慢性乙型肝炎病毒感染者血清脂联素水平与体液免疫功能的相关性研究

徐莹莹，龚建玲，严亚丹，沈月爽

慢性乙型肝炎病毒感染者血清脂联素水平与体液免疫功能的相关性研究

徐莹莹，龚建玲，严亚丹，沈月爽

目的研究慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者血清脂联素（ADI）水平与体液免疫功能的相关性。方法选取正常对照组50例，慢性乙型肝炎(CHB)221例（其中慢性非活动性HBV携带组40例，活动性肝炎60例，重症肝炎24例，肝硬化59例，肝癌38例），分别测定ADI、白介素-6（IL-6）、干扰素-（IFN-）、体液免疫功能指标[免疫球蛋白A(IGA)、免疫球蛋白G（IGG）、免疫球蛋白M(IGM)、补体3（C3）、补体4(C4)]，比较上述指标在CHB不同临床阶段的差异性，分析ADI与上述指标的相关性。结果正常对照组与慢性非活动性HBV携带组上述指标差异均无统计学意义（均＞0.05），HBV感染患者（除外慢性非活动性HBV携带组）的ADI、IGA、IGG、IGM、IL-6，IFN-均明显高于正常对照组和慢性非活动性HBV携带组，随着机体免疫反应的加强，ADI、IGA、IGG、IGM、IL-6、IFN-等指标越来越高；而C3、C4均明显低于正常对照组和慢性非活动性HBV携带组（均＜0.05），随着机体免疫反应的加强，C3、C4逐渐耗尽，越来越低。ADI与IGA、IGG、IGM、IL-6，IFN-显著正相关，与C3、C4呈显著负相关。结论ADI可以作为评价HBV感染时肝脏免疫反应程度的指标，对CHB的体液免疫反应的影响尚不确定。

肝炎，乙型，慢性；脂联素；体液免疫

血清脂联素（ADI）是由脂肪组织分泌的一种细胞因子，已有研究很多集中在非酒精性脂肪肝和ADI的相关性，大量研究证实，非酒精脂肪肝群体的ADI是低于正常对照组的[1]。ADI与慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染的相关性研究甚少，在已有的研究中ADI对机体的免疫功能影响结论也不统一，有研究认为ADI会通过抑制白介素-6（IL-6）、干扰素-（IFN-）的分泌减弱机体的免疫反应[2]。笔者在预实验中发现，随着机体免疫反应的进行，ADI的水平会明显升高，这与已有的研究结果[3]是相吻合的；但同时，笔者的预实验表明随ADI升高，IL-6、IFN-的水平与ADI表现出很强的正相关性，那ADI对于机体免疫反应的抑制作用就无法证实。为验证笔者的预实验，分析ADI在HBV感染者体液免疫中的作用，笔者就HBV感染的不同阶段的ADI水平与IL-6、IFN-及相关的免疫功能指标进行检测，比较上述指标在不同临床阶段的差异性，分析ADI与各个指标的相关性。现将结果报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料选择2012年6月至2013年12月浙江省慈溪市人民医院（标本在浙江医院检测）收治的221例HBV感染者。其中男121例，女100例；年龄17～79岁，平均（34.53±8.01）岁。CHB患者根据肝炎活动程度分为慢性非活动性HBV携带组40例、活动性肝炎60例、重症肝炎24例、肝硬化59例、肝癌38例，诊断、分型符合参考文献[4]。所有病例均通过血清学检测排除其他肝炎病毒感染，排除合并恶性肿瘤、自身免疫性肝病、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病和糖尿病等。正常对照组50例，其中男25例，女25例；年龄18～74，平均（36.33±7.37）岁。

1.2研究方法所有标本采用日本积水创公司生产的黄管（含分离胶及促凝剂），均与清晨空腹抽取静脉血5 ml，以3 000 r/min的速度离心10 min，离心后留取血清保存于－70℃冰箱，待所有标本收齐后一起检测。用ELISA法(试剂盒均购自 eBioscience有限公司)检测ADI、IL-6、IFN-水平，BECKMAN-IMMAGE免疫比浊法（BECKMAN原装配套试剂）检测免疫球蛋白A(IGA)、免疫球蛋白G（IGG）、免疫球蛋白M(IGM)、补体3（C3）、补体4(C4)。

1.3统计方法运用SPSS 17.0软件进行统计学分析。计量资料以均数±标准差表示，多组比较采用单因素方差分析，多组间两两比较采用LSD-比较；脂联素与其他变量资料行Spearman等级相关分析。＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1ADI、IFN-、IL-6、IGA、IGG、IGM、C3及C4在各组的比较ADI和IFN-水平在HBV感染者（除外慢性非活动性HBV携带组）的水平均显著高于正常对照组和慢性非活动性HBV携带组（均＜0.05）；肝硬化组、肝癌组、重症肝炎组的水平均显著高于活动性肝炎组（均＜0.05）；重症肝炎组显著高于肝硬化和肝癌组（均＜0.05）。IL-6在HBV感染者患者（除外慢性非活动性HBV携带组）的水平均显著高于正常对照组和慢性非活动性HBV携带组（均＜0.05）；肝硬化组、肝癌组、重症肝炎组差异均无统计学意义（均＞0.05），但均显著高于活动性肝炎组（均＜0.05）。肝硬化组、肝癌组、重症肝炎组IGA、IGM水平均显著高于正常对照组和慢性非活动性HBV携带组；活动性肝炎组与正常对照组和慢性非活动性HBV携带组差异无统计学意义（＞0.05）；肝硬化组、肝癌组、重症肝炎组的水平均高于慢性活动性肝炎组（均＜0.05）；IGM重症肝炎组显著高于肝硬化和肝癌组（均＜0.05）。IGG在HBV感染者（除外慢性非活动性HBV携带组）的水平均显著高于正常对照组和慢性非活动性HBV携带组，重症肝炎组的水平显著高于肝硬化组和肝癌组，高于活动性肝炎组（均＜0.05）。C3在HBV感染者（除外慢性非活动性HBV携带组）的水平均显著低于正常对照组和慢性非活动性HBV携带组（均＜0.05）；与活动性肝炎和肝癌组相比，肝硬化和重症肝炎的水平更低；重症肝炎的水平要低于肝硬化。C4水平HBV感染者（除外慢性非活动性HBV携带组）的水平均低于正常对照组和慢性非活动性HBV携带组，与活动性肝炎、肝硬化、肝癌组比较，重症肝炎组显著降低。见表1～2。

2.2HBV感染者血清ADI水平与体液免疫功能指标的的相关分析ADI浓度与IGA、IGA、IGG IL-6、IFN-呈正相关，与C3、C4呈负相关。见表3。

3　讨论

HBV感染临床表现多样化，随着病程的进展，机体的免疫系统会有不一样的反应，反应的强烈程度，可以通过几个体液免疫IGA、IGG、IGM、C3和C4来衡量。免疫反应加强时，IGA、IGG、IGM分泌升高，随着免疫反应加强，C3、C4耗尽水平下降。近年来，免疫因素在CHB发病过程中的作用越来越受到重视。HBV感染机体后，宿主免疫反应的强弱、促炎和抗炎细胞因子相互斗争的结果都影响着乙型肝炎发病及其转归，并与肝脏损伤密切相关。研究表明，各型乙型肝炎患者体内都存在明显的促炎和抗炎细胞因子失衡。当然HBV感染机体的免疫反应十分复杂，有太多的因素会影响IFN-、IL-6等具有清除HBV作用因子的分泌，这也是目前研究CHB免疫反应的热点。

表1　病例组与正常对照组血清脂联素及各指标水平比较

ADI是因首先在小鼠脂肪细胞中发现而得名。因其有广泛的生理作用，尤其具有抗炎作用，而成为近年慢性肝病的研究热点。ADI是通过与其在细胞膜上的受体结合起作用的。目前已被克隆的人脂联素受体主要有两种：AdipoR1 和AdipoR2，前者主要表达于心肌和骨骼肌，后者主要表达于肝脏。ADI与其相应受体结合后，通过活化AMP激酶（AMPK)和过氧化物酶体增殖物激活受体-（PPAR-）在心血管疾病、类风湿关节炎等疾病时发挥抗炎、调节免疫力等作用[5-8]。目前关于CHB和ADI的研究甚少，究其原因就是因为ADI对CHB的影响机制不明确。基于上述原因，笔者将ADI与IFN-、IL-6等体液免疫相关指标关联性作为研究的主旨。

本文结果显示IGA、IGG、IGM水平大体上是重症肝炎组＞肝硬化组、肝癌组＞活动性肝炎组＞正常对照组及慢性非活动性HBV携带组；C3、C4与之相反，可以认为HBV感染患者机体的免疫反应程度：重症肝炎组＞肝硬化组、肝癌组＞活动性肝炎组＞正常对照组及慢性非活动性HBV携带组。IFN-、IL-6的水平，其趋势与IGA、IGG、IGM一致，表明IFN-、IL-6的确在加强体液免疫上起到正向作用。分析ADI的水平发现，ADI的水平与IFN-、IL-6、IGA、IGG、IGM水平正相关，与C3、C4负相关。这就意味着，CHB患者血清ADI水平与IFN-、IL-6水平变化是一致的，ADI没有抑制IFN-、IL-6，或者说ADI对CHB患者的体液免疫反应没有起到抑制作用。这与以往的研究结果[2，9]是不同的，证明HBV感染时，ADI对体液免疫无影响。但ADI与肝脏的免疫反应程度是正相关的，ADI可作为评价肝脏免疫反应程度的指标。

表3　ADI水平与各指标的相关性

HBV感染患者ADI水平升高的原因有：（1）受损肝细胞可诱导ADI的表达。有研究提示 ADI也可在肝脏中产生，HBV感染患者在因HBV介导的免疫反应肝细胞受损后，促使免疫反应加强，故IGA、IGG、IGM分泌升高，而C3、C4耗尽水平下降，同时受损肝细胞将诱导ADI的表达升高[10]。（2）ADI排泄障碍。Tacke等[11]的研究说明ADI可能经由胆道排泄。重症肝炎时肝细胞大量坏死同时伴胆汁淤积，这导致ADI的排泄障碍，循坏中的ADI堆积。这可能就是在本试验中重症肝炎组ADI的水平明显高于其他组的一个原因。这与以往的研究结果[12]是相同的。（3）与炎症因子的对抗性上升。有研究显示酒精性肝病患者ADI水平明显上升，与肿瘤坏死因子水平正相关[13]。HBV感染患者尤其是重型肝炎患者在进展中，将产生大量肿瘤坏死因子等炎症因子[12]。本试验中IL-6、IFN-等促炎细胞因子在重型肝炎患者明显高于其他组，作为对炎症的控制和对机体的保护，ADI对抗性上升也明显。ADI对CHB的免疫反应的影响尚不确定，还需研究机制方向解决；随着深入研究，其有望成为HBV感染患者提供有效治疗和控制病情的一种新途径。

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10.3969/j.issn.1671-0800.2016.05.016

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A

1671-0800(2016)05-0592-03

2016-02-18

（本文编辑：姜晓庆）

315300浙江省慈溪，慈溪市人民医院（徐莹莹、龚建玲、严亚丹）；浙江医院（沈月爽）

徐莹莹，Email：xyy9610@ sina.com