现代色谱技术在中药检验中的运用

梁国嫔　吴拾保

摘要：中药检验的目的在于保证药物安全性及有效性，主要技术手段为色谱技术。目前，色谱研究不断深入，检验及分离技术不断改进、完善，各种现代化联机检测及色谱方法逐渐成熟，因其微量检测、高速、自动化、高分辨等特点发挥较大作用。本文主要研究中药检验中HPLC、GC、SFE、HPCE等现代技术的具体运用。

关键词：色谱技术；中药检验；运用

现阶段，中药制剂不断更新，药物质量的相关控制有待加强，实践时必须结合现代化技术，提高检验分析水平。色谱技术是中药检验中现代化技术的重要体现，是重要的研究技术平台。以下分别从HPLC、GC、SFE、HPCE四方面研究中药检验中色谱技术的运用。

1 中药检验中运用HPLC技术

HPLC广泛运用于中药质量标准及新药研究，检验精密度高，具有灵敏、重现性好、快速等优点。传统上多使用紫外检测器，但紫外检测器有一定弊端，仅能对有紫外吸收性的成分进行检测，故应用受限。ELSD为通用检测器，可用于检测非挥发性组分，弥补了传统检测的不足[1]。将HPLC与ELSD联用，有效拓宽了检测范围，提高分离效率，能用来检验中药成分，如苷类、树脂、脂类、糖类、氨基酸等。应用HPLC时，经色谱柱分离得到的组分可随流动相直接进入雾化器，雾化形成雾粒进入蒸发器，溶剂蒸发后，待检测成分颗粒通过狭窄光束时可引起光散射，光电倍增管收集转为电信号，且电信号的响应值由待检测成分质粒大小及数量所决定。检验前，流动相已经被蒸发，使用ELSD既能避免溶剂峰干扰，且流动相的系统温度对其无影响，梯度洗脱时基线较平稳，灵敏度升高，特别适用于一次进样中梯度洗脱分析组分比较复杂的成分。

定量测定人参皂苷元时，使用ELSD检测器，对其进行梯度洗脱，其检验分离性及灵敏度较HPLC-UV佳。采用HPLC-ELSD、HPLC-UV分别测定银杏黄酮内酯成分及西洋参拟人参皂苷F11含量，两种方法重现性与精密度比较，HPLC-ELSD较好。使用挥发性盐对流动相酸度进行调节，并给予梯度洗脱，检验胆汁胆酸含量，效果满意[2]。

2 中药检验中运用GC技术

检验药物挥发性成分时主要采用GC技术，现阶段，GC发展迅速，应用逐渐广泛，DV-GC技术使中药检验更简便、更快捷。将成分有挥发性的液体或固体（待检验样品）放在蒸发器中，蒸发器连接气相色谱仪，且温度适宜，短时间内待检验样品挥发性组分被蒸发，经载气进入色谱柱检验及分离。DV-GC取样约1～2 mg，放入蒸发器中可在1～3 min内完全蒸发，具有取样少、处理快速、简便等优点，能有效克服提取有机溶剂时间较长、取样大、操作繁琐、蒸馏时间长、误差较大等问题，尤其适用于检验中药微量成分及名贵中成药，如使用OV-17弹性不锈钢柱及石英毛细管柱分别检验牛黄解毒片、六神丸冰片含量，使用FID检测器及SE-30熔融石英毛细管柱检验六味地黄丸、牡丹皮丹皮酚含量。

石英毛细管柱可与FTIR、MS联用，分离效能较高，可快速分离及鉴定复杂多组分样品。固定液由传统直接涂渍向交联、键合逐渐转变，增强色谱柱使用稳定性，如毛细管GC测定六应丸中丁香酚、冰片等；程序升温毛细管GC检验来源、产地不同的术类中药挥发油组分[3]；CY-DEX-B手性毛细管GC鉴别不同中成药中合成冰片、梅片和艾片等。

联用毛细管柱与质谱，不仅发挥了前者高分辨力特点，还具有后者高鉴别力，是挥发油组分分离鉴定的有效手段。如使用HRCGC-MS对桂枝中挥发油成分进行分析，共获得化学成分44个；使用GC-MS-DS、OV-17弹性毛细管柱分离鉴定姜黄挥发油，共检出姜黄烯、姜黄酮等化学成分51种。

3 中药检验中运用SFE技术

超临界流体密度较高，与液体相似，粘度性质较低，与气体相似，SFE技术运用这一原理，迅速透入固体待检验药材中，并提取化学成分。将CO2作为提取介质，具有较强的中等极性物质及非极性物质萃取能力，适当加入改进剂或调节温度及压力后，还能提取到极性不同的物质，适用于大部分中药有效成分提取。SFE技术能在无氧、低温下进行，便于易挥发、易氧化、热不稳定性成分提取。目前，分离检验时联合SFE技术、色谱仪，效果良好。

4 中药检验中运用HPCE技术

HPCE与HPLC均为液相分离技术，具有快速、高效性，但HPCE技术较HPLC更具明显优势。HPCE灵敏度高，检测限最低为10-13～10-15 mol；理论板数达每米数十万～数百万，柱效高；一般来说分析时间<30 min，速度较快，且溶剂消耗少，检验成本较低[4]。HPCE使用的检测器较多，如质谱、紫外、电化学、荧光等，按照不同分析对象还可选择不同分离模式，选择性及分离检验能力较强。

HPCE中应用较广泛、最基本的操作模式为CZE，优点较多，有学者采用CZE对三种不同复方制剂中甘草次酸、甘草酸含量进行检验，并在10 min内完成检验，结果满意。另有学者试验时，电泳电解质选择磷酸盐缓冲液0.02 mol/L，经CZE测定氧化苦参碱与苦参碱含量。HPCE还有MECC、CGE等技术。

5 结论

HPLC、GC、SFE、HPCE等现代色谱技术在中药检验中运用较广，优势明显。在色谱技术快速发展下，中药检验必将进入新里程，实现现代化。笔者查阅了相关资料及文献，对中药检验中现代色谱技术运用进行探讨，供学者参考。

参考文献：

[1]雷利利，张熙洁，侯林中，等.现代色谱技术在中药制剂多指标成分质量控制中的应用[J].中国药房，2011，39：3733-3735.

[2]彭水梅，付小梅，孙艳朝，等.色谱法及其相关技术在中药研究中的运用[J].江西中医药大学学报，2014，01：51-56.

[3]陆广马.高效液相色谱-质谱法在中成药分析中的应用研究[J].亚太传统医药，2014，04：54-55.

[4]黄良.中药房中药质量管理探析[J].亚太传统医药，2014，12：128-129.

编辑/肖慧