and rheumatoid factor in RA patients showed no correlation.The serum sCR2 levels and C3 concentration of SLE patients showed no correlation.The serum sCR2 level in active RA patients was significantly lower than non-active patients(P<0.05).Conclusion The serum sCR2 levels in patients with rheumatologic disease are decreased.,Our study suggests there might be a negative correction between sCR2 and active level of rheumatoid arthritis.

Rheumatological disease; Serum levels of soluble complement receptor 2; Levels;Application value

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.11.025

2016-04-20;

2016-09-28

曾惠芬(1982—),女,硕士,主治医师,主要从事风湿免疫方面的研究。Tel:18928761935;E-mail:zenghuifen82@163.com

风湿免疫病患者的血清sCR2水平较低,可能在一定程度上影响到疾病的活动程度。

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