马齿苋提取物对玉米蚜的拒食活性

邹 玉， 邵 鸣， 王 涛， 许 龙,2*

(1.佳木斯大学生命科学学院，黑龙江佳木斯 154007；2.佳木斯大学应用昆虫研究所，黑龙江佳木斯 154007)



马齿苋提取物对玉米蚜的拒食活性

邹 玉1， 邵 鸣1， 王 涛1， 许 龙1,2*

(1.佳木斯大学生命科学学院，黑龙江佳木斯 154007；2.佳木斯大学应用昆虫研究所，黑龙江佳木斯 154007)

[目的]探究不同条件下马齿苋石油醚提取物对玉米蚜的拒食活性。[方法]采用单因素试验和正交试验，研究不同浓度、温度和时间条件下马齿苋提取物对玉米蚜的拒食率。[结果]提取物浓度为100 mg/mL、温度为25 ℃、时间为48 h时马齿苋提取物对玉米蚜的拒食活性最高。提取物浓度对马齿苋拒食活性影响最大，其次为时间因素。[结论]试验结果为开发以马齿苋为原料的植物性杀虫剂提供了理论依据。

马齿苋；提取物；玉米蚜；拒食活性

马齿苋(PortulacaoleraceaL.)属马齿苋科的肉质野生草本植物，又称马齿草、五行草、长命菜、蚂蚱菜、马舌菜等，在我国分布广泛，是常见的中草药之一。医术记载，马齿苋性味酸寒，具有清热解毒、散学消肿、止痢之功效[1]，主治热痢脓血、热淋、带下、痛肿恶毒、丹毒[2]。现代药理试验也证明了马齿苋具有很强的抑菌作用[3]。此外，马齿苋还有防治农业害虫的功效，《中国土农药志》中就有记载[4]。

玉米蚜[Rhopalosiphummaidis(Fitch)]为蚜科昆虫，世界性害虫，主要为害玉米、大麦、小麦等禾谷类农作物，其成、若蚜通过刺吸植物韧皮部汁液对农作物直接产生危害，同时也是玉米矮花叶病毒(MDMV)、玉米叶斑病毒(MMSV)、玉米花叶条纹病毒(MMSV)等植物病毒的传播载体，取食时分泌的蜜露分布于植物叶片表面，影响植物光合作用的同时还能引起煤污病[5-9]。玉米蚜对玉米的危害始于抽雄前的雄穗苞内，多集中于雄穗苞、新抽出的雄穗、雄穗柄、旗叶基部和幼嫩的雌穗苞叶上对玉米产生危害，严重时，成、若蚜群集于新抽出和尚未抽出的雄穗上以及正在灌浆的雌穗上吸食，造成雄穗无法散粉，导致籽粒灌浆不实，影响玉米产量。玉米蚜繁殖力高、能迁飞且易产生抗性，防治较为困难。化学方法防治玉米蚜虽然效果显著且使用方便，但会污染环境、破坏生态系统，且易使玉米蚜产生抗药性，植物性杀虫剂防治玉米蚜高效、作用机理多样、不易诱发病虫害抗药性、与环境相容性好、选择性高、对非靶标生物相对安全，已成为新型的无公害农药。鉴于此，笔者研究了马齿苋提取物在不同条件下对玉米蚜的拒食活性，以期为开发以马齿苋为原料的新型植物杀虫剂提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料 玉米蚜采自佳木斯郊区玉米地，经佳木斯大学罗志文副教授鉴定为蚜科玉米蚜(Rhopalosiphummaidis)，野生马齿苋采自佳木斯大学校园内，经佳木斯大学程海涛副教授鉴定为马齿苋科马齿苋(Portulacaoleracea)。

1.2 方法

1.2.1 马齿苋提取物的制备。将马齿苋地上部分自然阴干后，置于干燥箱内50 ℃烘至发脆，用中药粉碎机粉碎并过40目筛制成干粉，称取干粉20 g，加入10倍量石油醚于50 ℃加热3 h后，放入布氏漏斗中抽滤，重复3次，合并3次滤液，将滤液在旋转蒸发仪内减压浓缩成稠膏状,然后将浸提稠膏用50%丙酮稀释定容至60 mL(1 g干粉1 mL)，装入磨口棕色广口瓶密封，置于冰箱中备用。

1.2.2 拒食活性的测定。将供试样品(1 g干粉1 mL)用吐温-80水溶液分别稀释成12.5、25.0、50.0、75.0、100.0 mg/mL，并用吐温-80水溶液稀释后的丙酮溶液作为对照，选取4.5 cm2的玉米叶在处理和对照溶液中分别浸3 s，取出晾干，在其叶背转接20头3～4龄无翅玉米蚜，将以上处理的接虫玉米叶放入培养皿，叶背朝下，滴入蒸馏水保湿，置于恒温培养箱采用不同温度饲养，分别在6、12、24、36和48 h后检查各处理叶片上玉米蚜的栖息数，每次处理重复3次，结果用t检验分析处理与对照组之间的差异显著性，并用SPSS软件对拒食率进行显著性分析。拒食率=(对照叶片虫数-处理叶片虫数)/对照叶片虫数×100%。

1.2.2.1 拒食活性单因素试验。拒食活性测定单因素试验包括提取物浓度、饲养温度和饲养时间，提取物浓度(A):12.5、25.0、50.0、75.0和100.0 mg/mL、饲养温度(B):15、20、25、30和35 ℃、饲养时间(C):6、12、24、36和48 h。每个影响因子进行3次重复性试验，分别计算拒食率，选用3次平均值作为试验参数，确定各因素对试验影响，筛选出单因素试验条件及参数。

1.2.2.2 拒食活性测定正交试验。按照单因素试验结果，选取提取物浓度(A)、培养温度(B)、培养时间(C)3个因素进行拒食活性测定正交优化试验，采用L9(33)正交表设计试验(表1)。

表1 正交试验因素与水平

2 结果与分析

2.1 单因素试验结果2.1.1 提取物浓度对玉米蚜拒食活性的影响 。由表2可知，浓度为12.5～100.0 mg/mL时，处理组与对照组之间均有显著差异，表明该浓度范围内马齿苋提取物对玉米蚜拒食活性良好，随着马齿苋提取物浓度逐渐升高，其对玉米蚜的拒食活性逐渐增强，当浓度为100.0 mg/mL时，拒食率达83.89%。

表2 不同浓度马齿苋提取物对玉米蚜的拒食活性a

Table 2 Different concentrations of purslane extract on the antifeedant activity of corn aphida

提取物浓度Extractconcen-tration∥mg/mL处理虫数Insectnumberoftreatment∥头对照虫数Insectnumberofcontrol∥头拒食率Antifeedantrate∥%12.58.30**23.6763.4625.05.00**15.7067.2350.06.30**22.0069.4075.03.27**14.6377.53100.04.07**25.3183.89

注：a表示饲养时间为24 h、温度为20 ℃时的拒食活性；**表示与对照相比P<0.01。

Note: a stands for antifeedant activity of feeding time 24 h, temperature 20 ℃; ** stands forP<0.01 compared with control.

2.1.2 饲养时间对玉米蚜拒食活性的影响。由表3可知，饲养时间为6 h时，处理与对照组之间差异不显著，表明该时间内马齿苋提取物对玉米蚜拒食活性较差。时间为24～48 h时，处理与对照组之间均有显著差异，表明该时间范围内马齿苋提取物对玉米蚜拒食活性良好，随着饲养时间逐渐增加，马齿苋提取物对玉米蚜拒食活性逐渐增强，时间为48 h时，拒食率为81.99%。

2.1.3 温度对玉米蚜拒食活性的影响。由表4可知，当温度为15～30 ℃时，处理组与对照组之间有显著差异，在该温度范围内，马齿苋提取物对玉米蚜拒食效果较好，当温度为35 ℃时，处理组与对照组之间差异不显著，可能由于该提取物对温度敏感，导致其稳定性降低。

表3 不同饲养时间下马齿苋提取物对玉米蚜拒食活性a

Table 3 Purslane extract in different time on the antifeedant activity of corn aphida

时间Timeh处理虫数Insectnumberoftreatment∥头对照虫数Insectnumberofcontrol∥头拒食率Antifeedantrate∥%613.0021.3339.17126.00*11.0050.45246.30**26.7076.33365.00**23.6778.20483.00**16.6081.99

注：a表示提取物浓度为75 mg/mL、温度为20 ℃时的拒食活性；*表示与对照相比P<0.05,**表示P<0.01。

Note: a stands for antifeedant activity of extract concentration 75 mg/mL, temperature 20 ℃; * stands forP<0.05, ** stands forP<0.01 compared with control group.

表4 不同温度下马齿苋提取物对玉米蚜拒的食活性a

Table 4 Purslane extract under different temperature on antifeedant activity of corn aphida

温度Temperature℃处理虫数Insectnumberoftreatment∥头对照虫数Insectnumberofcontrol∥头拒食率Antifeedantrate∥%154.97**17.6770.09204.27**15.9372.30253.00**17.2378.59306.00**19.3071.16353.3011.1772.45

注：a表示提取物浓度为75 mg/mL、时间为24 h时的拒食活性；**表示与对照相比P<0.01。

Note: a stands for antifeedant activity of extract concentration 75 mg/mL, time 24 h; ** stands forP<0.01 compared with control group.

2.2 正交试验结果 通过正交试验得出，影响马齿苋提取物对玉米蚜拒食活性的因素顺序为A>C>B,即对玉米蚜拒食活性影响最大的因素为提取物浓度，其次为时间，温度对拒食活性影响较小，通过试验确定在A3B2C3条件下，马齿苋干粉提取物对玉米蚜拒食活性最高，即提取物浓度为100 mg/mL、温度为25 ℃、时间为48 h时拒食活性最高(表5)。

表5 正交试验设计与结果

3 结论与讨论

试验结果表明，马齿苋提取物对玉米蚜具有良好的拒食活性，其作为植物性杀虫剂具有良好的开发前景。

影响马齿苋对玉米蚜拒食活性的因素主要有提取物浓度、时间、温度等因素。通过正交试验得出，提取物浓度对其拒食活性影响最大，其次是时间因素，温度对拒食活性影响较小，当提取物浓度为100 mg/mL、温度为25 ℃、时间为48 h时对玉米蚜拒食活性最高。

植物性杀虫剂的活性成分通常为来源于植物体的次生代谢产物，但由于植物次生物质种类多,结构复杂,该试验得到的对玉米蚜具有拒食活性的物质为一类混合物，马齿苋杀虫活性单体物质和杀虫机理仍有待深入研究。此外，马齿苋具有杀虫活性的物质对热不稳定，易受环境因素影响，提高其稳定性也是开发利用马齿苋的关键。

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[2] 江苏新医学院.中药大辞典:上册[M].上海:上海人民出版社,1975.

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Purslane Extract on the Antifeedant Activity of Corn Leaf Aphid

ZOU Yu1, SHAO Ming1, WANG Tao1, XU Long1,2*

(1. School of Life Sciences, Jiamusi University, Jiamusi, Heilongjiang 154007; 2. Institute of Applied Insect, Jiamusi University, Jiamusi, Heilongjiang 154007)

[Objective] The aim was to study on antifeedant activity of purslane petroleum ether extract on corn leaf aphid under different conditions. [Method] Using single factor and orthogonal test, the antifeedant activity of purslane petroleum ether extract on corn leaf aphid under different concentration, temperature and time was studied. [Result] The results showed that under concentration of 100 mg/mL, temperature 25 ℃, time 48 h, the antifeedant activity of purslane petroleum ether extract was the highest. Extract concentration was the key factor influencing the antifeedant activity, followed by time factor. [Conclusion] The study provides theoretical basis for development of vegetable insecticide with purslane as raw material.

Purslane; Extract; Corn leaf aphid; Antifeedant activity

佳木斯大学研究生科技创新项目(LZR2015-008)。

邹玉(1991- )，女，黑龙江佳木斯人，硕士研究生，研究方向：资源昆虫开发与应用。*通讯作者，副教授，硕士生导师，从事昆虫学研究。

2016-08-25

S 435.132

A

0517-6611(2016)31-0094-03