中药苏叶与苏梗中黄酮含量测定

钟优艳，陈连国，王 琼

(浙江省温州市人民医院，浙江温州 325000)



中药苏叶与苏梗中黄酮含量测定

钟优艳，陈连国*，王 琼

(浙江省温州市人民医院，浙江温州 325000)

[目的]建立苏叶和苏梗中黄酮含量测定的紫外分光光度法。[方法]以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法在510 nm处分别测定苏叶和苏梗中的总黄酮含量。[结果]苏叶、苏梗中总黄酮的含量分别为57.174 3、3.850 2 mg/g，总黄酮提取率分别为5.72%、0.39%，苏叶中总黄酮含量远高于苏梗中总黄酮含量。[结论]对于研究紫苏中黄酮类化合物，苏叶更具有研究价值。

苏叶；苏梗；黄酮含量；紫外分光光度法

紫苏为我国传统中药，全株均有食用和药用价值，主要以叶、梗、果实入药。其中苏叶辛温发散，解表散寒，行气和胃，用于风寒感冒、咳嗽呕恶、妊娠呕吐、鱼蟹中毒等。苏梗辛温，理气宽中，止痛、安胎，用于胸膈痞闷、胃脘疼痛、嗳气呕吐、胎动不安等[1]。紫苏可开发出多种保健食品，在医药、食品工业上具有广泛的用途，前景十分广阔[2-3]。紫苏中黄酮含量较高，是紫苏抗氧化、抗炎、抗过敏和抑菌的主要活性成分[4]。目前，国内外对苏叶的研究主要集中在紫苏色素、紫苏精油等方面[5-6]，而对苏叶黄酮的研究较少。笔者以苏叶和苏梗为原料，采用水浴加热回流的方法分别提取两者的总黄酮，并将芦丁作为对照品，以未加任何显色试剂的供试品溶液作参比，采用紫外分光光度法在510 nm处测定其吸光度[7]，最后计算苏叶和苏梗提取液中总黄酮的含量，并进行比较分析，以期为紫苏的进一步开发利用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料 紫苏采自浙江温州，采收后干燥备用；芦丁(化学对照品)来源于中国药品生物制品检定所；无水乙醇(分析纯)购自上海联试化工试剂有限公司；亚硝酸氢钠、硝酸铝和氢氧化钠均为分析纯；电子天平AL204(梅特勒—托利多仪器有限公司，上海)；紫外可见光谱仪HP8453(上海捷辰仪器有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 标准溶液的配制。精密称取0.053 g芦丁，置于50 mL容量瓶中，加70%乙醇振荡溶解并定容，摇匀，得到浓度为1.06 mg/mL的芦丁标准溶液，备用。

1.2.2 供试品溶液的制备。将苏叶剪碎，称取5.0 g，药材和50%乙醇以1∶30的比例加入到250 mL圆底烧瓶中，室温浸泡60 min后，于80 ℃加热回流提取60 min，抽滤，滤去滤渣，至滤液无沉淀物；再加热回流60 min，抽滤，滤去滤渣，至滤液无沉淀物，得紫苏叶供试品。紫苏梗供试品的制备过程与紫苏叶的相同。

1.2.3 参比溶液的制备。

1.2.3.1 参比溶液a的制备。精密移取苏叶、苏梗供试品溶液各1 mL至25 mL容量瓶，加水至刻度，摇匀，放置。

1.2.3.2 参比溶液b的制备。精密移取1.2 mL苏叶供试品溶液、苏梗供试品溶液各6份，各加0.106 mg/mL标准品溶液9.7、9.8、9.9、10.0、10.1、10.2 mL，分别稀释至50 mL。

1.2.4 标准曲线的绘制。用移液管准确量取“1.2.1”芦丁标准对照液0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50、1.75、2.00、2.25 mL，分别置于25 mL容量瓶中，各加水6 mL、5% NaNO2溶液1 mL，摇匀，静置6 min，加10% Al(NO3)3溶液1 mL，摇匀，静置6 min，加5% NaOH试液10 mL，再加水至刻度，摇匀，放置15 min。然后以溶剂及显色试剂为参比溶液，在510 nm处测吸光度A，以吸光度A为纵坐标、芦丁溶液浓度C(μg/mL)为横坐标绘制标准曲线。

1.2.5 方法学考察。

1.2.5.1 精密度试验。精密移取1.06 mg/mL芦丁标准溶液1 mL，加入至25 mL容量瓶中，加6 mL水、5% NaNO2溶液1 mL，摇匀，静置6 min，加10% Al(NO3)3溶液1 mL，摇匀，静置6 min，加5% NaOH试液10 mL，再加水至刻度，摇匀，放置15 min。然后以溶剂及显色试剂为参比溶液，用紫外分光光度法在510 nm处测吸光度A，重复测样6次，并计算RSD值。

1.2.5.2 稳定性试验。精密移取苏叶供试品溶液、苏梗供试品溶液各1 mL，按“1.2.5.1”操作。并于15、30、45、60、75、90 min测定6次，得吸光度A，计算RSD值。

1.2.5.3 重现性试验。精密移取苏叶供试品溶液、苏梗供试品溶液各1 mL，按“1.2.5.1”操作。以“1.2.3.1”制备的参比溶液作对照，将配备好的溶液于紫外分光光度计上测定6次，得吸光度A，分别计算苏叶和苏梗中的黄酮含量及其RSD。

1.2.5.4 加样回收率试验。将1.06 mg/mL的标准品溶液稀释10倍，精密移取1.2 mL苏叶供试品溶液6份，各加0.106 mg/mL标准品溶液9.7、9.8、9.9、10.0、10.1、10.2 mL，分别加入至50 mL容量瓶中，加6 mL水、5% NaNO2溶液1 mL，摇匀，静置6 min，加10% Al(NO3)3溶液1 mL，摇匀，静置6 min，加5% NaOH试液10 mL，再加水至刻度，摇匀，放置15 min。以“1.2.3.2”制备的参比溶液b作对照，于510 nm处测定吸光度A，计算回收率。苏梗供试品溶液的处理同上。

2 结果与分析

2.1 标准曲线的绘制 以吸光度A为纵坐标、芦丁溶液浓度C(μg/mL)为横坐标绘制标准曲线，得出标准曲线方程为Y=9.407 2X+0.009 1(R2=0.999 5)，表明芦丁浓度在10.6～95.4 μg/mL范围内与吸光度呈较好的线性关系。

2.2 精密度试验 按照“1.2.5.1”操作，测得吸光度的平均值为0.404 2，RSD=0.4%，表明仪器精密度较好。

2.3 稳定性试验 按照“1.2.5.2”操作，计算得苏叶供试品溶液、苏梗供试品溶液的吸光度的RSD分别为1.5%、2.8%，表明苏叶供试品溶液、苏梗供试品溶液在室温下90 min内稳定。

2.4 重复性试验 平行样6份，定量测得5 g苏叶、5 g苏梗中提取的总黄酮平均含量分别为285.871 5、19.251 2 mg，则苏叶、苏梗中总黄酮含量分别为57.174 3、3.850 2 mg/g，总黄酮提取率分别为5.72%、0.39%，苏叶、苏梗中总黄酮提取率的RSD分别为1.2%、2.9%，表明该提取方法的重现性良好。

2.5 加样回收率试验 由表1～2可知，苏叶、苏梗中总黄酮的平均回收率分别为100.5%、101.0%，RSD分别为0.9%、1.4%，可见该方法的回收率较为理想，方法可行。

表1 苏叶中总黄酮加样回收率测定结果

表2 苏梗中总黄酮加样回收率测定结果

3 小结与讨论

试验结果显示，苏叶、苏梗中总黄酮的含量分别为57.174 3、3.850 2 mg/g，总黄酮提取率分别为5.72%、0.39%，可见苏叶中总黄酮提取率远高于苏梗中总黄酮提取率。因此对于研究紫苏中黄酮类化合物，苏叶比苏梗具有更大的开发价值和应用前景。

该试验以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法测定紫苏叶和紫苏梗中总黄酮含量，设备要求不高，操作简便易行；以未加所有显色试剂的供试品溶液作为参比溶液，消除了供试液本身的干扰，使吸光度测定值稳定，结果准确可靠。因此，该方法可用于紫苏中总黄酮的含量测定。

[1] 崔国静，玉亭，贺蔷．紫苏的用药部位及性能特点[J]．首都医药，2013(15)：50.

[2] 张洪，黄建韶，赵东海．紫苏营养成分的研究[J]．食品与机械，2006，22(2)：41-43.

[3] 杨晓静，王立众，李和．紫苏子油不皂化物的分离与分析[J]．中国油料作物学报，2006，28(2)：207-209.

[4] 刘娟，雷焱霖，唐友红，等．紫苏的化学成分与生物活性研究进展[J]．时珍国医国药，2010，21(7)：1768-1769.

[5] 刘建辉，陈兰贵．紫苏油中主要化学成分的分离和鉴定[J]．香料香精化妆品，1998(1)：19-20.

[6] YOSHIDA K，KAMEDA K，KONDO T．Diglucuronoflavones from purple leaves ofPerillaocimoides[J]．Phytochemistry，1993，33(4)：917-919.

[7] 郑杭生，李计萍，韩炜，等．紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点[J]．中成药，2008，30(9)：1364-1365.

Determination on Flavone Content in Traditional Chinese Medicine Folium Perillae and Caulis Perllae

ZHONG You-yan, CHEN Lian-guo*, WANG Qiong

(Wenzhou Municipal People’s Hospital, Wenzhou, Zhejiang 325000)

[Objective] The aim was to establish ultraviolet spectrophotometry for determining flavone content in folium perillae and caulis perllae. [Method] With rutin as control, flavone content in folium perillae and caulis perllae was determined at 510 nm by ultraviolet spectrophotometry. [Result] Total flavone in folium perillae and caulis perllae were 57.174 3, 3.850 2 mg/g, extraction rate were 5.72%, 0.39%, total flavone content in folium perillae was higher than that in caulis perllae. [Conclusion] Folium perillae has more research value in research about flavonoid.

Folium perillae; Caulis perllae; Flavone content; Ultraviolet spectrophotometry

钟优艳(1986-)，女，浙江温州人，初级药师，从事药用植物学研究。*通讯作者，初级药师，硕士，从事中药药理研究。

2016-08-31

S 567.21+9

A

0517-6611(2016)31-0112-02