类风湿关节炎患者血清CCN1水平变化及意义

徐京京，赵琳，张晓莉，王晓非

（中国医科大学附属盛京医院，沈阳110004）

类风湿关节炎患者血清CCN1水平变化及意义

徐京京，赵琳，张晓莉，王晓非

（中国医科大学附属盛京医院，沈阳110004）

目的 观察类风湿关节炎（RA）患者血清富含半胱氨酸蛋白61（CCN1）水平变化，并探讨其临床意义。方法 选择RA患者30例作为观察组（RA活动期20例、稳定期10例）、健康体检者20例作为对照组。采用酶联免疫吸附法检测两组血清CCN1水平，收集实验室指标，计算28个关节疾病活动度评分（DAS28）、简化疾病活动性指数（SDAI）评分，用直线相关分析CCN1与相关指标的关系。结果 与对照组比较，观察组血清CCN1水平升高，且RA活动期患者高于RA稳定期患者（P均＜0.05）。RA患者血清CCN1水平与类风湿因子、C反应蛋白、血沉、抗CCP抗体、DAS28评分、SDAI评分呈正相关（r分别为0.423、0.443、0.375、0.364、0.772、0.681，P均＜0.05）。结论 RA患者血清CCN1水平升高，CCN1可能参与了RA的炎症反应过程。

类风湿关节炎；富含半胱氨酸蛋白61；细胞因子

富含半胱氨酸蛋白61（CCN1）是一种动态表达、富含半胱氨酸的分泌性肝素连接蛋白，是生长因子诱导的即刻早期基因产物，在多种细胞中表达，参与调节胞外基质形成、细胞趋化、黏附、增殖、凋亡等［1］。CCN1与结缔组织增生、血管内皮修复、血管新生、肿瘤细胞凋亡密切相关［2］。研究显示，CCN家族部分成员与类风湿关节炎（RA）等结缔组织病发病可能有关［3］。本研究检测RA患者血清CCN1水平，探讨其临床意义。

1　资料与方法

1.1临床资料 选取2015年1～6月本院收治的RA患者30例（观察组），均符合2009年美国风湿病协会／欧洲抗风湿病联盟提出的RA分类标准。其中男3例、女27例，年龄24～53（40±15）岁，RA活动期即28个关节疾病活动度评分（DAS28）＞3.2分20例、RA稳定期即DAS28≤3.2分10例。均排除肿瘤、感染、妊娠及其他自身免疫性疾病，且无严重基础疾病（如肝病、肾功能异常、心功能不全等）。同期选择体检健康者20例作为对照组，男2例、女18例，年龄20～58（41±15）岁。两组性别、年龄比较差异无统计学意义。

1.2血清CCN1及相关指标检测 采集各组入院次日清晨空腹静脉血3 mL，离心后取上清，置PC管中-20℃保存。采用酶联免疫吸附法检测血清CCN1水平，严格按照试剂盒（上海活乐生物技术有限公司）说明书进行操作；用速率散射比浊法检测C反应蛋白（CRP）；魏氏法检测血沉（ESR）；散射免疫比浊法检测类风湿因子（RF）、免疫球蛋白；酶联免疫吸附法检测抗环瓜氨酸多肽抗体（抗CCP抗体）。1.3 DAS28、简化疾病活动性指数（SDAI）计算DAS28＝0.56×28个关节中压痛关节数+0.28×28个关节中肿胀关节数+0.7×ESR+0.014×总体健康评分或视觉模拟评分；SDAI评分＝28个关节中压痛关节数+28个关节中肿胀关节数+患者的总体评分+医生的总体评分+CRP。

1.4统计学方法 采用SPSS18.0统计软件。计量资料用x¯±s表示，多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验；用直线相关分析CCN1水平与相关指标的关系。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组血清CCN1水平及相关实验室指标比较见表1。

2.2RA患者血清CCN1与其他指标的关系 经直线相关分析，RA患者血清CCN1水平与CRP、ESR、RF、抗CCP抗体水平呈正相关（r分别为0.443、0.375、0.423、0.364，P均＜0.05）；与免疫球蛋白无相关性（r＝0.261，P＞0.05）；与DAS28评分、SDAI评分呈正相关（r分别为0.772、0.681，P均＜0.01）。

表1　各组检测指标水平比较（±s）

表1　各组检测指标水平比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05；与RA稳定期比较，＃P＜0.05。

组别nCCN1（ng／L）CRP（mg／L）ESR（mm／h）RF（IU／mL）抗CCP抗体（AU／mL）免疫球蛋白（g／L）对照组201 199.87±135.20观察组302 475.32±1 318.41*38±3635±18338±323501.37±413.7515.47±5.97 RA活动期202 683.86±1 321.36＃52±38＃45±14＃474±363＃703.30±520.24＃17.19±3.73 RA稳定期101 288.67± 557.3310±415±568±3497.50±85.2313.01±8.18

3　讨论

CCN1是CCN家族重要成员，其开放阅读框编码381个氨基酸，包含四组保守独立的模块，四组模块和其他多种因子相互作用，使其在生物体不同组织、细胞和发育阶段中发挥多重生物效应［4］。CCN1广泛存在于人类多种组织器官，但在正常人中表达相对较低。CCN1主要通过与细胞表面分子结合，作为信号转导受体来发挥调节细胞的作用［5］。CCN1具有明显的促有丝分裂活性和趋化性，参与干细胞分化、组织炎症等过程，调节细胞增生、迁移、凋亡。Komatsu等［3］在研究RA和骨关节炎（OA）时证实，在对照组、OA组、RA组中均未检测到CCN3、CCN6，但可检测到CCN1、CCN2、CCN4、CCN5，以CCN1为著，检测部位以软骨、关节液为主。

RA在病理组织学上以炎症细胞渗出、滑膜增殖性改变、血管翳形成为主，与细胞因子介导的免疫炎症损伤、血管增生、滑膜细胞增殖及凋亡异常密切相关。CCN1能够增加炎细胞的趋化和黏附，在炎症因子的刺激下，调节前列腺素、NO、组胺等参与的生物学效应［6，7］。过表达的CCN1会刺激滑膜细胞分泌IL-6、IL-8、IL-17等炎症因子，参与炎症微环境的形成。RA患者滑液中的炎症因子TNF-α、IFN-γ能上调CCN1表达，过表达的CCN1可能通过促进滑膜细胞分裂、抑制滑膜细胞凋亡的作用而促进滑膜细胞增殖，从而参与滑膜细胞的过度增生。另一方面，RA患者成纤维样滑膜细胞（FLS）中CCN1产生增多，促进了FLS增殖，这与CCN1通过αvβ5／Akt／NF-κB信号通路活化IL-6的作用以及IL-17介导相关发病机制有关［8］。

CCN1蛋白能够促进间叶细胞积聚、分化，加速成软骨细胞的标志物即早熟的Ⅱ型胶原表达，使其分化成为软骨细胞，促进硫酸盐的沉积。在骨骼发育方面，CCN1的表达是由Wnt／β-catenin信号途径调节的，虽然详细机制尚未清楚，但是成骨细胞和内皮细胞间存在CCN1和血管内皮生长因子的相互调节网络。在体外，CCN1过表达促进软骨细胞成熟而抑制内源性CCN1功能，导致其成熟障碍［9］。这在RA病变过程中可能发生于血管翳侵蚀软骨、软骨细胞增生等过程。提示CCN1轴在软骨细胞簇形成中起重要作用。

CCN1能够诱导成纤维细胞衰老。研究指出CCN1结合整合素后能诱导成纤维细胞衰老进程，配合CCN1引发DNA损伤反应、激活p53、活化复合物，激活活性氧依赖的p16（INK4A）／pRb通路，导致成纤维细胞衰老，分泌抗纤维化物质和提高抗纤维化基因表达［10］。这无疑为功能组织被瘢痕、纤维组织取代引起的一类疾病提供了新的研究方向，如RA肺间质改变等。

本研究结果提示，RA患者血清CCN1水平明显高于正常人，活动期RA患者CCN1水平更高，且其水平与CRP、ESR、DAS28评分、SDAI评分等RA评估指标相关，提示CCN1与RA炎症反应、活动程度相关，可能在RA炎症反应过程中发挥作用。

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10.3969／j.issn.1002-266X.2016.21.023

R593.22

B

1002-266X（2016）21-0058-02

辽宁省科学技术计划项目（2014225017）。

王晓非（E-mail：1361611840＠qq.com）

（2016-01-18）