肝细胞癌中转化生长因子β激酶1、核因子-κB和P53的表达

朱玉峰　祁　明　于晓东　尹逊天

(辽宁医学院附属第一医院普外微创肝胆病区，辽宁　锦州　121000)



肝细胞癌中转化生长因子β激酶1、核因子-κB和P53的表达

朱玉峰祁明1于晓东尹逊天

(辽宁医学院附属第一医院普外微创肝胆病区，辽宁锦州121000)

目的检测肝细胞癌中转化生长因子β激酶(TAK)1、核因子(NF)-κB和突变型P53基因(P53)的表达，分析其临床意义。方法58例肝细胞癌术后存留的蜡块组织作为观察组，30例距肿物边缘大于3 cm的正常肝组织术后存留的蜡块组织作为对照组。应用免疫组化SP法检测二组中TAK1、NF-κB和P53的表达。结果二组中TAK1、NF-κB和P53的阳性率差别有统计学意义。观察组中TAK1、NF-κB和P53的阳性率均与肿瘤的分化程度、肿瘤最大径、脉管内癌栓密切相关。相关分析显示观察组中TAK1和NF-κB的表达呈正相关性。结论肝细胞癌中TAK1、NF-κB和P53高表达对肿瘤的发生和进展均有重要作用。TAK1和NF-κB可能具有正向协同作用。

肝细胞癌；转化生长因子β激酶(TAK)1；核因子(NF)-κB；P53；免疫组化

肝细胞癌是起源于肝细胞的恶性肿瘤，病变形成过程中可以出现蛋白的表达异常〔1〕。转化生长因子β激酶(TAK)1是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，又名MAP3K7，属于丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)中的一种，其在肿瘤中介导的信号转导通路主要是应激反应、炎症免疫反应，TAK1在肿瘤中常高表达〔2，3〕。核因子(NF)-κB是一种多向性、多功能的核转录因子，可以调控细胞凋亡和增殖过程，在上皮细胞癌变过程中发挥重要作用〔4，5〕。突变型P53基因(P53)高表达是肿瘤进展的重要因素〔6〕。本实验检测肝细胞癌中TAK1、NF-κB和P53的表达，关注其临床意义。

1　材料和方法

1.1临床资料我院行手术治疗的肝细胞癌患者作为观察组，共58例，均留取术后蜡块组织，年龄47～75岁，平均62.3岁，其中男30例，女28例。均经术后病理医师阅片确诊。30例距肿物边缘大于3 cm的正常肝组织术后存留的蜡块组织作为对照组，年龄48～72岁，平均61.7岁，其中男15例，女15例。二组一般资料无明显差别。

1.2TAK1、NF-κB和P53的检测方法免疫组化检测应用SP法，均由主管技师完成，按说明书操作，做好质控。

1.3TAK1、NF-κB和P53的判定方法TAK1和NF-κB以细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性，P53以细胞核中呈现棕黄色为阳性，低倍镜下选择上皮细胞集中的区域，于400倍下进行计数，共选择5个高倍视野的细胞，计算阳性率，并取平均值，以<10%定为阴性，以≥10%定为阳性。

1.4统计学方法应用SAS6.12软件进行χ2检验或线性相关分析。

2　结　果

2.1二组中TAK1、NF-κB和P53阳性率的比较二组中TAK1、NF-κB和P53的阳性率差别均有统计学意义。见表1。

表1　二组中TAK1、NF-κB和P53阳性率的比较〔n(%)〕

2.2观察组中TAK1、NF-κB和P53阳性率在不同临床特征中的比较观察组中TAK1、NF-κB和P53的阳性率均与肿瘤的分化程度、最大径和脉管内癌栓密切相关。见表2。

表2　观察组中TAK1、NF-κB和P53阳性率在不同临床特征中的比较〔n(%)〕

2.3观察组中TAK1、NF-κB和P53的相关性TAK1和NF-κB(r=0.46，P<0.05)具有正相关性。其他指标之间未见明显相关性(P>0.05)。

3　讨　论

肝细胞癌患者既往或现在有不同原因的慢性肝病史，发生肿瘤的临床危险因素主要是肝硬化〔7，8〕。肿瘤的大小与大体特征与肝硬化有关，有肝硬化的肿瘤可表现为膨胀性生长，伴有纤维包膜和肿瘤内分隔；而无肝硬化的肿瘤趋向于呈巨块型和无包膜。不同程度的浸润性生长、门静脉瘤栓和肝内转移在进展期肿瘤很常见，并呈现不同的肉眼形态。肿瘤的另一个特征是侵犯血管，尤其是门静脉。肝内转移多是由于肿瘤通过门静脉分支扩散所致。组织病理学显示病变由类似肝细胞的肿瘤细胞组成，间质由衬覆单层内皮细胞的血窦样腔隙组成，与正常的肝组织血窦内皮细胞不同，其内皮细胞免疫组化CD34和F8因子阳性。超微结构观察显示在内皮细胞和肿瘤细胞小梁间有基底膜样结构，这种腔隙似毛细血管，此种特征也称为毛细血管化。肿瘤的病变结构表现为小梁状、假腺样和腺泡型、实性型和硬化型，病变的形成和进展中均可见相关蛋白的表达失调〔9〕。本实验提示TAK1、NF-κB和P53高表达是肝细胞癌形成的重要促进因素。TAK1近年来研究较多，被认为与肿瘤的形成有关〔10，11〕。生理状态下MAPKs主要调控细胞生长、分化、凋亡、促进细胞发育和维持组织内环境稳定，病理状态下则参与肿瘤性病变，尤其是炎性相关肿瘤的发生发展〔12〕。近来研究显示TAK1的表达可能与NF-κB有一定的协同作用〔13，14〕。NF-κB是近年来发现的一种转录因子，其表达与肿瘤的浸润、黏附、转移行为密切相关〔15，16〕。有学者认为NF-κB引起肿瘤细胞浸润、黏附、转移的原因是由于NF-κB激活后导致许多黏附分子、血管生成因子及基质金属蛋白酶释放，同时促进肿瘤性的增殖反应引起的〔17，18〕，其作用具有多元性。P53分为野生型和突变型，野生型P53主要通过细胞周期阻滞、DNA修复和凋亡等机制维持正常细胞的生长，进而抑制细胞的恶性增殖〔19〕。而突变型P53则丧失了其抑癌作用，促使细胞进入增殖周期，使细胞分化能力下降，凋亡受到抑制，形成永生化，进而形成肿瘤〔20，21〕。本文提示TAK1、NF-κB和P53的三种蛋白参与肿瘤的分化过程，三者高表达使肿瘤的分化发生障碍，肿瘤细胞趋于幼稚。三种蛋白高表达时肿瘤生长加速，肿瘤的体积增大，浸润能力增强。三种蛋白高表达时参与肿瘤细胞的脉管浸润，肿瘤易于迁移及播散。TAK1和NF-κB具有正向协同作用。其协同作用机制有学者认为TAK1去磷酸化负向调控肿瘤坏死因子和白细胞介素1，进而诱导NF-κB的激活而形成肿瘤〔22，23〕。但是其具体机制有待更多实验证实。

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〔2015-01-22修回〕

(编辑杜娟)

朱玉峰(1985-)，男，硕士，主治医师，主要从事普外微创肝胆疾病研究。

R735

A

1005-9202(2016)17-4246-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.17.054

1辽宁医学院附属第一医院超声科