气相色谱法测定宽叶缬草挥发油中乙酸龙脑酯含量

2016-12-06胡丽霞王晓仙

中国民族民间医药 2016年21期

关键词：龙脑无水乙醇恩施

胡丽霞王晓仙赵明

武汉市中西医结合医院，湖北武汉 430022

气相色谱法测定宽叶缬草挥发油中乙酸龙脑酯含量

胡丽霞王晓仙赵明*

武汉市中西医结合医院，湖北武汉 430022

宽叶缬草；乙酸龙脑酯；气相色谱法

败酱科缬草属植物宽叶缬草(ValerianaofficinalisL.var.latifoliaMiq.)，在我国南部各省区广为分布，根及根茎入药，具有解表散寒，活血调经，祛风除湿，镇痛解痉的作用[1]。以宽叶缬草根为原料经水蒸气蒸馏所得精油，为很好的香料和调香剂，在食品饮料、化妆品工业中有广泛用途[2]。采用GC-MS测定其成分主要为乙酸龙脑酯(bornyl acetate)[3]，具有止泻、镇痛、抗炎及解痉的作用[4]。本文建立了以萘为内标，气相色谱法测定宽叶缬草精油中乙酸龙脑酯的含量，为宽叶缬草生药质量评价提供依据，并对采集于湖北不同地区的样品进行了测定。

1 仪器与材料

1.1 仪器美国安捷伦6890N气相色谱仪；DB-WAX毛细管柱。

1.2 材料药材分别采集于湖北西部恩施、宣恩、利川、巴东地区，经武汉大学药学院王有为教授鉴定为败酱科缬草属宽叶缬草。乙酸龙脑酯对照品(中国药品生物制品检定所)；内标萘(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司)；无水乙醇(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)。

2 方法

2.2 标准溶液的制备精密称取乙酸龙脑酯适量，加无水乙醇制成4.16mg/mL的溶液。

2.3 内标溶液精密称取萘适量，加无水乙醇制成1.01mg/mL的溶液。

2.4 供试品溶液的制备精密称取挥发油50mg置10mL量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，精密量取该溶液和内标溶液各1mL，摇匀，即得。

2.5 标准曲线试验精密吸取对照品储备液0.038、0.075、0.15、0.3、0.6mL，分别置于10mL量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀即得浓度为0.016、0.031、0.062、0.125、0.250mg/mL的乙酸龙脑酯溶液；分别精密量取不同浓度溶液和内标溶液各1mL，摇匀。分别进样测定，每次1uL。以乙酸龙脑酯浓度对乙酸龙脑酯与内标峰面积之比进行线性回归。结果表明乙酸龙脑酯浓度在0.016～0.250mg范围内呈良好的线性关系，其线性回归方程为Y=1.40847X-0.001131 (r=0.99999)。

2.6 精密度和重复性试验对同一供试品溶液连续测定6次，结果乙酸龙脑酯峰面积RSD=0.47%。对同一样品从取样开始重复测定6次，结果乙酸龙脑酯峰面积RSD=1.69%。

2.7 稳定性试验精密吸取同一供试品溶液，分别在放置0、2、4、8、12、14h后，依法测定乙酸龙脑酯的峰面积，结果表明同一供试品溶液中被测成分在14h内基本稳定，RSD值为1.82%。2.8 加样回收率试验精密称取已知含量的样品约50mg，置10mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取1mL 5份，精密加入对照品溶液1mL，摇匀。依法测定，测得平均加样回收率为104.85%。

2.9 样品的测定精密称取宽叶缬草药材40g，置挥发油提取器中，加水500mL，提取4h。精密称取精油50mg，置10mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液和内标溶液各1mL，摇匀，量取1uL进样。依法测定不同采挖时间不同地区的湖北宽叶缬草样品。结果见表1。

表1 湖北产宽叶缬草挥发油中乙酸龙脑酯含量

注：样品1采挖于2016年湖北恩施海拔1500m处，野生；样品2采挖于2016年湖北恩施海拔1900m处，野生；样品3采挖于年湖北恩施，栽培；样品4采挖于2016年湖北宣恩，野生；样品5采挖于2016年湖北利川，野生；样品6采挖于2016年湖北巴东，野生；样品7采挖于2015年湖北恩施海拔1500m处，野生；样品8采挖于2015年湖北恩施海拔1900m处，野生；样品9采挖于2014年湖北恩施海拔1800m处，野生。

3 讨论

采用GC法对宽叶缬草挥发油中乙酸龙脑酯进行含量测定，为其质量控制提供了依据，也为宽叶缬草药材的质量标准建立奠定了基础。

供试品的制备考察了样品与内标溶液浓度，确定5uL/mL的样品溶液与1mg/mL的内标溶液等体积混合成供试品溶液。色谱条件考察了不同分流比、载气流速与升温程序，分别确定30∶1的分流比，1mL/min的载气流速，及60℃、120℃、140 ℃、230℃(5min)的升温程序进行测定。在此条件下分离效果好，乙酸龙脑酯峰及内标峰与相邻峰完全分离。

测定结果表明产于湖北不同地区、不同采挖年限的宽叶缬草样品中乙酸龙脑酯含量存在着差异，而是否与植被分布的生态环境、海拔高度、采挖年限因素有关，有待探讨。

[1] 都晓伟，吴军凯. 缬草属植物化学成分及药理活性研究进展[J]. 现代药物与临床，2006，21 (1)：10-14.

[2] 陈建华，申会建，聂长明. 湖南山区宽叶缬草的利用价值[J]. 湖南林业科技，1993，20(1)：36-37.

[3] 王立群，熊义涛，陶福华，等. 宽叶缬草挥发油成分分析[J]. 中药材，1996，22(6)：289-299.[4] 李晓光，叶富强，徐鸿华. 砂仁挥发油中乙酸龙脑酯的药理作用研究[J]. 华西药学杂志，2001，16(5)：78-79.

(编辑：陶希睿)

Determination of Bornyl Acetate in Volatile oil of Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq by GC

HU Lixia WANG Xiaoxian ZHAO Ming*

Wuhan Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine, Wuhan 430022,China