青霉素对尿蛋白定性检测的影响

徐源

摘要：目的 探讨青霉素对尿蛋白定性检测的影响，以做好尿液检测质控为临床医生提供可靠的检验报告。方法 用干化学法、磺基水杨酸法和加热乙酸法检测一定浓度青霉素的蛋白尿。结果 尿蛋白浓度0.5g/L，青霉素浓度2.0万U/ml时干化学法尿蛋白检测出现阳性减弱；青霉素浓度2.0万U/ml时，磺基水杨酸法尿蛋白检测出现假阳性；青霉素对加热乙酸法无干扰。结论 青霉素会导致干化学法蛋白检测产生假阴性；磺基水杨酸法产生假阳性，对加热乙酸法无干扰。

关键词：尿蛋白；干化学法；磺基水杨酸法；加热乙酸法；青霉素

The Effect of Penicillin on the Qualitative Detection of Urinary Protein

XU Yuan

（Department of Clinical Laboratory，Dazhou District Hospital of Traditional Chinese Medicine，Dazhou 635000，Sichuan，China）

Abstract：Objective In order to perfect the general quality control of urine detection and provide reliable results；we designed an experiment to find the influence of urine protein detection on the dosage of penicillin.Methods We used three ways to make the urine detection，including dry chemistry method，urine protein，sulfosalicylic acid method and heat and acetic acid method.Results False negative result appears when urine protein concentration is 0.5 g/L；penicillin is 20000 units per milliliter with dry chemistry method，and with sulfosalicylic acid method，false positive result appears when the penicillin concentration is 20000 units per milliliter.No impact is made on heat and acetic acid method.Conclusion On some dosage of penicillin，false positive result will be made with sulfosalicylic acid method and false negative result with dry chemistry method.Heat and acetic acid method can rule out false results.

Key words：Urine protein；Dry chemistry method；Sulfosalicylic acid method；Heat and acetic acid method；Penicillin

尿液蛋白质检测是肾脏疾病诊断和治疗的重要指标之一。当肾脏出现肾小球，肾小管疾病时，尿蛋白常呈异常增高。故尿蛋白的检测对某些疾病的诊断，特别是泌尿系统疾病的诊治具有重要意义。临床上主要有三种方法对尿蛋白进行定性检测，包括pH指示剂蛋白质误差法（干化学法）、磺基水杨酸法（Sulfosalicylic Acid，SSA）以及加热乙酸法。

青霉素为临床常用的抗生素，其肾毒性较小，注射后几乎全部以原型的形式从尿中排出。丛玉隆等报道[1-3]大剂量的青霉素对尿蛋白的定性检测有干扰作用，但同时对3种蛋白定性方法进行研究的较少。本实验将探讨青霉素对临床上常用的三种尿蛋白定性检测方法的影响。

1 资料与方法

1.1一般资料 试剂：清蛋白2.0 g（Albumin Bovine V，Amresco 0332）、注射用青霉素钠（华北制药股份有限公司，批号：J3076102）、200 g/L磺基水杨酸、5%乙酸溶液、选取健康学生尿液标本1000 ml。

1.2器材 优利特-200A尿液分析仪（桂林市医疗电子仪器厂），11联试纸条（桂林优利特医疗电子有限公司，批号：56150638）

1.3方法 配置蛋白尿，见表1。1～5号蛋白尿分别设置A-F共6支平行试管，加入溶解的青霉素钠，形成青霉素终浓度分别为0、0.5万U/ml、1万U/ml、2万U/ml、5万U/ml、10万U/ml。用干化学法检测每个标本，对导致干化学法出现假阴性结果的尿液采用磺基水杨酸和加热乙酸法进行检测。

2 结果

2.1青霉素对干化学法尿蛋白定性检测的影响，见表2。尿蛋白浓度为0.5 g/L，青霉素浓度为2万U/ml时尿蛋白检测开始出现阳性程度减弱；尿蛋白浓度为1 g/L和2 g/L，青霉素浓度为5万U/ml时尿蛋白检测出现假阴性；而尿蛋白浓度为5 g/L，青霉素浓度为5万U/ml时尿蛋白开始出现阳性程度减弱；所有浓度的蛋白尿在青霉素浓度为10万U/ml时，干化学结果都为假阴性。

2.2青霉素对SSA尿蛋白定性检测的影响 蛋白浓度为0g/L，青霉素浓度为2万U/ml时，SSA法检测出现假阳性。

2.3青霉素对加热乙酸法尿蛋白定性检测的影响 不同剂量的青霉素对加热乙酸法尿蛋白定性检测均无影响。

3 讨论

尿液蛋白质检测是肾脏疾病诊断和治疗的重要指标之一。正常情况下，由于肾小球滤过膜的孔径屏障和电荷屏障的作用，以及肾小管的重吸收作用，终尿中的蛋白质含量很少，尿蛋白定性试验阴性。而当肾脏出现肾小球，肾小管疾病时，尿蛋白常呈异常增高。故尿蛋白的检测对某些疾病的诊断，特别是泌尿系统疾病的诊治具有重要意义。目前临床上检测尿蛋白的定性方法有干化学法、SSA法和加热乙酸法。由于干化学法检测方便、快速，且可进行大批次的检测，临床上应用极为广泛；但检验人员常常忽视干化学法干扰因素多，易产生假性结果等缺点，导致出现实验结果与临床不符合时，不能正确解释和处理。

根据实验结果提示：①所用干化学试纸条对清蛋白检测的灵敏度和精密度比SSA法差，如1.0 g/L的蛋白尿，SSA检测为+，而干化学法为±；且后者对1.0 g/L和2.0 g/L的蛋白尿检测结果皆为++；这与《临床检验基础（第五版）》[4]描述相同。②青霉素对干化学法尿蛋白定性检测能造成假阴性结果，且蛋白浓度越低，干扰越大，这与郑杰等[4]研究结果吻合。③青霉素对SSA法造成假阳性的结果，这与多位研究者看法一 致[1，5]；④加热乙酸法不受到青霉素的干扰。我们从尿蛋白定性检测的原理来分析上述实验结果：①干化学法检测尿蛋白采用pH指示剂蛋白质误差法，是指在pH 3.2的条件下，酸碱指示剂四溴酚蓝产生的阴离子与带阳离子的蛋白质结合生成复合物，引起指示剂进一步电离，当超越缓冲范围时，指示剂发生颜色改变，颜色的深浅与蛋白质含量成正比；而青霉素有与蛋白质相似的结构，亦可与指示剂四溴酚蓝结合，且反应速度快、亲和力强，竞争性抑制白蛋白与四溴酚蓝的结合，使试剂模块颜色变淡或呈无色，从而造成假阴性。②SSA法检测原理为在略低于蛋白质等电点的酸性环境下，磺基水杨酸根离子与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不溶性蛋白盐而沉淀，沉淀量或溶液反应后的浑浊程度，可反应蛋白质的含量；而青霉素存在与蛋白质氨基相似的苯乙酰氨基结构[5]，因此可以与磺酸根离子发生相似沉淀反应，造成假阳性。③加热乙酸法通过加热使蛋白质变性，加稀乙酸使尿液pH接近蛋白质等电点（pH 4.7），并使得变性凝固的蛋白质进一步沉淀；因此青霉素对其的影响很小。

检验人员应了解各检测方法的适用情况，注重临床工作中方法的选择目的出发，进一步明确青霉素对三种尿蛋白定性试验的影响，尿蛋白过筛实验的首选试验是SSA法，确证实验是加热乙酸法；另一方面若患者服用大剂量青霉素等药物，临床医生应向检验人员说明服用剂量及时间，或者让患者几小时后再采集尿液标本进行尿液检测，以提高结果准确性和可靠性。

临床工作中，随着抗生素的研制与发展，现多使用二代、三代头孢菌素类抗生素取代青霉素类为主要的抗菌药，头孢菌素类抗生素对尿蛋白等尿液常规检查项目是否有影响，后期可以设计相关实验进行研究探索；另一方面也应该注意尿蛋白的种类在不同肾脏疾病及不同阶段是有所变化的，如肾小球疾病早期以清蛋白为主，随着病情的发展会出现大分子球蛋白，甚至出现小分子蛋白质，而干化学法对白蛋白灵敏，对球蛋白灵敏度仅为白蛋白的1/100～1/50[4]，因此明确不同方法对不同蛋白质的灵敏度也是进一步研究应该考虑的问题。检验人员只有对所用方法的原理和影响因素有深刻的理解才能在工作中正确使用并合理解释结果，从而帮助临床医生进行正确的诊断和治疗相关疾病。

参考文献：

[1]丛玉隆，杨建良.大剂量青霉素对尿蛋白定性结果影响的探讨[J].中华医学检验杂志，1994，17（3）：167-168.

[2]李惠敏，杨红英，鲜玉萍.干化学试纸法做尿蛋白定性的影响因素[J].成都医药，1999，25（2）：98.

[3]郑杰，赵亚妮，安蓉.青霉素对干化学法检测尿蛋白的影响[J].实用医技杂志，2005，12（7）：1867-1868.

[4]刘成玉，罗春丽.临床检验基础[M].5版.北京：人民卫生出版社，2013：144-145.

[5]杨宝峰.药理学[M].7版.北京：人民卫生出版社，2012：385.

编辑/罗茗柯