HPLC法测定康尔心胶囊中丹参酮ⅡA的含量
2016-11-29李鑫
李 鑫
辽宁省朝阳市药品检验检测所,辽宁 朝阳 122000
HPLC法测定康尔心胶囊中丹参酮ⅡA的含量
李 鑫
辽宁省朝阳市药品检验检测所,辽宁 朝阳 122000
目的:建立以高效液相色谱法测定康尔心胶囊中丹参酮ⅡA的含量方法。方法:色谱柱为Kromasil C18(4.6mm×250mm;5μm);流动相为甲醇-水(75∶25);流速为1.0mL/min;检测波长为270nm。结果:丹参酮ⅡA在0.1598~3.196μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9995),加样回收率为98.192%(RSD=0.46%)。结论:该方法准确可靠、专属性好,可用于康尔心胶囊的质量控制。
康尔心胶囊;高效液相色谱法;丹参
康尔心胶囊由三七、人参、麦冬、丹参、枸杞子、何首乌、山楂等7味中药组成,具有益气活血、滋阴补肾之功效,能够增加冠脉血流量,降血脂,用于治疗冠心病、心胶痛、胸闷气短等症,是临床常用的中成药。处方中的丹参具有活血化瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的疗效,用于胸痹心痛、心烦不眠等症,而丹参酮ⅡA是其主要活性成分。本品收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二册,但标准中只对性状、理化鉴别及检查项确定了检验标准,并未对其主成分丹参进行质量控制。为了控制康尔心胶囊的药品质量,笔者采用高效液相色谱法对其处方中的丹参酮ⅡA进行了定量分析[1-7]。报告如下。
1 仪器与材料
1.1 仪器 岛津LC-2010A型高效液相色谱仪(包括LC-2010型紫外检测器, LC solution色谱工作站);微孔滤膜(0.45μm);BSA224S-CW型万分之一电子天平(赛多利斯科学有限公司);BP211D型十万分之一电子天平(赛多利斯科学有限公司);HQ3120型超声仪(翡纳米科技发展有限公司)。1.2 材料 康尔心胶囊(批号:141001、141004、151004,辽宁可济药业有限公司),丹参酮ⅡA对照品(批号:110766-200619,中国药品生物制品检定所),甲醇为色谱纯,水为重蒸馏水,其它试剂为分析纯。
2 含量测定
2.1 色谱条件及系统适应性研究 色谱柱Kromasil C18(4.6mm×250mm;5μm);流动相为甲醇-水(75∶25);流速为1.0mL/min;柱温为室温;检测波长为270nm;进样量为10μL;理论板数:按丹参酮ⅡA计算不低于2000。分离度大于1.5,峰形良好,阴性无干扰(见图1)。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取0.01598g丹参酮ⅡA对照品,置50mL的棕色容量瓶中,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度,混匀,得对照品的储备液。再精密吸取5mL对照品储备液置10mL的棕色容量瓶中,用甲醇定容,混匀。
2.3 供试品溶液的制备 取研细的内容物约1.0g,精密称定,置带塞锥形瓶中,精加50mL甲醇,称定重重,加热回流1h,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。
2.4 空白试验 按照处方制法制备无丹参的阴性对照样品,按照“2.3供试品溶液的制备”的方法制备。
2.5 线性关系考察 分别吸取1、5、10、15、20μL对照品溶液注入LC-2010A型高效液相色谱仪,记录高效液相色谱图。横坐标(X)为对照品进样量为,纵坐标(Y)为峰面积积分值,绘制标准曲线,回归方程为Y=46.2+51815.8X,r=0.9995,结果表明丹参酮ⅡA在0.1598~3.196μg范围内有良好的线性关系。
2.6 稳定性试验 取“2.3项下的供试品溶液”,分别于0、2、4、8、12、48h时测定,记录峰面积,RSD为0.78%。表明供试品溶液在48h内是比较稳定的。
2.7 重复性试验 分别取5份样品(批号为141001),制备方法同供试品溶液,测定,RSD为0.81%,说明该方法的重复性良好。
2.8 精密度试验 精密吸取10μL对照品溶液,重复进样6次,记录对照品峰面积,RSD为0.63%,说明仪器有良好的精密度。2.9 加样回收率试验 精密称取已知丹参酮ⅡA含量的样品(含量为6.1919mg/g)0.5g,分别精密加入丹参酮ⅡA对照品,按供试品溶液方法制备,依法测定含量并计算回收率,结果见表1。
表1 回收率试验测定结果
2.10 样品含量测定 分别取3批样品,按上述方法制备供试品溶液,测定含量,结果见表2。
表2 样品中丹参酮ⅡA的测定结果 (n=5)
3 讨论
3.1 研究对康尔心胶囊中丹参的主要有效成分丹参酮ⅡA建立了含量测定方法,结果可靠,对改进康尔心胶囊制剂的质量标准有一定意义。
3.2 为了保证样品中丹参酮ⅡA被充分提取出来,分别采用回流0.5h、回流1h,回流2h和超声30min的不同提取时间,50%甲醇,70%甲醇,甲醇不同提取溶剂进行了考察,测定结果表明回甲醇作为提取溶剂,回流提取1h有效成分能被充分提取出来[8-9]。
3.3 将流动相甲醇-水比例调整为(70∶30)、(75∶25)、(65∶35)分别进行试验,结果甲醇-水(75∶25)分离效果最好。
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(编辑:程鹏飞)
2016-07-11
李鑫(1985-),男,汉族,硕士,主管中药师,研究方向为中成药及中药材的鉴定及检验。E-mail:lixin850801@126.com
R284.1
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1007-8517(2016)19-0117-02