河南信阳地区种猪群衣原体血清抗体检测

马超锋，高进勇，胡积霞，李　何，马　云，徐永杰*

(1.信阳市动物疫病预防控制中心，河南信阳 464000；2.信阳学院理工学院，河南信阳 464003；3.信阳职业技术学院药学院,河南信阳 464000；4.信阳师范学院生命科学学院，河南信阳 464000)



河南信阳地区种猪群衣原体血清抗体检测

马超锋1，高进勇2，胡积霞1，李何3，马云4，徐永杰4*

(1.信阳市动物疫病预防控制中心，河南信阳 464000；2.信阳学院理工学院，河南信阳 464003；3.信阳职业技术学院药学院,河南信阳 464000；4.信阳师范学院生命科学学院，河南信阳 464000)

为了解信阳地区种猪群衣原体病流行情况，笔者于2013年3月—2015年10月，采用正向间接血凝试验(IHA)对信阳市65家猪场的1 324份猪血清样品进行了衣原体抗体检测。结果显示，猪衣原体抗体阳性猪场有27个，占检测猪场的41.5%，抗体阳性率为11.3%；2013年—2015年抗体阳性率分别为10.1%、11.4%和12.1%；不同季节抗体阳性率有变化，夏季最高，为13.1%，冬季最低，为9.6%；不同性别间抗体阳性率，母猪为11.7%，公猪为11.0%；1岁以内抗体阳性率最低，为8.0%，3岁以上最高，达到16.8%；不同年龄间猪衣原体抗体阳性率差异极显著(P<0.01)，且随年龄增长阳性率有增长的趋势，不同年份、不同季节、不同性别间抗体阳性率差异不显著(P>0.05)。鉴于猪衣原体病的流行状况，建议有关部门要做好该病的防控工作。

种猪；衣原体病；正向间接血凝试验；血清抗体；检测

衣原体病(Chlamydiosis)是一种重要的人兽共患传染病，猪衣原体病(Swine chlamydiosis)是由衣原体(Chlamydia)所引起的慢性接触性传染病，以妊娠母猪流产、产死胎和弱仔，新生仔猪肺炎、肠炎、胸膜炎、心包炎、关节炎，种公猪睾丸炎等多种临床症状为特征[1]。研究表明，猪可感染4种衣原体(猪衣原体、猫心衣原体、流产衣原体和鹦鹉热衣原体)[2]。猪衣原体病分布于世界各地，我国也时有发生，主要造成母猪流产、新生仔猪死亡等，给猪场带来较大的经济损失。猪衣原体病已成为国际上公认的造成种猪繁殖障碍综合征的重要病因之一，成为兽医界关注的热点问题之一。为了解信阳市近年来种猪群猪衣原体感染情况，笔者采用正向间接血凝试验对信阳市猪场进行了猪衣原体病血清流行病学调查，以对该病的防控提供参考依据。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1样品收集时间于 2013年3月—2015年10月间进行。

1.1.2样品的采集地点及制备1 324份血清样品来自信阳辖区内罗山县、平桥区、光山县、浉河区、商城县、新县、潢川县、息县和淮滨县65家不同规模猪场的种猪群(不同日龄公猪和母猪)，均未使用过猪衣原体疫苗，血液经3 500 r/min，离心5 min，取上清液1.5 mL于灭菌离心管中，统一编号。处理好的血清均置-20℃冰箱保存，备用待检。

1.1.3试剂衣原体间接血凝检测试剂盒,购自中国农业科学院兰州兽医研究所。

1.1.4主要器材TDZ5-WS台式低速离心机，长沙湘仪离心机仪器有限公司产品；10 μL～1 000 μL单道移液器、25 μL～300 μL多道移液器，德国Eppendorf公司产品；303系列电热恒温培养箱，上海树立仪器仪表有限公司产品；恒温振荡器，金坛市医疗仪器厂产品；超声波清洗器，深圳市科威信洗净科技有限公司产品；96孔聚苯乙烯反应板，苏州新康医疗器械有限公司产品。

1.2方法

1.2.1抗体检测将抗原置4℃冰箱保存，用时摇匀；铺板：每孔加稀释液0.075 mL；稀释血清：用稀释棒蘸取被检血清0.025 mL加入第1孔，呈4倍递增稀释3孔(即1∶4～1∶64)，第3孔弃去0.025 mL，孔内液体量仍为0.075 mL，同一板上同时设阳性、阴性和空白对照各2孔；加抗原：每孔内加稀释好的抗原0.025 mL，置微型振荡器上振荡2 min，盖上玻璃板在37℃作用2 h判定结果。

1.2.2结果判定对照各孔均成立，则被检血清1∶16孔出现“++”以上者为阳性；1∶4孔出现“+”以下者为阴性；1∶4孔“++”至1∶16孔“+”以下者为可疑，应重检。

1.2.3数据统计分析检测结果采用SPSS19.0

软件进行分析，通过卡方检验分析差异显著性，P<0.05时差异显著，P<0.01差异极显著。

2　结果

2.1不同县区猪衣原体抗体检测结果

结果见表1。

表1　采样地点猪衣原体抗体检测结果Table 1　Detection results of Chlamydia antibody in pig of different counties

2013年3月—2015年10月，共在65家不同规模猪场收集到血液样品1 324份。采用IHA方法检测猪衣原体抗体，阳性场27个，阳性场率为41.5%，统计分析表明，各县区间猪场阳性率差异不显著(P>0.05)，其中平桥猪场区阳性率最高，为60.0%，其次为罗山县的55.5%，最低的光山县为20.0%；检测样品1 324份，样品阳性率为11.3%，各县区之间样品阳性率差异不显著(P>0.05)，息县检出率最高，为15.1%，最低的新县为6.3%(表1)。

2.2不同年份猪衣原体抗体检测结果

2013年、2014年和2015年的抗体阳性率分别为10.1%、11.4%和12.1%，各个年份均有猪衣原体阳性检出，但差异不显著(P>0.05)(图1)。

图1　不同年份猪衣原体抗体检测结果

2.3不同季节猪衣原体抗体检测结果

从图2可以看出，不同季节猪衣原体抗体阳性率有变化，夏季最高，为13.1%，冬季最低，为9.6%(P>0.05)，即各个季节间猪衣原体阳性率差异不显著。

2.4不同性别猪衣原体抗体检测结果

检测结果显示(图3)，母猪抗体阳性率为11.7%，略高于公猪的11.0%，但差异不显著(P>0.05)。

图2　不同季节猪衣原体抗体检测结果

图3　不同性别猪衣原体抗体检测结果

2.5不同年龄段猪衣原体抗体检测结果

从图4可见，随年龄增长，猪衣原体抗体阳性率在升高，1岁以内最低，为8.0%，3岁以上最高，达到16.8%，对检测数据进行卡方检验分析显示，各个年龄段间抗体阳性率差异极显著(P<0.01)。

图4　不同年龄猪衣原体抗体检测结果

3　讨论

近年来，信阳市部分不同规模猪场的母猪群经常性发生繁殖障碍性疾病，造成母猪流产、死胎、木乃伊胎、产弱仔及新生仔猪死亡等，给我市生猪养殖业带来较大的经济损失。由于能引起母猪繁殖障碍综合征的疾病较多，有猪瘟、猪圆环病毒感染、猪蓝耳病、伪狂犬病、猪细小病毒病、猪弓形虫病等，给诊断和防控带来较大难度。因此，摸清猪衣原体病在信阳市猪场内的感染状况对准确诊断种猪疫病和采取综合防控措施有重要参考意义。本次血清流行病学调查采用IHA方法检测抗体，覆盖全市7县2区65个猪场，能够较全面的代表信阳市猪衣原体感染情况。从检测结果来看，猪衣原体抗体阳性场率为41.5%(27/65)，表明猪衣原体在信阳市感染已较普遍。2000年何启盖[3]等对我国5省(湖北、河南、广东、江西和海南)猪衣原体调查的场感染率为67.8%，其中河南的场阳性率为25%，低于本次调查；周平等[4]2008年调查福建龙岩15个猪场，场感染率为100%，远高于本次调查的41.5%。本次调查样品1 324份，抗体阳性率为11.3%，其他学者调查河南省的感染情况如下：何启盖等2000年[3]调查河南省阳性率为26.5%；王江辉等[5]2006年调查河南省部分地区(新乡、周口、焦作、开封、洛阳、安阳六地)的感染率为25.5%，均高于信阳市的阳性率；国内其他省份调查情况包括广东部分地区的66.4%[6]、青海的53.3%[7]、甘肃部分猪场的34.40%[8]、福建龙岩部分猪场的27.71%[4]高于本次调查，与云南部分地区的18.5%[9]、广东东莞的14.97%[10]相近，江苏淮安的5.44%[11]、辽宁铁岭的5.14%[12]、北京郊区的4.14%[13]低于本次调查。本次调查发现信阳市各县区猪场均有猪衣原体病阳性检出，分析造成感染率高的原因如下：一是近年来猪肉价格持续走高，部分养殖场户为追求经济效益，开始养殖猪或者扩大养殖规模，盲目引种，而对所引猪群健康状况缺少了解；二是饲养管理水平不高，我市大部分猪场规模不大，生产水平低下，有些养殖户对猪的饲养管理知识知之甚少，缺乏有效的生物安全管理措施，应激发病因素较多；三是重治疗轻防疫保健。

本次猪衣原体抗体检测结果显示，不同季节阳性率有差异，但不显著，夏季最高，为13.1%，冬季最低，为9.6%，与周平等[4]2008年报道的夏秋高于冬春季的情况相近；不同性别间衣原体抗体阳性率差异不显著，母猪略高于公猪(11.7%>11.0%)，与周平[4]报道相反；不同年龄猪间衣原体抗体阳性率差异极显著，且随年龄增大，阳性率有增大的趋势，分析原因可能与生长周期长的猪，较易接触到环境中处于感染阶段的衣原体有关。

衣原体病是可通过呼吸道等途径在多种动物间传播的重要人兽共患病，引起母畜流产、肺炎等，给人类和动物健康带来较大威胁。衣原体病缺乏明显的临产症状，但危害极大，因此准确的诊断显得尤为重要，临床上要注意猪衣原体病与猪蓝耳病、链球菌、猪瘟等的鉴别诊断。要做好信阳市猪衣原体病的防控，建议猪场采取综合性的防控措施：一是把好引种关。所引种猪进场前要检测，阳性猪杜绝进场；二是加强猪群检测。提高检测频次，扩大检测范围，不同阶段的猪群定期抽样进行抗体检测，根据检测结果结合临床表现采取针对性措施，阳性种猪要淘汰；三是猪场要做好灭鼠和防鸟工作。猪场内鼠类和鸟类在衣原体和其他病原体传播中发挥重要作用，也是重要传染源；四是严格猪场生物安全管理措施。控制人员进出猪场，做好日常消毒工作，猪场不同区域定时消毒，消毒药要轮换使用确保消毒效果；五是采用药物防治。四环素、大环内酯类和氟苯尼考等药物连续使用10 d～15 d可有效控制衣原体感染。

[1]陈溥言.兽医传染病学[M].5版.北京：中国农业出版社，2006:201-205.

[2]Jeffrey J Z,Locke A K,Alejandro R,et al.猪病学[M].10版.赵德明，张仲秋，周向梅，等，译.北京：中国农业大学出版社，2014:917-918.

[3]何启盖,陈焕春,吴斌,等.猪衣原体病和布鲁氏菌病血清学调查[J].中国兽医科技,2000,30(3):13-14.

[4]周平,林振营,王天芳,等.福建龙岩地区部分猪场衣原体病的血清流行病学调查[J].动物医学进展,2008,29(7):30-35.

[5]王江辉,陈陆,任向阳,等.河南部分地区猪衣原体感染的血清学调查研究[J].动物医学进展,2006,27(3):88-89.

[6]白挨泉,冯国金.广东部分地区猪衣原体病的血清学调查[J].中国畜牧兽医,2004,31(12):37-39.

[7]马怡隽,张立成.青海省畜禽衣原体病的血清学调查[J].中国兽医科学,2013,43(2):213-215.

[8]高双娣,程淑敏,周继章,等.甘肃省部分猪场猪衣原体血清抗体的检测[J].中国兽医科技,2003,33(6):28-29.

[9]毕峻龙,杨斌,高利波,等.云南省部分地区猪衣原体感染的血清学调查[J].动物医学进展,2011,32(3):134-136.

[10]朱燕秋,王锐彬,蔡奕琪,等.猪衣原体病血清流行病学调查[J].广东畜牧兽医科技,2007,32(4):26-27.

[11]蒋法成,葛东红,范兆才,等.江苏省淮安市淮安区猪衣原体病的血清学调查[J].中国猪业,2013,8(5):41-42.

[12]王海志.规模养猪场猪衣原体病的血清学调查[J].现代畜牧兽医,2004(11):26.

[13]田德雨,刘哲翔,李靖,等.集约化养猪场嗜流产衣原体病流行状况的初步调查[J].中国畜牧兽医,2012,39(1):210-213.

Seral Antibody Detection ofChlamydiain Breeding Swine Herds in Xinyang of Henan Province

MA Chao-feng1，GAO Jin-yong2,HU Ji-xia1，LI He3，MA Yun4，XU Yong-jie4

(1.XinyangAnimalDiseaseControlandPreventionCenter,Xinyang,Henan,464000,China;2.ScienceandTechnologyCollege,XinyangUniversity,Xinyang,Henan,464000,China;3.CollegeofPharmacy,XinyangVocationalandTechnicalCollege,Xinyang,Henan,464000,China;4.CollegeofLifeSciences,XinyangNormalUniversity,Xinyang,Henan,464000,China)

A survey was performed in order to understand the infection ofChlamydiain breeding swine herds in Xinyang district during the period from March 2013 to December 2015.By employing IHA, 1 324 serum samples collected from 65 pig farms in Xinyang were detected and analyzed.The results showed that 27 pig farms were positive,taking up 41.5% among all detected farms,and the average positive rate of detected samples was 11.3%;from 2013 to 2015, the positive rate was 10.1%,11.4% and 12.1% respectively; the positive rates ranged in different seasons,from 13.1% the highest in summer,to 9.6% the lowest in winter;the positive rate of hogs and sows is 11.7% and 11.0% respectively; pigs within one year old have the lowest positive rate (8.0%) while pigs above the age of three yeas have the highest positive rate(16.8%). It can be concluded that the differences of positive rates among pigs with various ages were extremely significant (P<0.01);and the positive rate increased as pigs get older,while there were no significant differences in positive rates between different years,seasons and sexes(P>0.05).In view of the prevalence of chlamydiosis in Xinyang,it is strongly suggested that the relevant executive departments take effective measures in preventing and controlling swine chlamydiosis.

breeding swine;Chlamydiosis；IHA；seral antibody;detection

2016-03-20

河南省信阳市动物疫病综合防控项目基金(2014年)

马超锋(1981-)，男，河南禹州人，高级兽医师，硕士，主要从事动物疫病防控工作。*通讯作者

S858.28

B

1007-5038(2016)10-0119-04