不同亚型肠易激综合征患者肠道机械屏障的改变

计敏 王建蔚 蓝显明 于林芳 兰春燕

不同亚型肠易激综合征患者肠道机械屏障的改变

计敏 王建蔚 蓝显明 于林芳 兰春燕

目的：观察不同亚型肠易激综合征（IBS）患者肠黏膜机械屏障的变化，探讨这些改变在IBS发病中的可能作用和临床意义。方法：按照罗马Ⅲ标准选取腹泻型（IBS-D组）、便秘型（IBS-C组）及混合型（IBS-M组）IBS患者及正常对照组各20例，检测其结肠黏膜标本及血清D-乳酸、DAO水平，并对比分析。结果：对照组微绒毛高度、肠腺深度、黏膜厚度均显著大于各亚型IBS患者（P＜0.01），且不同亚型IBS患者中以IBS-D组上述指标减低最为明显。血清D-乳酸、DAO水平IBS-D组均较其他三组显著升高（P＜0.01），而IBS-M组DAO水平也较IBS-C组和对照组有着明显升高（P＜0.05）。结论：肠黏膜机械屏障受损在腹泻型IBS的发病中起着更为重要的作用，肠黏膜通透性增高与腹泻症状密切相关。

肠易激综合征；亚型；肠黏膜机械屏障；腹泻

肠易激综合征（Irritable Bowel Syndrome，IBS）是一种十分常见的肠道功能紊乱性疾病，在不同亚型、不同群体主要的发病机制可能有所不同。已有研究发现IBS患者肠黏膜屏障功能受损，肠道通透性增加，但对不同亚型IBS患者肠道机械屏障功能改变的研究未见大量报道。本研究通过观察各亚型IBS患者肠道机械屏障的改变，探讨这些改变在IBS发病中的可能作用和临床意义。

1 资料和方法

1.1 一般资料 随机抽取2013年1月至2014年12月在我院消化内科门诊、病房及肠道门诊的不同亚型IBS患者共60例，IBS诊断标准按照罗马Ⅲ标准［1］，其中腹泻型（IBS-D组）、便秘型（IBS-C组）及混合型（IBS-M组）各20例，病程1～10年，均经生化、内镜、B超、X线、CT等影像学检查，排除肠道器质性病变、感染性疾病、免疫疾病、其他重大内科系统疾病及胃肠道外科手术史。另随机选取我院体检证实为健康者20例为对照组。各组的年龄及性别组成经统计分析无明显差异（P＞0.05）。

1.2 研究指标和方法 所有实验对象均在结肠镜下于结肠直乙交界处取活检标本2～3块，立即放入10%中性福尔马林固定液中固定，进行标准石蜡包埋，切片（厚6μm），HE染色，常规光镜下观察，用目镜测微尺随机全盲测值。每个患者取5张不连续的切片，每张切片顺次取奇数视野测20个结肠微绒毛的高度、肠腺深度及结肠黏膜厚度。所有研究对象分别定量检测血清D-乳酸和DAO水平。抽取静脉全血4ml，1000g离心15分钟后取血清分装保存，-20℃保存、送检，避免反复冻融。D-乳酸和DAO检测均采用ELISA法，D-乳酸试剂采购自Abnova公司，DAO试剂采购自武汉华美。

1.3 统计学处理 采用SPSS13.0版软件行方差分析和q检验，P＜0.05为检验水准。

2 结果

2.1 各组结肠黏膜形态学测定值比较 各组结肠肠壁层次清楚，黏膜上皮结构完整。IBS患者的结肠黏膜微绒毛分度不均、长短不一，有微绒毛断裂现象。相关形态学参数测值显示，IBS-C组、IBS-M组和对照组结肠的微绒毛高度、肠腺深度、黏膜厚度均显著大于IBS-D组（P＜0.05），而对照组以上形态学指标测值又显著大于IBS-C组和IBS-D组（P＜0.05）。见表1。

2.2 各组血清D-乳酸、DAO测定结果 血清指标测定结果显示无论是D-乳酸还是DAO，IBS-D组均较其他三组显著升高（P＜0.05），而IBS-M组DAO水平也较IBS-C组和对照组有着明显升高（P＜0.05）。见表2。

表2 各组血清D-乳酸、DAO测定结果

3 讨论

肠黏膜屏障包括完整的肠上皮细胞及其细胞间连接构成的机械屏障、胃肠相关淋巴样组织及分泌的抗体所构成的免疫屏障和肠道正常菌群构成的生物屏障，在维持肠道菌群稳定、防止肠道内细菌及内毒素移位过程中起重要作用［2］。在构成肠道屏障的各种因素中，最重要的还是肠道上皮机械屏障。研究肠黏膜机械屏障的功能与结构，可以提高我们对疾病的病因及病理生理认识，并且对于早期检测疾病以及对疾病进行二级预防有重要意义。

IBS是最常见的消化系统疾病之一，其发病机制尚不明确，一般认为与精神、饮食、遗传、胃肠道动力障碍、肠道菌群失调等因素有关。目前，越来越多研究认为IBS患者肠黏膜屏障功能障碍、肠道通透性增高与IBS的发病密切相关［3］。Spiller等［4］研究发现，在感染后IBS和腹泻型的非感染后IBS患者中均可看到明确的肠黏膜通透性增加，提示除炎症机制外还有其他机制导致肠道黏膜通透性增加。Dunlop等［5］运用51Cr-EDTA方法发现感染后IBS患者小肠黏膜通透性较便秘型IBS及对照组明显增加。肠黏膜形态学研究能够直观地表现肠道黏膜的损害程度，反映肠道黏膜的机械屏障功能。我们的研究发现，IBS患者结肠黏膜普遍存在微绒毛分布不均、长短不一，有断裂现象，对照组微绒毛高度、肠腺深度、黏膜厚度均显著大于各亚型IBS患者（P＜0.05），且不同亚型IBS患者中以IBS-D组上述指标减低最为明显。正常情况下人血清中D-乳酸水平很低，因为D-乳酸是细菌代谢和裂解的产物，人类身体组织即不产生D-乳酸，也不能或仅能缓慢代D-乳酸。当肠屏障功能受损，肠黏膜通透性异常升高时，肠道细菌产生的大量D-乳酸透过肠黏膜进入血液循环，因此检测其外周血水平即可反映肠黏膜损害程度和通透性变化。DAO是一种含有脱氨的腐胺和组胺的细胞内酶，是组胺等多胺物质的分解代谢酶，95%以上存在于哺乳动物小肠的黏膜或纤毛上皮细胞中。它是具有高度活性的细胞内酶，其活性与绒毛高度及肠黏膜细胞的核酸和蛋白合成密切相关。小肠黏膜屏障功能受损时，肠黏膜细胞脱落入肠腔，DAO进入肠细胞间隙淋巴管和血流，使血DAO升高。因此，血DAO活性可反映肠黏膜屏障损伤和修复情况。本研究显示，血清D-乳酸、DAO的变化主要发生于IBS-D组患者，表现为无论是D-乳酸还是DAO，IBS-D组均较其他三组显著升高（P＜0.05）。而IBS-M组DAO水平也较IBS-C组和对照组有着明显升高（P＜0.05），提示存在腹泻症状的IBS患者肠黏膜通透性增加更为明显。有学者应用乳果糖/甘露醇的检测方法同样发现，腹泻型IBS患者肠黏膜通透性较正常人增加［6］。因此，我们推测，肠黏膜机械屏障受损在腹泻型IBS的发病中起着更为重要的作用，肠黏膜通透性增高与腹泻症状密切相关。肠道黏膜通透性的增加使得黏膜下组织更容易暴露于病原体和毒素，进一步激活局部免疫、炎性反应，释放各种刺激因子，直接激活肠道的感受器，导致胃肠运动、感觉及分泌异常，出现腹泻症状。

［1］中华医学会消化病学分会胃肠动力学组.肠易激综合征诊断和治疗的共识意见［J］.中华全科医师杂志，2008，5（7）:298-300.

［2］张小琴，白爱峰，李慧贤，等.富县农民健康体检结果分析［J］.延安大学学报:医学科学版，2010，8（1）:69-70.

［3］左戎，王巧民，张旭，等.感染后肠易激综合征患者结肠黏膜超微结构的变化与肠黏膜屏障功能障碍的关系［J］.蚌埠医学院学报，2012，37（2）:171-175.

［4］Spiller RC，Jenkins D，Thornley JP，et al.Increased rectal mucosal enteroendocrine cells，T lymphocytes and increased gut permeability following acute campylobacter enteritis and in post-dysenteric irritable bowel syndrome［J］.Gut，2000，47（6）:804-811.

［5］Dunlop SP，Hebden J，Campbell E，et al.Abnormal intestinal permeability in subgroups of diarrhea predominant irritable bowel syndromes［J］. Am J Gastroenterol，2006，101（6）:1288-1294.

［6］Zhou Q，Zhang B，Verne GN.Intestinal membrane permeability and hypersensitivity in the irritable bowel syndrome［J］.Pain，2009，146（1）: 41-46.

Changes of intestinal mucosal mechanical barrier in patients with irritable bowel syndrome

Ji Min1，Wang Jianwei2，Lan Xianming1，Yu Linfang1，Lan Chunyan3.1.Department of Gastroenterology，the Second People's Hospital of Longgang District，Shenzhen 518112，China；2. Department of Pathology，the Second People's Hospital of Longgang District，Shenzhen 518112，China；3.Department of Traditional Chinese Medicine，the Second People's Hospital of Longgang District，Shenzhen 518112，China

Objective:To investigate the changes of intestinal mucosal mechanical barrier in patients with different subtype irritable bowel syndrome（IBS），and explore the role of these changes in the pathogenesis of IBS.Methods:IBS and its three subtypes were diagnosed according to the Rome Ⅲ.In 20 healthy controls，20 patients with diarrhea-predominant IBS（IBS-D），20 patients with constipation-predominant IBS（IBS-C）and 20 patients with mixed bowelhabits IBS（IBS-M），colonic mucosa and D-lactate，DAO in the serum were analyzed.Results:The height of microvilli，the density of enteraden and the mucosal thickness of colon in control group was significantly greater than those in the IBS groups（P＜0.01）.These indicators in IBS-D group reduced remarkably than that in the other two groups.The serum levels of D-lac-tate and DAO in IBS-D group were significantly higher than those in the other three groups（P＜0.01）.The serum level of DAO in IBS-M group was significantly increased than it in IBS-C group and control group.Conclusion:Impaired intestinal mucosal mechanical barrier plays a more important role in the pathogenesis of IBS-D.The increase of intestinal mucosal permeability is closely related to the symptoms of diarrhea.

IBS；subtype；intesti；nal mucosal mechanical barrier；diarrhea

A

1004-2725（2016）05-0324-03

深圳市科技创新项目（项目编号：JCYJ20140415112419066）

518112 广东 深圳，深圳市龙岗区第二人民医院消化内科（计敏、蓝显明、于林芳），病理科（王建蔚），中医科（兰春燕）

计敏，E-mail:bjjimin@163.com