66.5%二甲四氯钠·4%唑草酮可湿性粉剂的高效液相色谱分析

林　想，刘改玲，杨红梅，蔡　冲

（安徽科立华化工有限公司，安徽宿州234000）

66.5%二甲四氯钠·4%唑草酮可湿性粉剂的高效液相色谱分析

林想，刘改玲，杨红梅，蔡冲

（安徽科立华化工有限公司，安徽宿州234000）

采用高效液相色谱法测定66.5%二甲四氯钠·4%唑草酮可湿性粉剂的有效成分含量，外标法定量。以甲醇-水（体积比85∶15）为流动相，在280nm波长下对二甲四氯酸、唑草酮进行分离和定量。二甲四氯酸、唑草酮的线性相关系数为0.9985、0.9996；标准偏差为0.14、0.05；变异系数为0.21%、1.20%；平均回收率为99.34%、99.146%。该方法具有简便、快速、分离效果好等特点。

二甲四氯钠；唑草酮；高效液相色谱法；分析

在我国，长期以来存在着使用单一除草剂的现象，使得很多杂草越来越具有抗药性。伴随着各种混生杂草的不断演变，使用某种单一除草剂，有时可能会起不到除草的作用，更加不能防治混生杂草的危害，因而合理复配的除草剂越来越引起人们的重视。合理复配的除草剂不仅可以增加药效，扩大杀草谱，延长施药的适用期，降低在各种农作物和土壤中的残留，还可以减轻农药的药害，提高农作物的安全性。66.5%二甲四氯钠·4%唑草酮可湿性粉剂主要用于防治水稻田的阔叶杂草和莎草。参考大量的文献，发现对于二甲四氯钠盐和唑草酮的单一原药的定量分析已有报道[1-3]，但是对于二甲四氯钠、唑草酮复配的可湿性粉剂进行同柱分离并定量分析含量的方法则未见报道。本文考虑采用高效液相色谱法测定其含量。首先配制流动相的水为酸性（pH=4乙酸水溶液），这样可以将可湿性粉剂样品中的二甲四氯钠完全转化为二甲四氯酸，然后对二甲四氯酸和唑草酮这两种成分进行定性分离，并进一步建立起对66.5%二甲四氯钠·4%唑草酮可湿性粉剂的定量分析方法。本文中的操作方法快速、简单、准确、分离效果好。经验证，这种分析方法的线性关系、准确度和精密度均能达到定量分析的要求，可以作为66.5%二甲四氯钠·4%唑草酮可湿性粉剂产品的检测分析方法。

1　实验部分

1.1试剂和仪器

甲醇：色谱纯；水：新蒸二次蒸馏水；乙酸：分析纯；二甲四氯酸标样：已知质量分数≥98.0%；唑草酮标样：已知质量分数≥98.0%，标样全部由农业部农药检定所提供。

日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪，具有紫外可变波长检测器；色谱数据处理机；微量进样器：25μL；微孔过滤器：滤膜孔径约为0.45μm；超声波清洗器等。

1.2液相色谱操作条件

流动相：甲醇∶水（水为pH=4乙酸水溶液）=85∶15（V/V）；流速：0.7mL/min；紫外检测波长：280nm；进样量：5μL；出峰时间：唑草酮约8.8min，二甲四氯酸约3.8min。

上述的液相色谱分析操作条件，可以根据不同的液相色谱仪、高效液相色谱柱，对分析操作参数和操作条件作出合理、适当的调整，从而获得最佳的分离效果。二甲四氯酸、唑草酮标样和样品的高效液相色谱图见图1、图2。

1.3测定步骤

1.3.1标准溶液的配制

准确称取二甲四氯酸标样0.4760g（精确至0.0002g），唑草酮标样0.0280g（精确至0.0002g）置于50mL容量瓶中，加入20mL的甲醇溶解，用超声波振荡15min后，取出冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。

1.3.2试样溶液的配制

准确称取66.5%二甲四氯钠·4%唑草酮可湿性粉剂的试样约0.7000g（精确至0.0002g），置于50mL容量瓶中，加蒸馏水5mL，再加入乙酸调整至溶液pH=4，用超声波振荡溶解，取出冷却后加入甲醇约20mL，再用超声波振荡15min，取出冷却至室温，用色谱稀释至刻度，摇匀，备用。

图1　二甲四氯酸、唑草酮标样的高效液相色谱图

图2　二甲四氯酸、唑草酮样品的高效液相色谱图

1.3.3测定

根据上述的液相色谱分析操作条件，确定液相色谱仪的基线稳定后，连续注入数针标样溶液，得出各针的的二甲四氯酸、唑草酮的峰面积。当连续进样并确定相邻两针的峰面积相对变化值小于1.0%时，再按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序陆续进样，用外标法来确定二甲四氯酸和唑草酮的含量。

1.3.4计算

将测得的试样溶液、标样溶液中二甲四氯酸、唑草酮的峰面积分别进行平均。根据二甲四氯酸、唑草酮的平均峰面积来计算各自的含量。

试样中二甲四氯酸质量分数X1（%）：

式中：A1-标样溶液中二甲四氯酸峰面积的平均值；A2-试样溶液中二甲四氯酸峰面积的平均值；m1-二甲四氯酸标样的质量，g；m2-试样的质量，g；Pi-标样中二甲四氯酸的质量分数，%。

试样中唑草酮质量分数X1（%）：

式中：A1-标样溶液中唑草酮峰面积的平均值；A2-试样溶液中唑草酮峰面积的平均值；m1-唑草酮标样的质量，g；m2-试样的质量，g；Pi-标样中唑草酮的质量分数，%。

2　结果与讨论

2.1色谱条件的选择

参照文献中的各种分析操作方法，并同时考虑原药二甲四氯酸、唑草酮的理化性质，综合考虑后，选择混合的甲醇、水作为流动相。甲醇和水按照不同的配比，配制不同的流动相，在色谱柱上进样分析后，进而优化甲醇和水的配比。为了得到更好的分离效果，并保证分析结果的准确，首先选用乙酸将水的pH调到4.0，然后确定选择甲醇∶水（水为pH=4乙酸水溶液）=85∶15（V/V）的流动相；流速调整为0.7mL/min；紫外检测波长为280nm，可以很好地分离二甲四氯酸、唑草酮和其它杂质；同时色谱基线平稳，出峰的峰形漂亮，并且分析时间为12min，大大提高了分析检测的效率。

2.2分析方法的线性相关性试验

称取二甲四氯酸标样1.9040g（精确至0.0002g）和唑草酮标样0.1120g（精确至0.0002g），置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解，再用超声波振荡15min，稀释至刻度，摇匀。分别准确移取上述定容后的溶液5、10、15、20、25mL，置于50mL容量瓶中，再用甲醇稀释至刻度，摇匀，定容。在上述色谱操作条件下进行分析，分别以二甲四氯酸、唑草酮标样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，结果见表1、图3、图4。二甲四氯酸线性方程y=634626x+31995，其线性相关系数为0.9985；唑草酮线性方程y=4E+06x+15235，其线性相关系数为0.9996。

表1　二甲四氯酸、唑草酮标样的线性相关性试验结果

图3　二甲四氯酸浓度和峰面积的线性关系

图4　唑草酮浓度和峰面积的线性关系

2.3分析方法的精密度试验

对同一产品准确称取5个试样，在上述色谱操作条件下进行分析，测得二甲四氯钠、唑草酮的标准偏差分别为0.14、0.05，变异系数分别为0.21%、1.20%（表2）。

表2　二甲四氯酸、唑草酮的精密度试验结果

2.4分析方法的准确度试验

在已知含量的试样中分别准确加入不同量的二甲四氯酸、唑草酮标样，在上述色谱操作条件下进行分析，测得二甲四氯酸、唑草酮的平均回收率分别为99.34%、99.146%（表3）。

表3　二甲四氯酸、唑草酮的准确度试验结果

3　结论

本文采用高效液相色谱法测定66.5%二甲四氯钠· 4%唑草酮可湿性粉剂的有效成分。试验结果表明，本方法的分离效果及线性关系良好，准确度和精密度高，同时该方法具有快速、准确和分离效果好的优点，是一种非常可行的分析操作方法。

[1]GB20698-2006，56%2甲4氯钠盐可溶粉剂[S].

[2]徐巧明，高清，董红春，等.农药2甲4氯钠盐的高效液相色谱分析[J].现代农药，2004，3（4）：21-22.

[3]吴进龙，张志一，单炜力，等.唑草酮原药高效液相色谱分析方法研究[J].农药科学与管理，2008，29（2）：15-18.

Analytical Method for 66.5%MCPA-Na·4%Carfen Trazone-ethyl WP by RP-HPLC

LIN Xiang，LIU Gai-ling，YANG Hong-mei，CAI Chong
（Anhui Kelihua Chemical Co.，Ltd.，Suzhou 234000，China）

The analytical method for determination of 66.5%MCPA-Na·4%Carfen trazone-ethyl WP was established.The method was developed with external standard method，5μm C18 stainless steel column and UV detector by UV at wavelength of 280nm，methanol and water（85∶15，by Vol）as the mobile phase.The analysis showed that the linear correlation coefficient of MCPA，Carfen trazone-ethyl were 0.9985，0.9996；standard deviations were 0.14，0.05；variable coefficients were 0.21%，1.20%；and average recovery rates were 99.34%，99.146%.The method has the advantages of convenience，fast speed，good separation，high precision and accuracy，and fine linear correlations.

MCPA-Na；Carfen trazone-ethyl；HPLC；analysis

10.3969/j.issn.1008-553X.2016.04.042

O657.7+2；S482.4+7

A

1008-553X（2016）04-0113-03

2016-03-28

林想（1987-），男，毕业于淮北师范大学（原淮北煤炭师范学院），从事农药原药、制剂的分析检测工作，15222977136，linxiangqwe@163.com。