大叶伞离体快繁技术研究

付影

摘要 以大叶伞当年生嫩叶为外植体材料，研究了大叶伞愈伤组织诱导及分化的最适激素组合。结果表明：MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L为最适宜愈伤组织诱导的培养基，MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L为最适宜愈伤组织分化的培养基；1/2MS为最适生根培养基。

关键词 大叶伞；离体；快繁；最适培养茎

中图分类号 S687 文献标识码 A 文章編号 1007-5739（2016）05-0160-01

大叶伞（Schefflera actinophlla）为五加科鹅掌柴属的常绿乔木，又名澳洲鹅掌柴、辐叶鹅掌柴、昆士兰伞木等。原产于澳大利亚昆士兰州及东南亚热带地区，喜光照及高温高湿环境，耐阴性亦强[1]。大叶伞茎杆直立，少分枝，嫩枝绿色，株形优雅，是优良的室内观叶植物。大叶伞可用播种或扦插繁殖，但此2种育苗方式增殖均较慢。鞠志新等[2-3]采用大叶伞嫩芽和带芽茎段，成功建立了其组织培养技术体系，但以嫩叶为外植体时，只诱导出愈伤组织，未能分化出芽。本文以大叶伞当年生嫩叶为材料，通过愈伤组织诱导、分化，植株再生研究，建立了大叶伞离体快繁技术体系。

1 材料与方法

1.1 外植体材料准备

取材季节为春季。取材母株要求健壮、无病虫害，从其上剪取幼嫩叶片。首先将叶片表面附着的灰尘、泥沙等物用清水冲洗干净，然后将其用洗洁精稀释液逐个清洗，最后用流水冲洗干净。洗净的材料置于超净工作台上，先在75%酒精浸泡30 s，无菌水冲洗1遍，然后用有效氯含量为2%的NaClO溶液消毒7～8 min，最后用无菌水冲洗4～5次，且每次冲洗时间不少于1 min。对外植体进行消毒处理与无菌水冲洗时，均使用无菌培养瓶震荡进行。

1.2 试验方法

采用添加0.65%琼脂粉和3%蔗糖，pH值5.8，附加不同激素组合的MS培养基。配制完成分装后，于温度121 ℃、压力1.1 kg/cm2的条件下灭菌15 min。将消毒好的叶片背面朝上接种。无特殊说明，在温度（25±2）℃、光照强度1 000～1 500 lx、光照时间12 h/d的条件下进行培养[4-6]。

2 结果与分析

2.1 不同激素组合对大叶伞当年生嫩叶愈伤组织诱导的影响

以大叶伞当年生嫩叶为外植体材料，先用75%酒精浸泡30 s，再用2% NaClO溶液消毒7 min，外植体存活率在80%以上。将叶背朝上平放于愈伤组织诱导培养基上，先暗培养7 d，7 d后叶片即开始膨大反卷，转入光培养后，即可诱导形成愈伤组织。培养30 d后进行调查。

从表1可以看出，随着6-BA和NAA浓度的增加，愈伤组织质量由平滑变为致密，且诱导的愈伤组织呈现出先增大后减小的趋势。因此，在进行愈伤组织时，激素用量并非越多越好，而是要在适当范围内。结果表明，6-BA 1.0 mg/L+2，4-D 0.5 mg/L组合诱导愈伤组织质量较好，为绿色致密愈伤。6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.25 mg/L组合诱导愈伤组织为黄绿色较疏松愈伤，6-BA 4.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L组合和6-BA 5.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L组合诱导愈伤为平滑愈伤，均不利于后面愈伤组织的分化。

2.2 愈伤组织的分化

将叶片诱导产生的愈伤组织转接到分化培养基中，研究不同激素组合对愈伤组织分化的影响。培养30 d后进行调查。从表2可以看出，MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L中，10 d后愈伤组织表面开始转绿，20 d后愈伤组织表面可诱导出绿色小芽点，30 d后其不定芽诱导率可达75%（图1）。不定芽分化培养基中BA浓度在1.0～2.0 mg/L时，愈伤组织均可诱导产生不定芽；但NAA浓度高于0.5 mg/L时，愈伤组织则长出白色根系而不能诱导出芽。将愈伤组织诱导产生的不定芽转入培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L中，不定芽增殖系数可达4.5，但长期在此培养基中培养，会出现玻璃化苗，需用MS培养基做隔代培养（图2）。

2.3 生根与炼苗移栽

将生长健壮且苗高在1.5 cm以上的无菌苗转入生根培养基1/2MS中。10 d后，幼苗基部可见根点，培养20～30 d幼苗基部长出4～6条白色不定根，生根率在95%以上。当幼苗根长到0.2～0.5 cm时，即可放置于室内自然光下炼苗。7 d后根长均在1 cm以上，转入温室内放置2～3 d后再将培养瓶盖子打开，洗去幼苗基部残留的培养基，用0.1%多菌灵消毒10 min，防止根部腐烂，移栽到珍珠岩∶腐殖土=1∶1混合的基质中。定期喷雾，注意遮荫。移栽1个月后，成活率可达（下转第163页）

95%以上。

3 结论

试验结果表明，MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L为最适宜愈伤组织诱导的培养基，MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L为最适宜愈伤组织分化培养基；1/2MS为最适生根培养基。

4 参考文献

[1] 刘燕.园林花卉学[M].北京：中国林业出版社，2003：282-283.

[2] 鞠志新，戚继忠，顾德峰.大叶伞组织培养技术研究[J].辽宁林业科技，2007（6）：21-23.

[3] 鞠志新，张启翔，戚继忠，等.辐叶鹅掌柴组织培养和快速繁殖[J].植物生理学通讯，2007，43（3）：506.

[4] 陈少萍，刘华敏.大叶伞栽培管理与病虫害防治[J].中国花卉园艺，2008（12）：38-39.

[5] 武建云，王华宇，杨利平，等.大叶伞标准化繁育技术研究[J].湖北农业科学，2014（21）：5285-5288.

[6] 张卫国，刘鹏，程伟燕，等.不同浓度生长激素对鹅掌柴扦插生根的影响[J].内蒙古民族大学学报（自然科学版），2007（2）：157-160.