五酯胶囊对他克莫司药代动力学的影响

米　丽，位　华，李敬超，秦士新，茅建辉



五酯胶囊对他克莫司药代动力学的影响

米丽1，位华2，李敬超3，秦士新4，茅建辉1

目的观察不同剂量五酯胶囊对他克莫司药代动力学的影响。方法40名健康志愿者，随机分为5组，在口服给药2 mg 他克莫司5 min后，分别给予0、1、2、6及8粒五酯胶囊，于给药前、给药后不同时间点静脉取血，置于抗凝管中，保存至分析测定。结果他克莫司的药物动力学参数AUC0→t、Tmax随着五酯胶囊剂量的增大而增大，最大时分别可达到(459.3±114.2)ng/(h·ml)和(3.125±1.356)h，而Cmax则在五酯胶囊服用2粒时最大，达(43.539±10.656)ng/ml。口服清除率 (CL/F ratio), 1粒五酯胶囊时，就降至到51.67%，当服用8粒时，降至到27.09%。结论合用五酯胶囊后，他克莫司在体内代谢速度减慢，清除率降低，血药浓度升高。

他克莫司；五酯胶囊；药动学; 高效液相色谱法

他克莫司(Tac rolimus，FK506，他克莫司普乐可复)，是1984年由日本科学家首次从链霉菌代谢产物中发现的大环内酯类抗生素，目前在临床上作为一种新型免疫抑制药使用。五酯胶囊主要是以中药南五味子进行醇提取，然后经沉淀分离获得其中脂溶性的有效成分，具有包括保肝降酶、抑制中枢神经系统、抗炎抗病毒等多种生物活性[1]，同时具有明确的肝细胞损伤阻滞作用，能明显改善肝细胞代谢[2]，稳定肝细胞膜的功能和通透性，有效地降低肝细胞广泛损害后的血清转氨酶(ALT或AST)升高[3]，目前已经成为肝炎治疗中重要的药物选择。文献[4]报道，接受器官移植患者服用他克莫司和五酯胶囊，患者体内他克莫司的稳态血药浓度显著上升，且未见明显的排异反应发生率提升风险。若两药能组合服用，可能减少他克莫司的治疗剂量，从而减少移植患者的经济负担。笔者观察不同剂量五酯胶囊对健康人体内他克莫司药代动力学的影响，初步探讨两药合用的剂量比，为临床合理使用两药提供理论依据。

1　对象与方法

1.1对象40名健康志愿者，均为男性，平均 (24.5±1.6)岁，体重(68.1±5.4) kg，身高 (171.6±3.2) cm。实验前所有志愿者经过体格检查和实验室检查，各项检查指标均正常。 试验前详细告知志愿者试验过程及内容，并签订知情通知书后，报医院伦理委员会审批通过。

1.2给药方案受试者于试验前1 d下午6时进入临床医院Ⅰ期病房，7时进清淡饮食，10时以后禁食，不禁水。 40名志愿者随机分为5 组，每组8人。5组的他克莫司剂量均为1.2 mg/kg，而五酯胶囊分别是0、1、2、6、8粒，两药合用时按先五酯胶囊后他克莫司，间隔5 min。

1.3抽血时间于给药(他克莫司)前及给药后0、2.5、5、10、15、30 min, 以及1、2、3、4、 6、8、12、24、36、48 h，肘窝内侧静脉取血0.3 ml，置肝素抗凝管中。

1.4药品与仪器设备药品：五酯胶囊1粒，来自四川禾正制药有限责任公司；他克莫司，硬胶囊1 mg，50粒盒，Fujisawa Ireland Ltd，注册证号 H20020376。仪器：Agilent 6410A 液-质联用系统(美国安捷伦公司)，TDL-5型高速离心机(上海安亭科学仪器)厂。

1.5实验方法

1.5.1标准溶液配制移液管精密量取混合入对照品的储备液，采用乙腈-水(混合比例10∶90，v/v)混合溶液逐级稀释，得到浓度分别为1、2.5、5、10、25、50、100、250、500 ng/ml的他克莫司标准溶液，摇匀后作为制备标准曲线的溶液备用，4 ℃冰箱保存。

1.5.2他克莫司测定取全血100 μl，加入具塞离心管中，漩涡震荡约30 s；加含内标物利托那韦的甲醇300 μl，混合均匀；漩涡震荡2 min，12 000 r/min，离心10 min，移取上层溶液(有机相)100 μl，静置30 s，加入液-质联用设备，分析检测。色谱仪条件：色谱柱,Zorbax SB型，C18柱(3.5 pm，100 mm×2.1 mm，安捷伦)；流动相使用乙睛-甲醇-0.1%甲酸水(甲酸水作为溶液)；流速，0.3 ml/min；运行时间 8.0 min；柱温，35 ℃。质谱条件：离子源，ESI；模式，正离子；毛细管电压，4000 V；使用氮气进行雾化，雾化压力为40 psi；氮气去溶剂，温度为350 ℃，流速为10 L/min；高纯氮气作为碰撞气，压力为0.1 MPa；质谱的半峰宽均为0.6 amu。他克莫司的MRM条件为826-616，传输能量250 V，碰撞能量45 eV；利托那韦的MRM条件为721-296，传输能量175 V，碰撞能量15 eV。

2　结　　果

他克莫司的药物动力学参数AUC0→t、Tmax随着五酯胶囊剂量的增大而增大，最大时分别可达到(459.3±114.2)ng/(h·ml)和(3.125±1.356)h，而Cmax则在五酯胶囊服用2粒时最大，达(43.539±10.656)ng/ml。而CL/F、CL/F ratio则随着五酯胶囊剂量的增大而逐渐减小(表1)。合用五酯胶囊的各组服药后不同时间点全血中他克莫司浓度均高于未合用五酯胶囊的组(图1)。

表1　健康志愿者服用五酯胶囊和他克莫司后体内他克莫司的药物动力学参数　±s；n=8)

注：组1～5他克莫司剂量均为1.2 mg/kg，而五酯胶囊分别是0、1、2、6、8粒。表示与组1比较，①P<0.05，②P<0.01

图1　健康志愿者他克莫司合用不同剂量五酯胶囊后人体全血中他克莫司的平均血药浓度-时间曲线2 mg FK506表示2 mg的他克莫司，五酯胶囊表示五酯胶囊

3　讨　　论

本次试验采用液-质联用技术，研究了合用五酯胶囊后他克莫司在人全血中的药动学过程。经考察，由本方法测得的合用五酯胶囊后他克莫司体内主要药动学参数达峰时间、峰浓度、药-时曲线下面积均有明显增加，药物半衰期缩短，t1/2减少百分率为54.5%。提示合用五脂胶囊后，他克莫司在体内代谢速度减慢，清除率降低，药物血药浓度升高，这一结果与文献[5，6]报道类似。

本研究结果显示，他克莫司Tmax随五酯胶囊剂量的递增逐渐延迟，即从1.5 h延长至3.125 h；对于他克莫司CL/F ratio，当同时服用1粒五酯胶囊时，就降至51.67%，当服用8粒时，降至27.09%。实验发现，他克莫司的Cmax及AUC随五酯胶囊剂量的增加逐渐增大：当剂量增加至6粒时，他克莫司的药时曲线下面积上升到373，同时服用1粒五酯胶囊时，他克莫司Cmax值就显著提高到了35.28 ng/ml，2粒时，Cmax上升为最大值43.539，直到6粒时，Cmax值有所降低并出现了个平台期，且C12、C24维持5～10 ng/ml。

以上表明，五酯胶囊能够明显升高健康志愿者体内处于稳定的他克莫司血药浓度，并随五酯胶囊剂量的增加，其血药浓度升高。当口服2 mg 他克莫司，同时服用五酯胶囊 6粒时，他克莫司 C12 h谷浓度上升至7.556 ng/ml，C24 h仍能维持在5 ng/ml以上，因此将其作为推荐组合剂量。

[1]陈超，邬义强，林述龙.五酯胶囊联合西药治疗慢性乙型肝炎42例疗效观察[J].云南中医中药杂志，2008, 29(11)：23-24.

[2]Anglicheau D, Legendre C, Beanne P,etal. Cytochrome P450 3A polymorphisms and immunosuppressive drugs: an update[J].Pharmacogenomics,2007,8(7):835-849.

[3]MacPhee I A, Holt D W. A. pharmacogenetic strategy for immunosuppression based on the CYP3A5 genotype [J]. Transplantation, 2008, 85(2):163-165.

[4]刘丽娟，赖雁威，李慧云，等. 肝移植患者他克莫司谷血药浓度监测意义和临床个体化用药调节[J]. 现代生物医学进展,2015，25(12)：1026-1030.

[5]Park J Y, Shin H K，Choi Y W，etal. Gomisin A induces Ca2+-dependent activation of eNOS in human coronary artery endothelial cells [J]. J Ethnopharmaco1, 2009, 125(2)：291-296.

[6]徐艳霞.中草药对肝细胞色素P450的作用[J].中国药理通讯，2005，22(3)：64-68.

(2015-08-26收稿2015-11-30修回)

(责任编辑武建虎)

Effect of Wuzhi capsules on pharmacokinetics of tacrolimus

MI Li1，WEI Hua2, LI Jingchao3, QIN Shixin4, and MAO Jianhui1.

1.Department of Gastroenterology, 4.Medical Department,Shanghai Municipal Corps Hospital, Chinese People’s Armed Police Force, Shanghai 201103, China; 2.Department of Gastroenterology, Shanghai Changzheng Hospital，Shanghai 200433，China; 3. Medical Department, Hainan Provincial Corps Hospital, Chinese People’s Armed Police Force, Haikou 570203, China

ObjectiveTo evaluate the effect of different doses of Wuzhi capsules on the pharmacokinatics of Tacrolimus in healthy human body. Methods40 healthy volunteers were divided into 5 groups, and 0, 1, 2, 6, 8 capsules of Wuzhi capsules were given to each group accordingly after 2 mg of tacrolimus was given systematically. Venous blood was collected before and at different time points after drug administration. Blood samples were collected in anti-coagulation tubes and stored till analysis. ResultsThe dose of tacrolimus was increased with the increase of the dose of Wuzhi capsules AUC0→t, Tmax, and the largest were (459.3±114.2)ng·h/ml and(3.125±1.356)h, respectively, and Cmax was the largest after taking two capsules (43.539±10.656) ng/ml. The CL/F ratio decreased from 51.67% to 27.09% when the dose of Wuzhi capsules increased from 1 capsule to 8 capsules. ConclusionsThe metabolic rate of tacrolimus decreases, the clearance rate decreases and the blood concentration increases when Wuzhi capsules are administered together with tacrolimus.

Tacrolimus; Wuzhi capsules; pharmacokinetics；HPLC

米丽，硕士，主管药师。

201103,武警上海总队医院：1.药剂科，4.医务处;2.200041上海, 第二军医大学长征医院药剂科;3.570203海口，武警海南总队医院医务处

位华，E-mail: wh7975@163.com

R978; R657.3