槐杞黄颗粒对哮喘患儿白细胞介素-12的影响

陶金金, 贾春梅, 刘开运, 杨俊峰

(1.包头医学院研究生院，内蒙古包头 014060；2.包头市第四医院)



槐杞黄颗粒对哮喘患儿白细胞介素-12的影响

陶金金1, 贾春梅2, 刘开运2, 杨俊峰2

(1.包头医学院研究生院，内蒙古包头 014060；2.包头市第四医院)

目的：通过观察哮喘患儿血清白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)的血液浓度变化来判断槐杞黄颗粒对哮喘患儿的治疗作用。方法：选取哮喘患儿96例，分为观察组及对照组，对照组给予糖皮质激素和支气管扩张剂雾化吸入及口服白三烯受体拮抗剂治疗。观察组在对照组基础上加用槐杞黄颗粒治疗。选取健康体检儿童30例作为健康儿童组。用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)方法检测观察组及对照组患儿治疗前后及健康儿童血清IL-12的水平。结果：观察组治疗前与对照组治疗前相比以及它们与健康儿童组相比较，观察组和对照组治疗前相比较IL-12水平无统计学意义(P>0.05)，两组治疗前IL-12水平均低于健康儿童组(P<0.05)。观察组治疗后与对照组治疗后相比较以及它们与健康儿童组相比较，观察组治疗后IL-12升高水平较对照组明显(P<0.05)，观察组治疗后及对照组治疗后IL-12低于健康儿童组(P<0.05)。结论：IL-12可能参与哮喘的发病，使用槐杞黄颗粒可能通过提高IL-12水平达到对哮喘的治疗作用。

哮喘；槐杞黄颗粒；白细胞介素-12；儿童

哮喘是儿童常见的慢性疾病，是一种异质性疾病，常以慢性气道炎症为主要特征。且近年来发病呈上升趋势，严重危害世界儿童的健康，其发病率为1 %～18 %。目前认为Th1/Th2平衡失调，从而导致机体正常的免疫耐受功能受损，是哮喘发病的重要基础。白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)为Th1细胞因子，近年来研究发现IL-12可能通过各个免疫环节参与哮喘的发病。槐杞黄颗粒近几年广泛用于免疫调节及呼吸道感染方面的治疗。本研究旨在通过给予口服槐杞黄颗粒及常规治疗后测定血清IL-12的浓度变化观察槐杞黄颗粒对哮喘患儿的治疗作用。

1 对象与方法

1.1 对象 选择2014年8月至2015年9月就诊于包头市第四医院的哮喘患儿88例，患儿均符合第8版实用儿科学哮喘诊断标准，随机分为观察组及对照组，观察组43例，男30例、女13例，年龄(4.8±2.67)岁。对照组45例，男29例、女16例，年龄(4.96±2.74)岁。选取同期包头市第四医院儿科门诊及健康体检的儿童30例作为健康儿童组，其中男17例、女13例，年龄(4.48±1.26)岁。

1.2 方法

1.2.1 临床用药及检查 两组患儿均给予常规治疗，对照组给予布地奈德雾化吸入及口服白三烯受体拮抗剂治疗，观察组加口服槐杞黄颗粒(启动盖天力药业有限公司生产，批号B20020074)，<3岁者5 g/d，>3岁者10 g/d，口服3个月。治疗3个月后取血2 mL备检，血样-20 ℃冰箱保存待测。采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)方法检测血清IL-12水平。

2 结果

2.1 3组患儿治疗前后IL-12水平比较 观察组治疗前、对照组治疗前相比较以及它们与健康儿童组相比较，观察组治疗前及对照组治疗前IL-12水平差异无统计学意义(P>0.05)；两组治疗前较健康儿童组低(P<0.05)。观察组治疗后、对照组治疗后相比较以及它们与健康儿童组相比较，观察组治疗后IL-12水平较对照组治疗后高(P<0.05)，两组治疗后均低于健康儿童组(P<0.05)。见表1,表2。

表1 两组患儿治疗前与健康儿童组比较IL-12水平的变化

a为与健康儿童组比较P<0.05

表2 两组患儿治疗后与健康儿童组比较IL-12水平的变化

a为与健康儿童组比较P<0.05,b为与对照组治疗后比较P<0.05

2.2 不良反应 全部病例未见明显不良反应。

3 讨论

哮喘是儿童最常见的慢性疾病，近年来发病呈上升趋势，严重危害公共健康，引起了社会及学者的广泛关注。它是一种多种细胞及细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病，Th1/Th2细胞失衡在哮喘的发病中起重要作用。其主要特征是气道慢性炎症和部分可逆性的气流受限。气道重塑是支气管哮喘重要的病理特征之一。常见的支气管哮喘气道重塑表现为上皮细胞损伤、杯状细胞增生、黏液分泌增加、上皮下纤维化、基底膜增厚、平滑肌细胞增生，血管重建等。

正常人体细胞IL-12主要为单核巨噬细胞、树突状细胞、B淋巴细胞、表皮内朗罕细胞产生。IL-12在调节Th1/Th2的平衡过程中占重要作用。研究表明哮喘患者体内IL-12的产生、分泌不足。IL-12可以加强Th1细胞的免疫应答反应，可以刺激Th1细胞因子干扰素的产生，抑制嗜酸性粒细胞聚集及减轻气道的炎症反应。哮喘患儿树突状细胞功能不足，影响血清IL-12的分泌水平。有研究表明哮喘患儿经脂肪酶刺激后外周单个核细胞可以产生少量IL-12[1]。动物实验表明IL-12可以加重炎症反应[2]。IL-12能有效纠正哮喘小鼠Th细胞失衡，控制气道炎症，且能有效地抑制Th2细胞型免疫应答反应和气道炎症,同时可以降低IL-4信使核糖核酸的表达水平[3]。给予哮喘小鼠重组IL-12发现能够在明显改善哮喘小鼠气道炎症反应的同时上调干扰素-γ的表达水平，抑制Th2型细胞的分化和增殖功能。

槐杞黄颗粒是由槐耳菌质配伍枸杞子、黄精制成的颗粒剂。槐杞黄颗粒的主要成分为槐耳菌质。槐耳富含槐耳菌质多糖,具有很高的生物反应调节功能,能够激发机体免疫反应中诸多环节,从而提高机体的免疫力。目前临床上槐杞黄颗粒主要用于以下两方面：(1)反复呼吸道感染：作用机制可能通过调节胰岛素样生长因子-1及提高机体免疫球蛋白A、G水平来发挥作用。在反复呼吸道感染患儿确实存在胰岛素样生长因子-1水平降低，表明其水平降低参与反复呼吸道感染的发病机制。对口服槐杞黄颗粒的患儿血清免疫球蛋白A、G、M及CD细胞系列水平进行测定，患儿血清免疫球蛋白A、G、M有一定程度增高，CD3+、CD4+增高，尤其以CD4+增高明显，CD4+/CD8+比值增高。结果表明槐杞黄颗粒可能通过调节T、B淋巴细胞的功能从而改善免疫功能[4]。反复呼吸道感染患儿使用槐杞黄颗粒可以通过降低炎症反应而使病情好转。临床使用过程中观察到偶可见恶心及腹泻不良反应，未见其他严重不良反应。(2)蛋白尿：槐杞黄能减轻阿霉素肾病大鼠模型的蛋白尿。推测槐杞黄颗粒治疗肾病蛋白尿的机制可能是减少炎细胞的浸润及纤维素增生，减少肾小球足细胞损害、抑制足细胞相关分子nephrin及podocin表达的减少,并通过改善足细胞相关分子nephrin及podocin的分布异常,从而达到稳定肾小球裂孔隔膜分子屏障及电荷屏障,保持足突形态及功能、减少尿蛋白的疗效[5]。各种研究表明槐杞黄颗粒副反应甚微，且未见过敏、肝功能损害、骨髓抑制等严重不良反应，同时具有保护肾脏的作用，可以作为蛋白尿的辅助治疗药物。

本研究中发现观察组和对照组治疗前IL-12水平较健康儿童低，推测IL-12可能参与哮喘的发病。且有研究表明哮喘患儿发作期及缓解期均存在IL-12水平较健康儿童低。观察组及对照组治疗后IL-12水平升高，观察组治疗后升高较对照组明显，推测槐杞黄颗粒通过调节IL-12的水平对哮喘的治疗可能发挥作用。有研究表明长期使用槐杞黄颗粒可通过逆转Th1和Th2细胞的免疫失衡达到对哮喘的早期干预作用，提高哮喘治愈率。动物实验表明给予槐杞黄颗组低粒联合雾化吸入治疗，可以明显提高巨噬细胞的吞噬能力，同时可以逆转Th1/Th2细胞失衡，以及减轻气道炎症反应。经过槐杞黄颗粒治疗3个月后测得免疫球蛋白A、G、M有一定程度升高,CD4和CD3增高,尤以CD4增高明显,CD4/CD8增高。

本实验结果显示与对照组相比，观察组患儿血清IL-12水平升高。由此推测槐杞黄颗粒可能通过对Th1/Th2型细胞因子的调节，即上调IL-12的水平，改善失衡的Th1/Th2细胞功能。这可能是槐杞黄颗粒在哮喘的发病过程中发挥有效治疗的作用机制之一。且槐杞黄颗粒临床应用后效果良好，未发现明显副作用，值得在儿科临床推广应用。

[1] Falcai A,Soeiro-Pereira PV,Kubo CA,et al.Peripheral blood mononuclear cells from severe asthmatic children release lower amounts of IL-12 and IL-4 after LPS stimulation[J].Allergol Immunopathol(Madr),2015,43(5):482-486.

[2] Smith T,Hewson AK ,Kingsley CI,et al.Interleukin-12 induces relapse in experim ental autoimmune encephalomyelitis in the Lewis rat[J].Am J Pathol,1997,150(6):1909-1917.

[3] 徐慧,申昆玲,殷菊,等.IL-12对小鼠哮喘模型Th亚群和气道炎症的影响[J]。临床儿科杂志,2008,26(9):798-802.

[4] 韩志英.槐杞黄颗粒治疗小儿反复呼吸道感染50例[J].中国中西医结合杂志，2004,24(6)：563-567.

[5] 孙雯，朱智，俞建，等.槐杧黄颗粒对阿霉素肾病大鼠肾组织nephrin和podocin表达的影响[J].中西医结合学报,2011, 9(5):546-552.

Effects of Huaiqihuang granule on IL-12 levels of children with asthma

TAO Jinjin，JIA Chunmei,LIU Kaiyun,YANG Junfeng

(1.GraduateSchoolofBaotouMedicalCollege，014060Baotou,China;2.TheFourthHospitalofBaotou，014030Baotou,China)

Objective:To evaluate the clinical effect of Huaiqihuang granule in the treatment of asthma in children by observing their blood concentration changes of serum interleukin-12 (IL-12). Methods: 96 cases of children with asthma were selected and divided into experimental group and control group. The patients in the control group received glucocorticoid and bronchodilators inhalation, combined with oral leukotriene receptor antagonist treatment. The children in the experimental group were treated with additional Huaiqihuang granule on the basis of treatment in the control group. 30 cases of healthy children were selected as healthy children group. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was adopted to detect the serum IL-12 levels of children in the experimental and control group before and after the treatment as well as of healthy children. Results:Before treatment there was not significant difference between the IL-12 levels in the experimental group and control group (P>0.05); The IL-12 levels in the two groups before treatment were lower than that in the healthy children group (P<0.05). After treatment the IL-12 levels in the experimental group increased higher than that in the control group (P<0.05) and the IL-12 levels in the two groups were lower than that in the healthy children group (P<0.05). Conclusion:IL-12 may be involved in the pathogenesis of asthma，and the use of Huaiqihuang granule may increase IL-12 level to achieve a therapeutic effect on asthma.

Asthma; Huaiqihuang granule; IL-12; Children

贾春梅

2015-09-04)