血清抗体与快速尿素酶检测幽门螺杆菌感染的灵敏度及特异性分析

周小微，李安全

（福建医科大学附属南平市第一医院检验科，福建南平353000）

血清抗体与快速尿素酶检测幽门螺杆菌感染的灵敏度及特异性分析

周小微，李安全

（福建医科大学附属南平市第一医院检验科，福建南平353000）

目的 比较血清抗体和快速尿素酶检测幽门螺杆菌（Hp）感染的灵敏度及特异性。方法 选取2014年5月至2015年12月该院门诊及住院患者100例，行胃镜检查时在内镜指导下活检胃窦黏膜组织1块立即进行快速尿素酶检查，随后进行血清抗体检测。以病理组织学检查结果阳性作为对照，比较2种方法检测Hp感染的灵敏度、特异性。结果 血清抗体检查Hp阳性率明显高于快速尿素酶，血清抗体检测Hp感染的灵敏度明显高于快速尿素酶，差异均有统计学意义（P＜0.05）。血清抗体检测Hp感染的特异性与快速尿素酶相当。结论 血清抗体检测Hp感染的灵敏度较高，特异性与快速尿素酶相当，是一种普查Hp感染的较理想的检测方法，但快速尿素酶检测费用低、费时少，适合经济水平低及门诊患者的检测。

螺杆菌，幽门； 抗体； 尿素酶； 实验室技术和方法

幽门螺杆菌（helicobacter pylori，Hp）不仅是消化道溃疡、慢性胃炎、胃癌、功能性腹痛等疾病的主要病因，还是胰腺癌、肝硬化，甚至肝癌等疾病的病因[1-2]。目前，诊断Hp感染的方法分为侵入性和非侵入性两大类。侵入性诊断方法主要是依赖胃镜活组织检查包括快速尿素酶试验、细菌培养、组织学检查、Hp基因检测（如寡核苷酸探针杂交、聚合酶链反应）等。非侵入性检测方法主要指不需要内镜检查的方法包括13碳或14碳尿素呼气试验、Hp抗体检测、粪便Hp抗原检测、尿液Hp抗体试验等。因此，如何简便、快速地检出Hp感染非常重要。本研究将2种检测Hp感染的方法进行比较，旨在寻找一种操作简便、敏感的检测Hp方法，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料

1.1.1 一般资料 选取2014年5月至2015年12月本院门诊及住院患者100例，其中男58例，女42例；年龄20～70岁，平均（54.2±14.2）岁。100例患者均于胃镜检查时镜下活检胃窦组织后进行快速尿素酶检测，随后进行血清抗体检测。

1.1.2 纳入标准 有上腹痛、饱胀、反酸、嗳气、食欲减退等不同症状就诊而行胃镜检查并经病理检查证实者。

1.1.3 排除标准 1个月内曾应用质子泵抑制剂、抗生素、铋剂等治疗者。

1.2 方法

1.2.1 快速尿素酶检测 采用胃Hp检测试剂盒（产品标准编号：YZB/闽0692-2011，生产企业许可证编号：第20110191号，医疗器械注册证编号：准字2011第2400096号），主要组成为底物微孔药条、反应液。主要成分为尿素、酚红、纯化水，规格为12孔/条，4条。取样时尽可能避免酸碱类物质、重金属盐类污染。操作方法：（1）取出底物微孔药条，每孔加100 μL反应液，充分溶解备用；（2）胃镜检查时活检胃窦黏膜组织，立即放入尿素酶试剂中，10~30℃条件下反应1.5 min后观察结果。结果判定：采用目测法。阳性为黏膜样品孔颜色呈红色至紫红色；阴性为黏膜样品孔无色。

1.2.2 血清抗体检测 采用Hp免疫球蛋白G抗体试剂盒（产品标准编号：YZB国4915-2012，医疗器械注册证编号：准字2012第3401447号）。主要成分为Hp抗体检测试剂40人份、一次性塑料吸管。采集患者早晨空腹静脉血2 mL，分离血清，尽量使用新鲜标本，如未及时检测置于2～8℃保存3 d。操作方法：（1）从原装铝箱中取出试剂；（2）将试剂置于干净平台上用塑料吸管吸取样板，垂直滴注3滴（约100 μL）无空气气泡的血清于试剂的加样孔内；（3）等待红色条带的出现。结果应在10～20 min内判读。结果判定：阳性为2条红色条带出现；阴性为仅质控区出现1条红色条带。

1.2.3 灵敏度、特异性判定标准 以病理组织学检查结果阳性作为对照，判定2种方法检测Hp感染的灵敏度、特异性。

1.3 统计学处理 应用SPSS17.0统计软件进行数据分析，计数资料以率或构成比表示，采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2种方法检测Hp阳性率比较 血清抗体检测Hp阳性率[74.00%（74/100）]明显高于快速尿素酶[42.00%（42/100）]，差异有统计学意义（χ2=26.69，P＜0.05），见表1。

表1 2种方法检测Hp阳性率比较

2.2 2种方法检测Hp感染的灵敏度及特异性比较血清抗体检测Hp感染的灵敏度明显高于快速尿素酶，差异有统计学意义（P＜0.05），特异性与快速尿素酶相当，

见表2。

表2 2种方法检测Hp感染的灵敏度及特异性比较（n=100）

3 讨 论

Hp是一种弯曲、螺旋形或S形革兰阴性微需氧杆菌。Hp首先通过细菌膜表面尿素酶分解尿素产生氨云在Hp周围产生过氧化物歧化酶和过氧化氢酶避免受中性粒细胞杀伤，这是Hp定植于胃、十二指肠的主要原因。Hp能产生炎性反应继而导致消化道肿瘤的发生。

快速尿素酶检测因试剂廉价、反应迅速对胃镜检查常为首选方法。该法检测影响因素较多：（1）检测结果阳性强度与标本中细菌密度呈正相关，同时受Hp在胃“灶性分布”的影响[3-5]，使其灵敏度低。（2）胃内pH值及影响胃内pH值的药物可影响检测结果。pH值为2.5～6.5时尿素酶主要维持Hp的代谢活动，在胃pH低的环境中尿素酶是维持Hp胞质周围pH稳定的关键因子。pH值上升至4.0～5.5时尿素酶活力逐渐降低[6]。因此，质子泵抑制药物、胃酸缺乏、胆汁反流、严重萎缩性胃炎等疾病均可导致胃内pH明显上升，则均可出现假阳性。（3）具有活性的尿素酶仅存在于黏液层，因此，黏液层厚度可影响检查结果。尿素酶为蛋白质分子，少量尿素酶一定时间内可能不能产生肉眼能见的反应。因此，也不可避免地出现假阴性。同时可产生尿素酶的常见细菌至少有20种以上[7]，因此，也可能存在假阳性。本研究结果显示，快速尿素酶检测Hp感染的灵敏度较低，与血清抗体比较，差异有统计学意义（P<0.05）。但最近一种单克隆抗体的尿素酶试验能与特异性抗体识别并结合尿素酶，灵敏度得到了提高。

Hp菌体表面存在的鞭毛及分泌的多种抗原组分均可激发宿主免疫应答诱导抗体的产生，检测血清中特异性抗体同样可反映病原体感染情况。通过不同种类的抗体能判定细菌类型，进而预测胃病严重程度，能更好地指导临床治疗。Hp感染数周后才产生特异抗体，同时细菌根除后抗体可维持半年以上[8]。因此，Hp抗体阳性不能肯定患者有活动性感染，阴性也不能排除初期感染。

综上所述，血清抗体检测Hp感染的灵敏度高于快速尿素酶，但因存在假阳性及假阴性，不适于临床诊断，该项检查只能用于流行病学筛检。快速尿素酶检测Hp感染的灵敏度较低，可结合其他检测方法，如13碳或14碳尿素呼气试验检测Hp感染。

[1] 窦逾常，王江滨．胰腺癌患者幽门螺杆菌感染的检测及临床意义[J]．吉林大学学报：医学版，2008，34（2）：317-319．

[2] 徐美华，瞿秋，张桂英．初探幽门螺杆菌与肝硬化及肝硬化并肝癌的关系[J]．中南大学学报：医学版，2007，32（5）：917-920．

[3] 蔡政杰．幽门螺旋杆菌感染与胃癌发病的相关性研究[J]．吉林医学，2009，30（1）：88-89．

[4] 方瑞芳，林庆顺，郑楚涛.三种幽门螺杆菌检测方法比较[J].医学检验与临床，2007，18（2）：52.

[5] 刘寅，孔宪忠，王振宇，等.两种幽门螺杆菌尿素酶依赖性检测方法比较[J].中国实验诊断学，2005，9（1）：90-91.

[6] 董玲，孙剑勇，王吉耀．幽门螺杆菌感染不同检测方法的评价[J]．中华消化杂志，2004，24（4）：235-236．

[7] 史肖云，张振华．分离培养诊断Hp感染的价值[J]．世界华人消化杂志，2001，9（5）：563-565．

[8] 李会强.幽门螺旋杆菌实验室诊断方法[J]．中国慢性病预防与控制，2007，15（2）：187-188.

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.22.032

B

1009-5519（2016）22-3502-02

2016-07-09）