白细胞介素—21在类风湿关节炎发病中作用的研究

谷晓晶　郭迪斌　陈琥　李荣平　甘凤英

【摘要】 目的 研究血清中白细胞介素-21 （IL-21）与类风湿关节炎（RA）病情活动的关系。方法 40例病程<1年的RA患者作为观察1组， 40例病程>1年的RA患者作为观察2组， 40例健康成年人作为对照组， 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测三组研究对象血清IL-21， 对RA患者进行类风湿关节炎患者病情评价（DAS28评分）， 分析相关性。结果 观察2组的IL-21水平（520.42±74.38）ng/L高于观察1组（435.42±64.38）ng/L和对照组（332.84±30.12）ng/L， 差异均具有统计学意义 （P<0.05）；观察1组IL-21水平高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。观察2组的DAS28评分（5.02±0.87）分高于观察1组的（3.75±1.01）分， 差异具有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关分析显示， RA患者的血清IL-21水平与DAS28评分有显著相关性（r=0.300， P=0.028<0.05）。结论 IL-21水平和DAS28评分与风湿免疫性疾病的发生、发展相关， 对RA的临床诊断和确定治疗方案有一定意义。

【关键词】 白细胞介素-21；类风湿关节炎；酶联免疫吸附试验

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.26.026

IL-21是一种新近发现的细胞因子[1]， 国内外研究发现RA患者IL-21高水平促进了T淋巴细胞的激活、增殖及前炎症细胞因子[肿瘤坏死因子α（TNF-α） 和γ-干扰素（IFN-γ）等]的分泌， 从而诱发RA的发病， 但并未阐述IL-21在该疾病发展过程中的作用及对病情活动度的影响。本文研究探讨血清中IL-21水平对RA发生、发展及疾病活动程度的作用， 为早期诊断、干预治疗， 延缓病情的发展， 寻找RA新的治疗方法提供临床依据， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2013年1～12月本院风湿内科RA患者和体检科进行查体的健康成年人。RA患者纳入标准：①符合美国风湿病学会推荐的RA分类标准[2]；②未经糖皮质激素或免疫抑制剂治疗的患者；③排除合并其他自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮、干燥综合征、皮肌炎、肠炎性疾病等）；④对本次研究知情同意并签署知情同意书。40例病程<1年的RA患者作为观察1组， 男14例， 女26例， 年龄27～76岁， 平均年龄（58.32±10.95）岁；40例病程>1年的RA患者作为观察2组， 男12例， 女28例， 年龄31～74岁， 平均年龄（57.54±9.42）岁；40例健康成年人作为对照组， 男16例， 女24例， 年龄30～77岁， 平均年龄（57.77±9.75）岁。三组研究对象年龄、性别等一般资料比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法

1. 2. 1 检测血清IL-21水平 全部入组者清晨空腹坐位采集5 ml静脉血， 离心20 min， 离心转速：3000 r/min。离心后留取上清液， 保存于冰箱备检， 保存温度：-80℃。检测试剂盒：购自BioLegend公司， 检测设备：Multiskan FC型酶标仪（赛默飞世尔）， 采用ELISA法检测， 由同一位具有检验资格的操作人员完成检测。

1. 2. 2 DAS28评分 对RA患者进行DAS28评分。

1. 3 观察指标及评定标准 对比三组间IL-21水平， 对观察1组和观察2组中血清IL-21水平与DAS28评分的相关性进行分析。DAS28评分包括人体28个关节的压痛计数、肿胀计数、红细胞沉降率（ESR）或C反应蛋白（CRP）的水平以及患者的自身综合评估4个项目， 用来评估类风湿性关节炎的疾病活动性。根据DAS28分数判断病情的活动性：病情高度活动：DAS28评分≥5.1分；病情中度活动：3.2分

1. 4 统计学方法 采用SPSS13.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 两两比较采用t检验， 三组比较采用方差分析；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。相关性采用Pearson相关分析。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 三组血清IL-21水平和DAS28评分比较 观察2组的血清IL-21水平（520.42±74.38）ng/L高于观察1组（435.42±

64.38）ng/L和对照组（332.84±30.12）ng/L， 差异均具有统计学意义（P<0.05）；观察1组IL-21水平高于对照组， 差异具有统计学意义 （P<0.05）。观察2组的DAS28评分（5.02±0.87）分高于观察1组（3.75±1.01）分， 差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 相关性 Pearson相关分析显示， RA患者的血清IL-21水平与DAS28评分有显著相关性（r=0.300， P=0.028<0.05）。

3 讨论

IL-21是一种新近发现的Ⅰ型细胞因子， 主要包含162个氨基酸， 由活化的CD3+T细胞中克隆、CD4+T细胞分泌产生[1]。IL-21具有广泛的免疫调节生物学功能， 与其受体（IL-21R）结合后能够调节B细胞的增生， 促进T细胞、自然杀伤细胞（NK细胞）的增殖、分化， 提高NK细胞杀伤活性。近期大量国内外实验[3-6]证实：IL-21表达水平在风湿免疫性疾病升高， 可能与RA的发生、发展相关， 调节IL-21和IL-21R表达水平和阻断该信号传导系统， 有希望在风湿免疫性疾病方面提供一种新的治疗方法。

本次研究结果发现：观察2组的DAS28评分（5.02±0.87）分高于观察1组（3.75±1.01）分， 差异具有统计学意义 （P<0.05）， 说明观察2组的疾病活动度高于观察1组的患者。本次研究结果同时发现：随着病情的进展， 观察2组的IL-21水平（520.42±74.38）ng/L高于观察1组（435.42±64.38）ng/L和对照组（332.84±30.12）ng/L， 差异均具有统计学意义 （P<0.05）；观察1组高于对照组， 差异具有统计学意义 （P<0.05）， 证明血清IL-21水平升高可以提示RA疾病的严重程度。Pearson相关分析显示， RA患者的血清IL-21水平与DAS28评分有显著相关性（r=0.300， P=0.028<0.05）。

综上所述， IL-21表达水平和DAS28评分与风湿免疫性疾病的发生、发展相关， 对RA的临床诊断有一定意义， 调节IL-21的表达水平有希望成为一种新的治疗RA的方法。

参考文献

[1] Ruffin N， Lantto R， Pensieroso S， et al. Immune activation and increased IL-21R expression are associated with the loss of memory B cells during HIV-1 infection. J Intern Med， 2012， 272（5）：492-503.

[2] Liu W， Dienz O， Robert SB， et al. IL-21R expression on CD3+T cells promotes CD3+ T cell activation in coxsackievirus B3 induced myocarditis. Molecular Pathology， 2012， 92（3）：327-333.

[3] Totero D， Capaia M， Fabbi M， et al. Heterogeneous expression and function of IL-21R and susceptibility to IL-21-mediated apoptosis in follicular lymphoma cells.Experimental Hematology， 2010， 38（5）：373-383.

[4] 杨晓东， 卢建明， 饶丽华， 等.白细胞介素21受体mRNA的表达与检测对RA患者的临床应用探讨.医学综述， 2015， 21（3）： 524-525.

[5] Liu R， Bai Y， Vollmer TL， et al. IL-21 receptor expression determines the temporal phases of experimental autoimmune encephalomyelitis. ExpNeurol， 2008， 211（1）：14-24.

[6] Piao WH， Jee YH， Liu RL， et al. IL-21 modulates CD4+ CD25+regulatry T-cell homeostasis in experimental autoimmune encephalomyelitis. Scand J Immunol， 2008， 67（1）：37-46.

[收稿日期：2016-08-15]